多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组耐药基因检测

目的检测1株多耐药大肠埃希菌NB8株的遗传学背景。方法病原分离自2012年4月宁波市第一医院住院患者尿液,作16SrDNA和gyrA基因测序、BLASTn比对确认为大肠埃希菌,采用Illumina HiSeq与Ion Torrent PGM两种大规模并行测序仪进行全基因组分析,再行人工测序。最后NB8株和9株已完成全基因组测序的大肠埃希菌耐药基因的比较基因组学研究。结果多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组测序得到一条推定的染色体序列,长4 550 369bp(内含14个缺口),得到一条推定的质粒序列,长635 377bp(内含33个缺口)。从NB8株全基因组数据中挖掘出了β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、四环素类、多粘菌素的耐药基因,并挖掘出接合性质粒、转座子、插入序列、整合子的遗传标记,以及5大类外排泵基因。结论多耐药大肠埃希菌NB8株遗传学背景明确,主动外排机制增强也会导致或者增强NB8株的耐药性。质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件可以使细菌的耐药性得以快速传播,使受体菌表现为多重耐药。     

匹伐他汀钙对颈动脉粥样硬化患者血脂和颈动脉斑块的影响

<正>动脉粥样硬化作为一种慢性病症,发病机制复杂多样,主要病因为血脂异常,即高脂血症。患者多合并有糖尿病、高血压和冠心病等心血管病,可导致全身的血管栓塞,严重者可致脑缺血性(脑梗死)和出血性卒中等疾病,因而其发(患)病率和致死(残)率较高,尤其是随着社会物质生活的不断丰富,该病症的流行病学呈不断增高的趋势[1]。匹伐他汀作为一种新型的他汀类降压药物,因其较其他同类药品优越的血脂调节功能,以及较好的安全性评价结果,2009年获得美国食     

泛耐药鲍曼不动杆菌PBP1A、CarO及β-内酰胺酶的编码基因分析

目的了解一株泛耐药鲍曼不动杆菌（js01株）可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法对自2011年12月宁波市第一医院住院患者的痰样本js01株分离,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种。用PCR法分析33种β-内酰胺酶基因（13种A类酶基因、10种B类酶基因、2种C类酶基因、8种D类酶基因）和插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测以及CarO膜孔蛋白编码基因。再用分段PCR法扩增PBP1A编码基因,双向测序后拼接成全长序列。结果js01株检出β-内酰胺酶TEM-1、ADC-30、OXA-23和OXA-66编码基因。插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISabal-ADC-30和ISabal—OXA-23为阳性。js01株carO基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株（SDF）相比存在有义突变,氨基酸序列一致率为76．0％（189／249）,存在3个氨基酸缺失。is01株PBP1A编码基因序列与SDF株相比存在有义突变,氨基酸序列的一致率为99．6％（848／851）,存在3个氨基酸变异,但js01株PBP1A蛋白分子立体结构比SDF株丢失2个螺旋结构。结论本株鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与该菌株管家基因（PBP1A、CarO编码基因）突变与可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因有关。     

新诊断2型糖尿病与糖尿病肾病患者血清25（OH）D_3的变化及意义

目的：探讨维生素D与新诊断2型糖尿病（newly diagnosed type 2 diabetes,T2DM）及糖尿病肾病（diabetic kid-ney disease,DKD）的关系。方法：入选T2DM患者52例,DKDⅣ～Ⅴ期患者53例,血糖正常健康者（NGT）50例。统一检测所有受试者的血压,HbA1c,三酰甘油,25羟化维生素D3[25-（OH）D3]、BUN、Scr、PTH,24h尿蛋白等指标。新稳态模型β细胞功能指数（HOMA2-%β）及新稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）评估胰岛素β细胞分泌功能及胰岛素敏感性。结果：NGT组,T2DM组及DKD组血清25（OH）D3的含量逐渐减少,维生素D与HOMA2-%β（r=-0.34,P=0.03）、Scr（r=-0.32,P=0.04）呈负相关。与NGT相比,新诊断T2DM组的HbA1c、三酰甘油升高（P〈0.05）,其HOMA2-%β、25-（OH）D3较NGT组降低（P〈0.05）。DKD组的年龄、病程、收缩压、24h尿蛋白定量、BUN、Scr、PTH等指标较T2DM组升高（P〈0.05）。HbA1c、HOMA2-%β、25-（OH）D3较T2DM组降低（P〈0.05）。结论：维生素D缺乏与T2DM患者的β细胞功能减退及DKD发生发展存在相关性。     

大肠埃希菌临床株可移动遗传元件之遗传标记与耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌临床株可移动遗传元件及耐药基因存在状况以及菌株的亲缘关系,分析耐药的遗传学背景。方法收集医院2012年1-10月住院患者痰液标本中分离的大肠埃希菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)法分析,可移动遗传元件的10种遗传标记、19种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、6种16S rRNA甲基化酶基因,并对检测结果作样本聚类分析。结果 20株大肠埃希菌均检出可移动遗传元件之遗传标记、β-内酰胺酶基因与氨基糖苷类修饰酶基因;共检出可移动遗传元件的7种遗传标记、3种β-内酰胺酶基因、3种氨基糖苷类修饰酶基因,且耐药基因的阳性率很高,但16SrRNA甲基化酶基因未检出;traA、trbC、tnp513、IS26、IS903、ISEcp1、intⅠ1、blaTEM、blaCTX-M-1群、blaOXA-1群、aac(6')-Ⅰb、aadA5和aph3′-Ⅰ阳性率分别为95.0%、65.0%、30.0%、100.0%、50.0%、90.0%、100.0%、85.0%、100.0%、25.0%、40.0%、85.0%和5.0%;可移动遗传元件之遗传标记与耐药基因可分为14种阳性模式,样本聚类分析提示菌株可分A与B两群,A群中1、4、17~19号株,14~18、2、12~13号株为3个独立的克隆。结论 20株大肠埃希菌耐药表型与β-内酰胺酶基因与氨基糖苷类修饰酶基因检测结果相符,该组菌株存在医院感染的可能。     

黏质沙雷菌耐药性及碳青霉烯类抗生素耐药机制研究

目的 探讨黏质沙雷菌分离株的整体耐药特点,研究其对碳青霉烯类药物耐药的主要机制.方法 收集2007至2010年从宁波市第一医院不同病区分离(剔除重复菌株)黏质沙雷菌247株,用Vitek2 -Compact及配套革兰阴性杆菌药敏卡(GNS)检测其药敏情况,对筛选出的20株耐碳青霉烯类菌株进行PCR检测其耐药基因.结果 黏质沙雷菌对头孢曲松、氨曲南、环丙沙星的耐药率较高,分别为70.4％( 174/247)、64.8％ (160/247)、57.4％ (142/247)；对阿米卡星、庆大霉素、亚胺培南、美罗培南的耐药率较低,分别为:3.5％( 8/229)、5.4％( 13/241)、5.9％(14/237)、8.1％ (20/247).PCR检测20株对碳青霉烯类抗生素耐药的黏质沙雷菌中,1、7、12和16号的AmpC染色体基因表达是阴性参考菌株的98.3、102.3、121.5、87.3倍；共有12株黏质沙雷菌分离株同时携带CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和KPC-2型碳青霉烯类酶.黏质沙雷菌所携带的CTX-M以CTX-M1、CTX-M2、CTX-M9为主；2株菌携带有SHV基因；2株菌携带有SME基因；2株菌携带有TEM基因；5株菌膜孔蛋白基因ompC和ompF均缺失；仅1株ompC基因缺失；2株菌ompF基因缺失.结论 黏质沙雷菌对β内酰胺类药物耐药的原因比较复杂,以产β内酰胺酶为主.开展对耐药菌株的进化和多耐药基因的研究,有利于合理应用抗菌药物,降低抗生索对耐药菌的选择压力及控制耐药菌株的蔓延.     

妊娠粮尿病代谢特征与产后粮代谢异常关系分析

目的研究妊娠糖尿病（GDM）患者临床代谢特征与产后早期持续糖代谢异常之间的关系。方法选取孕24～36周妊娠糖尿病患者63例,同期糖代谢正常孕妇30例作对照。分别测定两组空腹及75g葡萄糖负荷后血糖、胰岛素和血游离脂肪酸水平（FFA）,同时测定空腹状态下血超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、血脂谱、糖化血红蛋白等指标,计算孕前体重指数、新稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）、新稳态模型胰岛B细胞功能指数（HOMA2-％B）、早期胰岛素分泌指数（△130／AG30）、早期FFA降低比率（△FFA30／△FFA0）、FFA曲线下面积（AUCFFA）,并记录糖尿病家族史;同时于产后6～8周,对所有妊娠糖尿病患者再次行75g葡萄糖负荷试验以判定产后糖代谢情况,并分为正常对照组（NC）、产后糖调节正常组（NGR）和产后糖调节异常组（AGR）。结果17例GDM患者于产后6～8周仍持续存在糖代谢异常。占总随访例数的29％。对比NC组和NGR组孕期各项临床代谢指标,显示AGR组有明显升高的孕前BMI、HbA1C、空腹血糖、Hs-CRP。3组间血脂谱及糖尿病家族史分布的差异无统计学意义。AGR组胰岛素抵抗明显升高、13细胞功能减退。AGR组空腹、OGTT2h后血FFA及AUCFFA明显高于NC组和NGR组。NC组的△FFA30／AFFA0为25％,高于NGR组的18％和AGR组的15％（均P〈0．05）。Logistic回归分析显示：孕前BMI升高、AUCFFA升高和HOMA2一％B下降是妊娠糖尿病患者产后持续血糖异常的危险因素。结论有相当部分的GDM患者产后持续存在糖代谢异常。孕前BMI、胰岛B细胞功能缺陷和血FFA水平升高可能是GDM患者产后持续血糖升高的主要危险因素。     

2006-2008年大肠埃希菌耐药基因的研究

目的 了解耐药大肠埃希菌多药耐药机制的时间变化趋势.方法 收集南京医科大学第一附属医院2006年3月-2008年11月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共60株,采用聚合酶链反应检测多种耐药基因,利用SPSS统计软件进行指标和样本聚类分析.结果 除对亚胺培南敏感外,耐药大肠埃希菌对多种抗菌药物耐药;β-酰胺类耐药基因、氨基糖苷类耐药基因、喹诺酮类耐药基因和基因突变、消毒剂和灭菌剂相关基因、可移动元件遗传标记基因均有检出;2007年大多耐药基因检出率低于其他两年;qacE△1和intI1存在时间上的差异(P=0.045),2008年的检出率是最高的;3年间膜孔蛋白突变率、teha和mdfa检出率均为100.0％;聚类分析发现intI1和qacE△1、tnp513和ISCR1相对稳定,但质粒traA、trbC和插入序列IS26、ISEcpl的位置不固定;2008年菌株的同源性更明显.结论 耐药基因时间变化特征不明显,但耐药机制同可移动遗传元件紧密相关.     

多药耐药肺炎克雷伯菌尿液分离株检出gyrA基因新亚型

目的了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒)遗传标记、抗菌制剂外排泵基因。结果该株多药耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类药物基因检出blaTEM,耐氨基糖苷类药物基因检出aph(3′)-Ⅰ,耐喹诺酮类药物基因检出gyrA,Ⅰ类整合子遗传标记检出intⅠ1,转座子遗传标记检出tnp513,接合性质粒遗传标记检出trbC;抗菌制剂外排泵基因检出qacE△1-sul1,gyrA基因是新亚型(GenBank登录号:JN232083),83位密码子突变方式为TCG→TTC,导致氨基酸从丝氨酸(S)→苯丙氨酸(F);87位密码子突变方式为GAC→GCC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)→丙氨酸(A)。结论携带多药耐药基因和抗菌制剂外排泵基因是这株肺炎克雷伯菌呈多药耐药的主要原因,携带多种可移动遗传元件使细菌的耐药性在同种细菌菌株之间,甚至不同种细菌菌株之间得以快速传播。     

某地区医院洋葱伯克霍尔德感染的临床分布现状及耐药研究

目的了解本地区医院内洋葱伯克霍尔德菌(BC)临床分布状况及耐药特点,为合理选择抗菌剂提供依据。方法对本院各种标本中获得的319株BC进行鉴定和药敏试验。用WHONET5统计软件进行统计分析。结果药敏结果显示BC对复方新诺明3年平均耐药率为16.9%,对美罗培南耐药率为24.4%,对其他10种抗菌剂耐药率均大于50%。结论 BC所致院内感染不断增多,多药耐药菌株亦不断增加;复方新诺明和美罗培南是目前治疗多药耐药BC感染的最佳选择。合理应用抗菌剂,加强BC感染及耐药监测,是控制感染、防止暴发性流行、降低耐药率的重要措施。