神经生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用

背景神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对神经元的存活、神经纤维的生长和分化以及再生起重要作用,是维持中枢神经和周围神经功能的重要活性因子,对许多疾病如神经系统变性疾病、老年性痴呆、脊髓损伤、脑卒中致瘫痪等均有潜在的治疗价值.目的测定经二硫化碳所致视神经损害的大鼠在治疗前后视觉诱发电位的变化,来证实神经生长因子对受损视神经的治疗效果.设计完全随机设计,对照实验研究.地点和材料研究地点为解放军上海第二军医大学基础部.材料为Wistar健康成年大鼠,体质量240～340g,雌雄各半,由第二军医大学实验动物中心提供.方法与主要观察指标将大鼠随机分成4组NGF 5 000 U/kg组、NGF1 000 U/kg组、NGF 200 U/kg组和空白对照组.将清醒已埋好电极的大鼠进行固定,测定其视觉诱发电位及模式翻转诱发电位.结果大鼠视神经损伤模型经神经生长因子治疗20 d后,模式反转诱发电位潜伏期[NGF 5000 U/kg组N1为(42.9±5.3)s,P1为(59.9±5.6)s,N2(93.8±5.9)s]和闪光诱发电位的潜伏期[NGF 5 000 U/kg组P1为(31.2±2.6)s,N1为(37.9±4.0)s,P2为(54.7±4.9)s,N2为(85.1±5.2)s]与对照组相比均有明显的缩短.结论神经生长因子能明显改善视神经传导功能,并有量-效关系,提示神经生长因子对视神经损伤有一定的治疗作用.     

小鼠肝脏持续低灌注模型的建立及其对热缺血再灌注损伤的耐受性

目的 建立一种稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,并在此基础上研究肝脏持续低灌注对小鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响.方法 选用6～8周龄C57BL/6小鼠建模,将门静脉缩窄至1 mL注射器针头直径,门静脉缩窄后3d、7d、14d和21 d行肝功能及肝脏组织病理学检测;选用稳定的模型小鼠行70％缺血再灌注手术,再灌注3h、24 h、48 h后行肝功能及肝脏组织病理学检测.对照组采用正常C57BL/6小鼠行缺血再灌注手术.结果 小鼠门静脉缩窄术后,丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)均有不同程度的升高,在7d时达到高峰[ALT:(60.8±6.2)U/L vs (25.5±2.8) U/L,P＜0.001;AST:(74.9±6.1)U/L vs (39.1±3.2) U/L,P＜0.001),同时H-E染色显示7d时肝细胞损伤最重,并且有较多炎细胞浸润;在21 d时,ALT基本恢复正常水平(P＞0.05),而AST仍高于正常水平(P=0.03).低灌注处理7d的小鼠进行缺血再灌注手术后,肝酶和组织病理学检查显示肝细胞损伤较对照组显著加重,肝酶在再灌注3h达到高峰[ALT:(8 217.0±1 111.8) U/L vs(5 597.4±1 015.3) U/L,P=0.004;AST:(8 548.2±1 155.4)U/L vs(5 765.4±956.9)U/L,P=0.003];再灌注48 h时,对照组小鼠ALT和AST均恢复正常,而经过低灌注处理的小鼠肝酶仍高于对照组[ALT:(608.8±442.9)U/L vs (47.4±20.1)U/L,P=0.008;AST:(861.8±442.8)U/L vs (70.8±68.3)U/L,P=0.008).结论 成功建立了稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,经持续低灌注处理后的肝脏对热缺血再灌注损伤的耐受能力显著降低,这在一定程度上能够模拟临床上心死亡器官捐献供肝的状况.     

外源性一氧化碳释放分子3抑制肾脏固有树突状细胞活化的作用机制

目的：观察外源性一氧化碳释放分子3（Carbon Monoxide-releasing molecules,CORM-3, CO RM-3）对肾固有树突状细胞(Renal Dendritic Cell,rDC)生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用C57BL/6J,TLR4-/-及TLR4+/+小鼠,制备肾脏单细胞悬液,磁珠分选CD11c + rDC,流式细胞术鉴定rDC纯度。CORM-3处理新鲜分离的rDC,ELISA检测rDC培养液上清中TNF-α蛋白水平;RT-PCR检测TLR4及TNF-α基因表达。另外建立小鼠肾脏热缺血30min + 冷保存24h模型,在冷保存期间经CORM-3处理之后分选rDC,抽提RNA,行RT-PCR检测TNF-α表达。结果：CORM-3明显抑制小鼠未成熟rDC的TLR4表达,下调作用呈剂量相关性。相较于无活性的iCORM (inactive CO-releasing molecules),CORM-3抑制LPS刺激后的rDC表达TNF-α。当TLR4缺陷之后,CORM-3不再抑制rDC 表达TNF-α。结论：CORM-3可显著抑制肾脏未成熟rDC 表达TLR4,也抑制LPS刺激和缺血损伤时炎症因子的表达,但对于TLR4缺陷小鼠这一抑制作用消失,提示CORM-3对内源性配体介导的rDC活化过程的抑制作用是由TLR4信号通路介导。     

人白介素-13对牛主动脉内皮细胞表达黏附分子的影响

目的研究人白介素-13（hIL-13）对牛主动脉内皮细胞（BAECs）表达细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和E-选择素的影响，为hIL-13应用于诱导异种移植免疫耐受、减轻异种移植排斥反应提供实验依据。方法用不同浓度的hIL-13（2、5、10、20及40ng／ml）孵育BAECs2h后，再与肿瘤坏死因子-α（TNF-α．4ng／ml）共孵育6h或18h；应用细胞-酶联免疫吸附分析方法（Cell—ELISA）检测BAECs表面的E-选择素和ICAM-1的表达；用MTT方法测定hIL-13对BAECs活性的影响。结果用hIL-13在5～20ng／ml浓度内预处理BAECs后，能明显抑制TNF-α诱导的E-选择素与ICAM-1的表达，并呈现一定的剂量依赖性（P〈0．01）。经不同浓度hIL-13处理的BAECs活性与未经hIL-13处理者相比差异无统计学意义。结论hIL-13能明显抑制BAECs表达E-选择素与ICAM-1，诱导异种移植的免疫耐受，且hIL-13对BAECs无损伤作用。     

腺苷预适应对缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察预适应（缺血及腺苷）对大鼠下肢缺血再灌注后心、肺损伤的保护作用。方法：雄性SD大鼠随机分4组,每组8只。行腹主动脉下端阻断及再灌注各120min。组I为手术对照组。组Ⅱ在缺血再灌注前先行阻断腹主动脉5min后开放5min,共4次。组Ⅲ麻醉后经颈静脉持续滴注 腺苷生理盐水溶液。组Ⅳ为假手术对照组。4组均于麻醉后经舌静脉注入伊文氏兰（Evank's blue dye)溶液,动脉插管测定再灌注后的平均动脉压（MAP）。实验终点取心、肺组织行病理检查,心肌ATP酶,心、肺组织丙二醛（malonyldiadehyde,MDA)含量及Evan氏兰含量测定。结果：组Ⅰ、Ⅲ再灌注后MAP均显著低于组Ⅱ、组Ⅳ（P＜0．05）,组Ⅰ、Ⅲ间,组Ⅱ、Ⅳ间无显著性。组Ⅰ心肌ATP酶（包括Na^ K^ ATPase,Mg^2_ATPase及Ca^2 ATPase)活力均低于余3组,余2组间2,2比较均无显著差异。组Ⅰ心,肺组织MDA含量显著高于余3组,余3组间2,2比较均无显著差异。组Ⅰ肺Evan氏兰含量显著高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,组Ⅱ、Ⅲ高于组Ⅳ,组Ⅱ、Ⅲ间无显著差异。结论：缺血和腺苷预适应能改善大鼠下肢缺血再灌注后心,肺组织和功能损伤。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的 探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义。方法 Allen’s方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化。结果 脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平。结论 脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过“胞体—轴突—靶器官”途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药。     

心肺复苏后大鼠神经细胞Caspase-3表达与细胞凋亡关系的实验研究

目的 探讨心肺复苏后大鼠脑组织Caspase-3表达与细胞凋亡的关系.方法建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心脏骤停/心肺复苏(CA/CPR)的动物模型,于各时相点断头留取脑组织,采用免疫组化的方法观察CPR后脑组织Caspase-3蛋白的表达,TUNEL检测神经细胞凋亡.结果对照组脑组织内仅有少量TUNEL阳性细胞;ROSC后3 h出现表达阳性细胞,ROSC后6 h表达开始增多,ROSC后12 h进一步上升(P<0.05),其后各组均处于高水平表达.Caspase-3表达均在ROSC后24 h显著增加,直至ROSC后72 h,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),Spearman等级相关检验Caspase-3表达与细胞凋亡明显相关(r=0.909).结论CA/CPR后大鼠脑线粒体Caspase-3蛋白高表达可能是细胞凋亡增加的原因之一.     

大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA表达变化及意义

目的　探讨 GDNFm RNA在大鼠脊髓损伤后表达变化及其意义。方法　改良 Allen’s脊髓撞击 (10 g× 7.5 cm)致伤大鼠 T1 段脊髓 ,以 β- Actin为内参照物 ,应用半定量 RT- PCR方法 ,观察大鼠脊髓损伤前及损伤后不同时间 GDNFm RNA表达变化。结果　 GDNFm RNA在正常成年大鼠脊髓微量表达 ,脊髓损伤后 2 4h表达增加 5倍 ,72 h增加 2 0倍 ,7d增加 4倍 ,10 d仍高于正常水平。结论　脊髓损伤后早期 GDNFm RNA表达增加 ,是神经元自我保护作用的一种表现 ;损伤神经元修复需要大量 GDNF,应用 GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药     

军队医院药品收益主成分回归分析

目的 通过分析7所军队医院2007-2010年药品收益的影响因素,建立药品收益的回归方程。方法 数据摘自2007-2010年7所医院财务收支数据和绩效考评数据;建立Excel 2003数据库,运用SPSS18.0进行医院规模、服务量、当地经济水平、药品加成率等变量的主成分分析。遴选3个主成分进行多元回归分析,建立回归方程。结果 ⑴医院规模和服务量是药品收益的主要影响因素;⑵均次费用对医院药品收益有一定影响;⑶药品加成和当地经济水平与医院药品收益呈负相关。     

71所医院临床医学重点学科超效率与影响因素分析

采用DEA超效率模型,对71个医院临床医学重点学科DEA评价有效率的个体进行超效率和影响因素分析,评价出更有效率的个体;并利用多元回归分析法,分析了临床医学重点学科效率的影响因素。根据分析结果,提出了控制规模、强化科研投入与转化、提高专用设备使用效率、加强高学历医师培养等对策。