白三烯C_4合成酶mRNA荧光定量PCR方法建立及结果的分析

目的半胱氨酰白三烯（CysLTs）合成主要限速酶白三烯C4合成酶（LTC4S）可使用FQPCR检测方法。本研究拟比较2-△△CT法及标准曲线法分析LTC4S mRNA表达水平,为临床与基础研究提供能准确反映体内LTC4S基因表达水平的检测手段。方法本研究通过基因克隆方法,构建含目的基因LTC4S CDNA的质粒标准品为模板,从而建立LTC4S mRNA的RT-FQPCR标准曲线检测方法,用于检测LTC4S的表达。并同时通过2-△△CT法计算mRNA表达的结果。结果 2-△△CT法及标准曲线法均可用于分析mRNA表达水平,而2-△△CT法临床上更为简便,二者差异无统计学意义,可替代标准曲线法。结论本研究成功建立了LTC4S mRNA FQPCR检测方法,该方法的建立可为临床与基础研究提供能更准确反映体内LTC4S基因表达水平的检测手段,便于进一步了解LTs在哮喘发病机制中的地位,并为哮喘药物的发展和疗效的评估提供客观依据。     

肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β对牛肺动脉内皮细胞凋亡的影响及意义

目的　研究肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)对牛肺动脉内皮细胞 (BPEC)损伤的机制及在急性肺损伤 (ALI)发病过程中的作用。方法　建立BPEC的体外培养 ,采用流式细胞仪膜联蛋白V 异硫氰酸荧光素 (Annexin VFITC)、碘化吡啶 (PI)染色检测TNF α、IL 1β对BPEC凋亡的影响以及抗TNF α单克隆抗体、AC DEVD CHO (caspase 3的竞争性抑制剂 )的保护效应。结果　 (1)TNF α作用 2 4h ,随着其浓度的增加 (浓度为 50 0、10 0 0、2 0 0 0U/ml) ,BPEC凋亡率逐渐增加 [分别为(8 2 1± 0 70 ) %、(9 63± 0 71) %、(17 43± 1 99) % ] ,与对照组 [(3 0 9± 0 0 8) % ]比较差异有显著性(P均 <0 0 5) ;(2 )TNF α (2 0 0 0U/ml)培养时间延长 (分别为 6、12、2 4、3 6h) ,BPEC凋亡率逐渐增加 [分别为 (6 72± 0 3 8) %、(7 72± 1 66) %、(12 95± 0 3 2 ) %、(17 70± 1 79) % ,P均 <0 0 5] ;(3 )加入抗TNF α单抗、AC DEVD CHO的TNF α组的BPEC凋亡率 [(7 78± 0 2 1) %、(7 3 2± 0 11) % ]显著高于单纯TNF α(2 0 0 0U/ml)组 [(10 59± 0 49) % ,P均 <0 0 1] ,而加入IL 1β的TNF α组的凋亡率 [(10 73±0 60 ) % ]与单纯TNF α组比较差异无显著性 (P >0 0 5)。结论　ALI过程中是TNF     

老年COPD 90例知信行水平调查研究

目的:了解老年COPD患者疾病相关知识、态度、行为现状,探讨影响患者知信行水平的相关因素。方法:采用方便抽样问卷调查法,调查了90例患者知信行水平。结果:本组患者对疾病发生的危险因素及复发诱因的认知水平较好,家庭氧疗和呼吸功能锻炼知识掌握较差。在疾病治疗、保健康复、预防这三大方面,大部分患者表示希望有更多的了解,47.8%患者对治疗疾病缺乏信心。52.2%患者没有进行家庭氧疗,67.8%患者没有做呼吸功能锻炼。知识、态度、行为得分两两间成正相关(P<0.01),文化程度越高者态度得分则越高(P<0.05),公费医疗患者知识、行为得分明显好于自费医疗和医保患者得分。结论:COPD患者在疾病的知识、信念、行为方面还存在诸多不足,应加强系统性健康教育,促进健康行为的形成。     

吸入噻托溴铵干粉与异丙托溴铵定量气雾剂治疗慢性阻塞性肺疾病的疗效与安全性比较

目的比较噻托溴铵干粉吸入剂与异丙托溴铵定量气雾剂治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)4周的疗效与安全性。方法采用多中心、随机、双盲、双模拟、平行对照研究方法,对221例筛选合格的稳定期中重度COPD患者给予吸入噻托溴铵干粉剂(18μg,每日1次)或异丙托溴铵定量气雾剂(2喷/次,每日4次)治疗4周。在治疗前,治疗后2周及4周,给药前5min,给药后30、60、120及180min分别测定肺功能。结果首要疗效指标第一秒用力呼气容积(FEV1)谷值反应。治疗4周后噻托溴铵组FEV1谷值反应显著优于异丙托溴铵组[(0.063±0.024)L,95%CI为0.016～0.111L,t=2.63,P=0.009],显示噻托溴铵组患者的通气功能得到持续改善;噻托溴铵组的用力肺活量(FVC)谷值反应在治疗4周时较异丙托溴铵组增高(0.133±0.047)L,t=2.83,P=0.005;与基线相比,给药后0～3h平均FEV1的变化(FEV1AUC0～3h)及平均FVC变化(FVCAUC0～3h)在两组比较差异均无统计学意义;缓解喘息应急药物的使用量在两组间比较差异无统计学意义(t=0.60,P=0.548)。本研究中噻托溴铵组有12例(10.9%)、异丙托溴铵组有18例(16.2%)发生不良事件,两组比较差异无统计学意义(χ2=1.326,P=0.249)。噻托溴铵的常见不良反应为口干(5例,4.5%),无心血管系统异常和心电图异常报告。结论每日1次吸入噻托溴铵18μg较每日4次异丙托溴铵治疗,对COPD患者具有更强的支气管扩张作用。噻托溴铵耐受性良好,与异丙托溴铵具有相似的安全性。     

等待肺移植患者生存质量及其影响因素研究

目的了解等待肺移植患者的生存质量及其影响因素。方法采用简明健康问卷(SF-36)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)和领悟社会支持量表(PSSS)对55例等待肺移植患者进行调查。结果等待肺移植患者SF-36各维度得分23.18~74.57,显著低于常模(均P<0.01);SAS、SDS得分分别为48.09±9.06、52.18±9.98,显著高于常模(均P<0.01);PSSS社会总支持因子得分为5.56±1.04,其中家庭内支持因子得分显著高于家庭外支持因子(P<0.05)。多因素分析结果显示生存质量的影响因素为呼吸困难和抑郁(P<0.05,P<0.01)。结论等待肺移植患者的生存质量较低,其生存质量受呼吸困难和抑郁的影响。医务人员应从患者生理及心理方面进行有效干预,以提高其生存质量。     

全球哮喘防治创议推荐糖皮质激素的半量吸入分级治疗支气管哮喘患者的疗效分析

目的为减轻支气管哮喘(简称哮喘)患者的经济负担,探讨中国控制哮喘最小吸入糖皮质激素(ICS)剂量。方法86例患者随机分为:(1)G组42例:应用全球哮喘防治创议(GINA)推荐高限剂量,中度患者每次250μg,每天2次;重度患者每次375μg,每天2次;(2)H组44例:应用G组剂量半量,中度患者每次125μg,每天2次;重度患者早晨125μg、晚上250μg,每天各1次。采用随机、对照、平行分组、多中心临床研究,筛选期1周仅按需吸入沙丁胺醇。治疗期共24周。结果治疗后G和H组日间症状评分:重度哮喘G组为(0.7±0.8)分,H组为(0.4±0.6)分,中度G组为(0.4±0.5)分,H组为(0.3±0.5)分;第一秒用力呼气容积(FEV1):重度G组为(1.5±0.5)L,H组为(1.8±0.6)L,中度G组为(2.3±0.6)L,H组为(2.3±0.8)L;第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%):重度G组为(54±17)%,H组为(59±19)%,中度G组为(79±14)%,H组为(79±15)%;晨间最大呼气流量(PEF)增加值:中、重度G组分别为45、67L/min,中、重度H组分别为56、65L/min;夜间憋醒天数:重度G、H组分别为81、69d;无症状天数:重度G、H组分别为88、98d;合并用沙丁胺醇剂量(重度G、H组分别为5.0、3.4喷/d)等32项(次)比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。G组中度哮喘患者首次加重3例,H组为11例,两组比较差异有统计学意义(χ2=4.74,P<0.05);G组中度哮喘控制例数为18例,H组为12例,两组比较差异有统计学意义(χ2=4.97,P<0.05);而G组中度哮喘患者夜间症状评分为(0.30±0.22)分,H组为(0.13±0.33)分,两组比较差异有统计学意义(t=-2.06,P<0.05)、重度哮喘加重天数G组为11d,H组为6d,两组比较差异有统计学意义(U=31.00,P<0.05)。结论大多数中国哮喘患者应用GINA推荐的ICS高限剂量与其半量分级治疗,可取得相似的疗效。     

求实开拓协作

五十载耕耘不辍 ,五十载春华秋实。热烈祝贺《中华结核和呼吸杂志》创刊 5 0周年 !作为一名忠实的读者 ,我很乐意为《中华结核和呼吸杂志》做些力所能及的事 ,表达自己对她的喜爱。作为一名医生 ,我亲历了严重急性呼吸综合征 (SARS)斗争的洗礼 ,我愿借创刊 5 0华诞之际谈谈自己的一些感想和体会。SARS是一场突如其来的重大灾害。在面对这场突发性的公共卫生事件中 ,医务工作者历史性地被推向了前台 ,成为公众瞩目的焦点。今天 ,我们已经取得了抗击SARS的阶段性胜利 ,医务人员的工作和献身精神也赢得了公众的尊敬。在欢庆胜利的时候 ,我…     

华人、马来人、印度人中白细胞介素4及受体基因多态性与血清总IgE水平的关系

既往研究提示白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素4受体(IL-4RA)基因与血清总IgE水平、过敏性疾病有关。然而结论并不一致。我们的研究目的在于调查华人、马来人及印度人中IL-4、IL-4RA的3个基因位点的基因型(C590T、Ile50Val、Q576R)与血清总IgE水平是否存在相关性。     

人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的L型钙通道研究

目的:观察人骨髓间充质干细胞(hMSCs)诱导分化为心肌样细胞的电生理特征,L型钙离子通道的电流强度。方法:体外分离培养hMSCs,以5-氮胞苷诱导分化为心肌样细胞。分别以体外分离培养的原代搏动的SD乳鼠心肌细胞(CMs)和同代次的hMSCs为阳性对照和阴性对照,利用膜片钳技术观察诱导分化为心肌样细胞的电生理特征L型钙离子通道的电流强度。结果:在20个心肌样细胞中,有6个细胞可记录到对硝苯地平敏感的内向钙电流,其最大内向峰值电流(ICa-Peak)在0mV为(112.60±8.26)pA;而hMSCs和乳鼠的CMs的ICa-Peak分别为(96.67±13.50)pA和(263.86±39.01)pA(n=6),将诱导的心肌样细胞与未经诱导的hMSCs的ICa-Peak进行比较,P0.05具有统计学意义。结论:hMSCs经5-氮胞苷诱导后,其L型钙离子通道的钙电流增加,在电生理特性上具有向CMs分化的潜能。     

Kimura 病1例并文献复习

目的 提高对少见疾病Kimura病的认识.方法 分析广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所于2008年7月29日收治的1例Kimura病伴支气管扩张患者的临床和病理资料,并复习相关文献.结果 患者,女,18岁,16年前接种卡介苗后反复咳嗽、咳痰、出现全身多发性包块,临床特征主要是血嗜酸性淋巴细胞增多、头颈部包块及淋巴结肿大和支气管扩张.颈部皮下肿物活检符合嗜酸性淋巴肉芽肿,对糖皮质激素治疗有效.结论 Kimura病属于少见病,合并支气管扩张是首例报道.