膀胱出口部分梗阻大鼠膀胱超微结构和尿流动力学的关系

目的观察大鼠膀胱出口部分梗阻(PBOO)后尿流动力学及超微结构变化,探讨膀胱出口部分梗阻后超微结构和尿流动力学改变的关系。方法 48只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)24只、PBOO 2周组8只、4周组8只、8周组8只。饲养后,于相应周数解剖膀胱,测定膀胱重量、不稳定收缩发生率、容量、漏尿点压及膀胱顺应性,观察逼尿肌超微结构改变等指标。结果 PBOO 2周、4周、8周膀胱重量分别为(220±24.2)mg、(327.8±27.7)mg、(521.6±24.7)mg,Sham组为(108.5±6.3)mg(P0.05);不稳定收缩发生率分别为50%(4/8)、87.5%(7/8)、37.5%(3/8),Sham组0%为(0/24)(P0.05);膀胱最大容积分别为(0.65±0.26)mL、(1.57±0.70)mL、(5.62±1.39)mL,Sham组为(0.30±0.08)mL(P0.05)。梗阻组漏尿点压为2周组(31.5±4.78)cmH2O、4周组(56.5±7.46)cmH2O、8周组(33.00±9.92)cmH2O,Sham组(22.13±3.18)cmH2O(P0.05)。膀胱顺应性PBOO 2周组、4周组与Sham组比较,差异无统计学意义(P0.05),8周组与Sham组相比,差异有统计学意义(P0.05)。透射电镜观察结果为大鼠PBOO后线粒体增多、水肿,细胞膜穴样凹陷增多,中间连接减少、缝隙连接及胞突连接增多。结论膀胱出口部分梗阻后由代偿期进入失代偿期,可以通过尿流动力学进行检测,而产生这一系列变化的形态学基础可能是超微结构的改变。     

Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响

目的：通过调控Rab11在子宫颈癌HeLa细胞中的表达,观察Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响。方法将Rab11 siRNA转染至HeLa细胞,Western blot法检测Rab11蛋白表达变化,以转染阴性对照siRNA细胞为对照组,采用CCK8、克隆实验、EdU实验、Transwell小室法体外检测转染后的HeLa细胞增殖能力、侵袭能力的变化。结果与对照组比较,HeLa细胞转染Rab11 siRNA组Rab11蛋白表达明显下调（1.096±0.091比1.735±0.084,P＜0.01）。与对照组比较,转染Rab11 siRNA组HeLa细胞增殖受抑制（吸光度值48 h：0.721±0.092比1.090±0.099;72 h：0.956±0.105比1.482±0.096;96 h：1.231±0.099比1.720±0.174,P＜0.01）,克隆形成数减少[（36±1）个比（75±8）个, P＜0.01],增殖率降低[（33.880±1.902）%比（45.570±2.025）%,P＜0.05]。Rab11 siRNA转染组较对照组侵袭率降低[（38.6±0.8）%比（100.0±0.2）%,P＜0.01]。结论体外实验证实Rab11表达下调能够抑制HeLa细胞的生长。     

维拉帕米对体内外胰腺癌SW1990细胞侵袭转移影响及其机制探讨

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)抑制剂维拉帕米对体内外胰腺癌SW1990细胞侵袭转移能力影响及其机制。方法以终浓度分别为0、12.5、25、50、100和200μmol/L维拉帕米处理SW1990细胞24、48和72h后,以CCK-8法检测维拉帕米对SW1990细胞增殖抑制影响;RT-PCR和蛋白质印迹法检测维拉帕米对体内外SW1990细胞ABCG2mRNA及蛋白表达水平的影响;Transwell小室侵袭迁移实验及划痕实验分析维拉帕米处理后细胞侵袭迁移能力的改变。将SW1990细胞接种至裸鼠皮下,对比观察维拉帕米干扰前后肿瘤细胞在裸鼠体内的成瘤情况;免疫组化分析裸鼠肿瘤组织中ABCG2的表达。结果 CCK-8检测结果显示,浓度为25~100μmol/L维拉帕米对胰腺癌SW1990细胞的抑制呈现明显的剂量及时间依赖性。划痕实验结果显示,细胞平均迁移率比较,划痕24h维拉帕米组为(19.2±2.04)%,对照组为(36.8±2.25)%,t=-17.23,P<0.001;48h维拉帕米组为(43.7±3.14)%,对照组为(78.4±2.67)%,t=-23.85,P<0.001。Transwell侵袭实验结果显示,维拉帕米组平均穿膜细胞数为46.6±3.3,明显少于对照组的90.2±2.7,t=-47.2,P<0.001;迁移实验结果显示,维拉帕米组平均穿膜细胞数为61.4±2.8,亦少于对照组的110.3±3.5,t=-39.5,P<0.001;蛋白质印迹法及RT-PCR结果显示,维拉帕米能够明显降低体内外SW1990细胞ABCG2蛋白及mRNA的表达水平。裸鼠成瘤实验结果显示,细胞接种后10d左右可见肿瘤结节,50d时维拉帕米组裸鼠肿瘤体积为(521.6±48.5)mm3,小于对照组的(1 496.6±73.1)mm3,t=-38.6,P<0.001;维拉帕米组瘤质量(0.53±0.18)g,明显低于对照组(1.61±0.45)g,t=-22.49,P<0.001。免疫组化结果显示,维拉帕米能明显降低SW1990细胞ABCG2的表达。结论维拉帕米能明显抑制胰腺癌SW1990细胞在体内外的侵袭和转移,其机制可能与维拉帕米下调ABCG2的表达有关。     

茶多酚对卵巢癌细胞黏附能力影响及其机制探讨

目的探讨茶多酚对人卵巢癌SKOV3和3AO细胞黏附能力及对上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)表达的影响。方法体外培养人卵巢癌SKOV3和3AO细胞,采用MTT法检测0、5、10、20、40、80和160μg/mL不同浓度茶多酚处理24h后,SKOV3和3AO细胞体外增殖情况,选取后续实验茶多酚的给药浓度。分别选取5、10及20μg/mL茶多酚处理SKOV3细胞24h,10、20及40μg/mL茶多酚处理3AO细胞24h,各自对照组为不含茶多酚的培养液培养24h,采用细胞分离实验观察细胞-细胞间黏附能力的变化;采用细胞黏附实验观察细胞-基质间黏附能力的变化;利用Real-time PCR和蛋白质印迹法检测E-cadherin和N-cadherin在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果 MTT实验结果显示,SKOV3(χ2=18.96,P=0.004)和3AO(χ2=16.98,P=0.009)卵巢癌细胞组内增殖抑制率随浓度增高而增强。细胞分离实验结果显示,随着茶多酚给药浓度的增加,SKOV3和3AO细胞在10和20min的分离率逐渐降低,差异均有统计学意义,P值均<0.05。细胞黏附率的比较,SKOV3细胞对照组、5、10和20μg/mL组的黏附率分别为100.00%、93.89%、82.50%和67.32%,各组间差异有统计学意义,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞对照组、10、20和40μg/mL组黏附率分别为100.00%、92.65%、86.90%和76.71%,差异有统计学意义,χ2=10.532,P=0.015。Real-time PCR结果显示,SKOV3细胞各实验组的E-cadherin mRNA表达水平增加,χ2=10.532,P=0.015,N-cadherin mRNA表达水平减少,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞中各组N-cadherin mRNA表达水平明显减少,χ2=10.532,P=0.015,但E-cadherin mRNA表达水平无明显变化,χ2=4.499,P=0.212。蛋白质印迹法结果显示,SKOV3细胞中各实验组的E-cadherin蛋白表达水平增加,χ2=10.116,P=0.018,N-cadherin蛋白表达水平减少,χ2=9.804,P=0.02;3AO细胞中实验组与对照比较N-cadherin蛋白表达水平明显减少,χ2=8.868,P=0.031,但E-cadherin蛋白表达水平差异无统计学意义,χ2=1.17,P=0.76。结论茶多酚能够提高卵巢癌SKOV3和3AO细胞-细胞间黏附能力,降低细胞-基质间黏附能力,其机制可能与茶多酚上调E-cadherin及下调N-cadherin表达有关。     

2型糖尿病患者行腹腔镜胆总管切开取石术临床研究

目的:探讨胆总管结石合并2型糖尿病患者行腹腔镜胆总管切开取石术(LCBDE)的可行性、安全性及有效性.方法:回顾性分析2009年12月-2012年12月采用LCBDE治疗的58例合并2型糖尿病(糖尿病组)及同期58例无糖尿病(非糖尿病组)胆总管结石患者的临床资料,比较两组术前、术中及术后的情况.结果:两组患者手术时间、术中出血量、开始进食时间、术后住院时间及中转开腹方面,差异均无统计学意义(t/x 2=3.921,6.940,1.332,1.270,0.342,均P＞0.05).两组术后电解质紊乱、胆管炎、胆瘘、切口感染、肺部感染发生率比较,差异亦均无统计学意义(×2=0.438,0.537,0.342,1.036,0.342,均P＞0.05).两组均无术后结石残余、胆管狭窄及死亡病例.结论:合并2型糖尿病的胆总管结石患者在围手术期严格控制血糖,术中仔细操作的前提下,行LCBDE是可行的、安全的、有效的.     

新生儿缺氧缺血性脑病血小板计数改变与舒血宁治疗研究

目的 观察血小板计数(PLT)与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)病情程度的关系,研究舒血宁注射液治疗后HIE患儿PLT的变化及其临床治疗效果.方法 将64例HIE患儿随机分为对照组32例和治疗组32例,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用舒血宁注射液治疗.观察PLT与HIE病情程度的关系以及舒血宁注射液对PLT的影响,观察两组患儿临床症状恢复正常的时间,比较两组的临床治疗效果.结果 治疗前,PLT随HIE病情加重而下降.治疗7d后,治疗组与对照组患儿的PLT均较治疗前增加,但治疗组中、重度患儿的PLT均显著高于对照组,治疗组总有效率为81.3％,显著高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗组肌张力、意识障碍、原始反射以及呼吸节律恢复正常的天数分别为(2.65+1.31)、(2.62±1.18)、(2.54±0.99)、(2.20±1.23)d,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 在HIE急性期中,PLT随其程度的加重而降低.使用舒血宁注射液可以明显提升HIE患儿的PLT,改善肌张力、意识障碍、原始反射以及呼吸节律恢复正常的时间,提高临床治愈率.     

培美曲塞联合顺铂对吸烟与不吸烟晚期肺腺癌患者的临床疗效观察

目的观察吸烟对肺腺癌患者培美曲塞联合顺铂治疗疗效的影响。方法分析2010年2月-2012年2月徐州医学院附属医院肿瘤科收治的83例经病理学或细胞学确诊的初治ⅢB、Ⅳ期肺腺癌患者。吸烟组33例,不吸烟组50例,初治采用培美曲塞联合顺铂方案（培美曲塞500 mg·m^-2第1天静脉滴注,顺铂30 mg·m^-2第1-3天静脉滴注）化疗,21天为1个周期,每治疗两个周期后评价疗效,直至病情进展。近期疗效评价指标为疾病控制率（DCR）,远期疗效评价指标为疾病进展时间（TTP）和1年生存率,毒副反应评价指标为骨髓抑制毒性、消化道反应等。结果吸烟组与不吸烟组DCR分别为60.6%和76.0%;TTP分别为（5.7±1.6）月和（6.7±1.8）月,1年生存率分别为24.24%和46.0%。两组DCR比较（χ2=2.238,P=0.135）,差异无统计学意义,TTP（t=2.55,P=0.013）及1年生存率（χ2=4.022,P=0.045）的差异有统计学意义。吸烟组与不吸烟组骨髓抑制毒性、消化道反应、口腔炎/咽炎、感染发生率的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论不吸烟晚期肺腺癌患者一线应用培美曲塞治疗较吸烟患者可有更明显的远期获益。     

阿替普酶在急性脑梗死静脉溶栓中出血转化的相关因素分析

目的分析阿替普酶静脉溶栓治疗急性脑梗死(ACI)患者出现出血转化的相关危险因素。方法分析2014年1月至2016年5月徐州市中心医院收治的阿替普酶治疗ACI患者294例的临床资料,24 h内发生出血转化为转化组(19例,6.46%),余为非转化组(275例,93.54%)。对比两组一般资料,两组间计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验,用多因素Logistic逐步回归分析法分析脑梗死溶栓治疗出现脑出血转化的相关危险因素。结果 294例ACI患者中,转化组(19例)和非转化组(275例)的急诊收缩压(SBP)、急诊舒张压(DBP)、入院至静脉溶栓门针时间(DNT)、溶栓前美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的年龄、性别、基线血糖、基线凝血功能、基线血小板、既往口服抗血小板药物、心房颤动史、冠心病史、高血压病史、高脂血症史、糖尿病史、吸烟率差异均无统计学意义(P>0.05)。急诊SBP高水平(OR=1.627)、DNT越长(OR=1.015)、溶栓前NIHSS评分越高(OR=1.087)是发生出血转化的独立危险因素(P<0.05)。结论采用阿替普酶治疗的ACI患者,入院时的NIHSS评分高,高SBP,长DNT是溶栓后出血转化的预测因素。     

胰腺癌淋巴管生成及其转移机制的研究

据统计,80％以上的恶性肿瘤患者死于侵袭和转移,大多数癌症的淋巴道转移要早于血道转移.与血管相比,淋巴管管腔相对较大且不规则,管壁仅由单层内皮细胞和极薄的结缔组织构成,内皮细胞间的连接不完整,有的地方甚至缺如,其毛细淋巴管的管壁缺乏完整基底膜,淋巴管的这些结构特点使得它比血管更易受癌细胞的侵袭和破坏.     

AM251对糖尿病视网膜病变大鼠ICAM-1及VEGF表达的影响

目的探讨大麻素1受体拮抗剂AM251对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜细胞间黏附因子(ICAM)-1和视网膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组,正常对照组又分为正常生理盐水对照组(NC组)、正常AM251干预组(NC-C组),糖尿病模型组又分为糖尿病视网膜病变组(DR组)、AM251干预组(DR-C组)。糖尿病模型组予腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg复制糖尿病视网膜病变模型.AM251干预组给予AM 251 0.5 mg/kg腹腔注射,1次/d,连续12 w,其余两组给予等量生理盐水腹腔注射。每周监测血糖、体质量,AM251干预12 w后通过直接及间接眼底镜观察眼底;水合氯醛麻醉下取眼,心脏取血,免疫组织化学法检测视网膜VEGF的变化、Western印迹法分别检测ICAM-1、VEGF的变化,ELISA法测视网膜组织ICAM-1、VEGF的变化及血清中s ICAM-1的变化。结果与正常对照组相比,模型组VEGF、ICAM-1水平明显升高(P0.05),经AM251干预后,DR-C组VEGF、ICAM-1较DR组降低(P0.05),较正常组仍升高(P0.05)。结论AM251可减少糖尿病视网膜病变大鼠视网膜ICAM-1、VEGF的表达,改善视网膜的超微结构,这可能是对糖尿病视网膜病变的保护机制之一。