低氧对人肺腺癌A549细胞迁移和黏附的影响

目的：探讨低氧对人肺腺癌A549细胞迁移以及与血管内皮细胞黏附的影响。方法：细胞划痕实验和Transwell实验检测低氧对A549细胞迁移和浸润的影响；细胞黏附实验检测低氧对A549细胞与血管内皮细胞黏附的影响；免疫荧光法观察低氧对A549细胞中E-cadherin、β-catenin、纤维状肌动蛋白（F-actin）分布的影响；荧光素酶报告基因检测低氧对A549细胞中依赖于缺氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）的转录活性的影响。结果：低氧可以促进A549细胞的迁移、浸润和与血管内皮细胞的黏附，影响A549细胞中E-cadherin和β-catenin的分布及F-actin细胞骨架的重排，上调A549细胞中依赖于HIF-1的报告基因的表达。结论：低氧促进A549细胞的迁移、浸润和与血管内皮细胞的黏附可能是通过调控A549细胞中依赖于HIF-1基因的表达，进而影响细胞中E-cadherin和β-catenin分布和F-actin细胞骨架的重排。     

脑内白细胞介素1的结构、功能以及与疾病的关系(二)

五　ＩＬ-1对脑功能的影响及其作用机制1、致热效应:ＩＬ-1的最早名称─内源性致热原最能反映它的致热效应。给家兔注射30～50ｎｇ/ｋｇ纯化的这种蛋白质能引起发热,后来发现脑内给予ＩＬ-1引起最大效应的剂量比外周给药引起相同效应的剂量要小得多,例如,重组ＩＬ-1外周给药需1～2ｕｇ,才能引起发热和代谢率的最大改变,而脑室给予5～10ｎｇ的ＩＬ-1就能达到同样效果[1]。现在认为ＩＬ-1是通过依赖前列腺素的机制而引起发热。脑室给予ＩＬ-1引起的发热也依赖于中枢儿茶酚胺能系统,因预先给予6-羟多巴胺可阻断ＩＬ-1引起的啮齿动物的发热。2、…     

不同日龄小鼠卵丘颗粒细胞对卵泡刺激素/缺氧诱导因子-1信号通路的影响

目的研究不同日龄小鼠颗粒细胞对卵泡刺激素(FSH)诱导的缺氧诱导因子-1/血管内皮细胞生长因子(HIF-1/VEGF)信号通路的影响。方法超排卵方法取出卵母细胞和颗粒细胞,进行体外受精;荧光素酶报告基因实验检测常氧和低氧培养条件下,不同日龄小鼠卵丘颗粒细胞对FSH诱导的HIF-1/VEGF信号通路的应答;蛋白质免疫印迹技术检测FSH受体的表达水平。结果雌性小鼠超排卵数和卵母细胞体外受精能力与小鼠日龄数呈负相关;FSH上调小鼠卵丘颗粒细胞HIF-1α的转录活性;免疫印迹结果显示小鼠颗粒细胞中FSH受体的表达水平随着日龄数的增加呈下降趋势。结论小鼠卵丘颗粒细胞对FSH诱导的HIF-1/VEGF信号通路的应答反应随小鼠天日龄数增加而下降,与颗粒细胞表面FSH受体的表达下降相一致。雌性小鼠随着年龄增加引起的生殖能力下降可能与颗粒细胞表面FSH受体表达减少有关。     

无精子症病因及临床诊断探讨(附46例报告)

无精子症是指射出的精液经离心沉淀后经显微镜观察，连续3次均未发现精子。占男性不育症的10％-20％，是目前男性不育的较大诊治难题。无精子症分为精子通路梗阻或缺如导致的梗阻性无精子症和精子发生障碍导致的非梗阻性无精子症。探讨无精子症诊治规范化，系统的合理运用成熟的实验指标使其发挥最大的功效，寻求一种适合我国国情的无精子症诊治方法，并为辅助生殖技术提供科学的技术评估方法，     

金雀异黄素对雌性小鼠卵母细胞成熟及其受精能力的影响

目的:探讨金雀异黄素(Gen)对小鼠卵母细胞成熟的影响.方法:用不同浓度的Gen给小鼠腹腔注射后,检测Gen对卵母细胞生发泡破裂(GVBD)、第一极体(PB1)释放、体外受精和胚胎发育等的影响;用含不同浓度的Gen的培养液培养小鼠未成熟卵母细胞,观察卵母细胞GVBD、PB1释放的发生率;结果:腹腔注射Gen可以增加小鼠子宫湿重,增加小鼠的超排卵数(除高剂量组外)、影响卵母细胞体内成熟过程中的GVBD和第一极体的释放(Gen-0.5组除外),高剂量组小鼠成熟卵母细胞的受精能力和胚胎发育能力均下降.Gen以剂量依赖的方式抑制体外培养小鼠未成熟卵母细胞的GVBD和PB1的释放.结论:Gen能够可逆性地抑制小鼠未成熟卵母细胞的成熟,高剂量的Gen可能影响卵母细胞减数分裂过程,降低卵母细胞的受精能力,提示育龄妇女摄人过量Gen及其化合物可能会导致生育能力降低,甚至造成不育或不孕.     

基于转录组测序分析转化生长因子-β1诱导肾纤维化机制

目的:探究转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾纤维化的机制。方法:将TGF-β1处理和未处理的肾成纤维细胞NRK-49F进行转录组测序，采用DESeq2分析测序结果，以错误发现率低于0.05且log2FC绝对值大于1为标准筛选差异表达的基因，并对差异表达的基因进行基因本体（GO）、京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。进一步筛选差异表达基因中编码转录因子的基因，并利用单侧输尿管梗阻诱导的小鼠肾纤维化模型和高通量基因表达数据库GSE104954数据集对这些基因在肾纤维化过程中的表达进行验证。结果:TGF-β1处理6、12和24 h后，分别有552、1209和1028个差异表达基因。GO分析表明，这些差异表达基因在发育、细胞死亡和细胞迁移过程中显著富集。KEGG分析显示，在TGF-β1诱导早期（TGF-β1处理6 h）主要表现为Hippo、TGF-β、Wnt信号通路的变化，而在TGF-β1诱导晚期（TGF-β1处理24 h）主要表现为细胞外基质受体相互作用、局灶黏附和黏附分子连接等相关通路的改变。在TGF-β1处理6 h时291个上调的差异表达基因中，Snai1、Irf8、...     

AdH1-siRNA-Survivin抗小鼠黑色素瘤生长和转移的研究

目的研究针对Survivin的腺病毒介导的siRNA对小鼠黑色素瘤生长和转移的影响。方法构建表达小鼠Survivin序列特异性siRNA复制缺陷型重组腺病毒（AdH1-siRNA—Survivin）,利用Western blot方法检测感染AdH1—siRNA—Survivin的B16BL6细胞中Svrvivin蛋白的表达;采刚皮下注射法建立小鼠黑色素瘤生长模型,采用瘤内或周同多点注射相应的重组腺病毒,每周1次,每次2×10^9FPU,共3次。定期测量各组肿瘤体积,应用免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）;采刖尾静脉注射感染重组腺病毒的B16BL6细胞建立小鼠肿瘤转移模型,计数并比较各组小鼠肺表面的黑色转移结节数。、结果AdH1-siRNA—Survivin可以显著下凋B16BL6细胞Survivin蛋白的表达;与空白对照组和空载病毒组（AdH1-Empty）相比,AdH1-siRNA—Smwivin注射组显著抑制小鼠肿瘤的生长,降低肿瘤的MVD数（P〈0．01）;感染AdH1-siRNA—Survivin的B16BL6细胞小鼠的肺转移灶数目也显著降低（P〈0．01）。结论重组腺病毒介导的针对Survivin的siRNA技术有效地下调细胞中Survivin的表达,能减少肿瘤内微血管生成、抑制肿瘤生长和转移。     

大鼠脑内白细胞介素1I型受体mRNA的分布

目的 研究大鼠脑内白细胞介素１Ｉ型受体ｍＲＮＡ表达神经元的分布,材料和方法：以＾３６Ｓ标记的ＩＬ－１ＲｔＩｃＤＮＡ作为探针,采用原位杂交技术检测大鼠脑内ＩＬ－１ＲｔＩｍＲＮＡ表达神经元分布广泛而又不均匀,根据表达ＩＬ－１ＲｔＩｍＲＮＡ神经元的密度变化,大鼠脑可分为四种密度区,非常高,高,中等,低密度区,结论;提示脑内白细胞介素１通过其Ｉ型受体介导而发挥作用。