阻断白介素⁃17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化及肺组织Bax/Bcl⁃2表达的影响

目的：研究阻断白介素（interleukin,IL）?17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化和肺组织Bax/Bcl?2表达的影响。方法：80只C57BL/6小鼠随机分为模型组、抗IL?17处理组、同型IgG处理组和PBS处理组。小鼠气管内一次性注入博来霉素诱导肺纤维化形成,PBS处理组给予等量生理盐水。4组小鼠分别从造模前1 d每隔3 d通过尾静脉给予抗鼠IL?17单克隆中和抗体或同型对照抗体或PBS。在造模后28 d,取各组小鼠肺组织,利用Masson染色及羟脯氨酸含量测定检测各组小鼠肺纤维化程度,通过流式细胞术测定肺组织细胞凋亡情况,采用免疫组织化学法检测肺组织Bax和Bcl?2的表达。结果：阻断IL?17后,小鼠肺纤维化程度明显降低（P < 0.01）,羟脯氨酸含量显著下降（P < 0.01）,细胞凋亡率明显降低（P < 0.01）,Bax表达明显减弱（P < 0.01）,Bcl?2表达虽无明显变化,但Bax/Bcl?2比值显著下降（P < 0.01）。结论：阻断内源性IL?17后,能显著降低博来霉素诱导的肺纤维化,显著降低肺组织细胞凋亡率和Bax/Bcl?2比值,这些数据提示阻断内源性IL?17活性改善博来霉素诱导的小鼠纤维化程度,可能与Bax/Bcl?2介导的线粒体细胞凋亡通路有关。     

阻断白介素-17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化及肺组织Fas/FasL表达的影响

目的：探讨阻断白介素-17(interleukin-17,IL-17)对博来霉素(bleomycin,BLM)诱导小鼠肺纤维化、细胞凋亡和肺组织Fas/FasL表达的影响。方法：80只C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为假手术组(SG)、BLM组(BG)、中和抗体组(NG)和抗体对照组(IG),经小鼠气管内一次性注入BLM诱导肺纤维化的形成,假手术组则给予等量生理盐水。NG和IG小鼠分别从造模前1天每隔3 d通过尾静脉给予抗鼠IL-17单克隆中和抗体或同型对照抗体,SG和BG则给予等量PBS。于造模后28 d,处死各组小鼠,取肺组织,通过Masson染色及羟脯氨酸含量测定评价各组小鼠肺纤维化程度,用流式细胞仪和免疫组织化学法分别检测肺组织细胞凋亡和Fas/FasL的表达情况。结果：与BG和IG相比,NG小鼠肺纤维化程度明显减弱(P＜0.01),羟脯氨酸含量显著下降(P＜0.01),细胞凋亡率和Fas/FasL表达亦显著降低(P＜0.01)。结论：内源性IL-17被阻断后,能显著改善BLM诱导的肺纤维化,降低细胞凋亡率和Fas/FasL表达,表明阻断IL-17对BLM诱导的小鼠纤维化改善与Fas/FasL凋亡通路有关。     

持续果糖饮水诱导小鼠胰岛素抵抗机制

目的 探讨果糖诱导小鼠胰岛素抵抗机制。方法 小鼠随机分为3组,分别为单纯饮水的正常对照组,10%果糖饮水组,10%果糖+精氨酸饮水组。实验时间为4周,期间,分析血清促胰岛素肽（GIP）和胰高血糖素样肽-1（GLP-1）水平;4周后,测定各组小鼠空腹血糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数;分析各组小鼠肝脏活性氧簇（ROS）水平。结果 10%果糖饮水导致小鼠发生胰岛素抵抗,果糖干预不影响小鼠血清GIP和GLP-1水平,但肝脏组织ROS水平升高（P <0.05）;10%果糖+精氨酸饮水组胰岛素抵抗指数没有显著变化,血清GLP-1水平升高,肝脏组织ROS水平没有显著变化。结论 10%果糖饮水使小鼠肝脏组织ROS水平升高,而血清GLP-1水平不升高,无法发挥GLP-1对肝脏的保护作用,最终升高的ROS引起小鼠胰岛素抵抗。     

胰岛素抵抗小鼠血清微小RNA的芯片及信息学分析

 目的: 探讨胰岛素抵抗小鼠血清水平微小RNA(microRNAs)变化图谱及相关microRNAs的可能作用机制。方法: 以高脂饲料喂养昆明小鼠,制备胰岛素抵抗模型;以微阵列芯片技术分析胰岛素抵抗小鼠及正常小鼠血清水平microRNAs变化图谱并以实时荧光定量PCR进行验证;以miRanda数据库对差异microRNAs进行靶点基因预测;以miRBase数据库获得与胰岛素抵抗相关的microRNAs序列;基于microRNAs序列,应用STRING在线分析工具(http://string.embl.de/)预测蛋白质相互作用关系。结果: 胰岛素抵抗小鼠血清中miR-125、miR-126、miR-143、miR-30a、miR-199a、miR-127、miR-184、miR-30e、miR-134、miR-195、miR-206、miR-429、miR-212、miR-362、miR-382、miR-154和miR-466h表达显著上调,miR-211、miR-504、miR-877和miR-1930显著下调。与胰岛素抵抗密切相关的miR-143可以结合脂肪量及肥胖相关蛋白(FTO)的3'-UTR,并且FTO与Rpgrip1l、Tmem18、Mc4r、Npy、Hhex、Tcf712、Cdkal1、Slc30a8、Igf2bp2和Thada相互作用。结论: 在高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠血清中有21种microRNAs相比正常小鼠出现了显著变化,表达显著上调的有17个。应用在线分析工具发现与胰岛素抵抗密切相关的miR-143可以调节FTO蛋白表达,并且FTO与另外10种与糖尿病发生发展相关的蛋白相互作用,这将有助于对胰岛素抵抗机制的全面了解。