L-选择蛋白在小鼠肝癌细胞高低转移株HCa-F、HCa-P的表达及与肿瘤转移潜能的相关性

目的　探讨经淋巴道转移的小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P淋巴道转移能力及与淋巴细胞归巢受体L 选择蛋白的相关性。方法　应用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测小鼠肝癌HCa F、HCa P细胞表面L 选择蛋白的表达情况 ,再通过E 、P 、L 选择蛋白的抗体对细胞粘附实验的影响检测HCa F、HCa P细胞淋巴道转移潜能与L 选择蛋白的相关性。结果　L 选择蛋白在HCa F、HCa P细胞表面均有表达 ,且HCa F细胞的表达量明显高于HCa P细胞 (P <0 .0 1) ,HCa F细胞与淋巴结之间的粘附可被抗L 选择蛋白的抗体所阻断。结论　小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P细胞均表达L 选择蛋白 ,其程度与该细胞的淋巴道转移潜能正相关     

β-榄香烯衍生物诱导CEM凋亡的体视学分析

β－榄香烯衍生物诱导ＣＥＭ凋亡的体视学分析邵淑娟许广源杨佩满卢步峰（大连医科大学组织胚胎学教研室１１６０２７）β－榄香烯是新型的非细胞毒性抗肿瘤药物，为乳化剂，其衍生物（ＰＩＣ－ＢＥ）具有良好的水溶性，具有更广阔的应用前景。ＣＥＭ是人类淋巴细胞性白血...     

人外周血CD4~+树突状细胞的纯化及鉴定

目的　建立人外周血树突状细胞 (dendriticcell,DC)的分离方法 ,观察其形态学和免疫组织化学特点 ,为下一步细胞融合提供DC来源。方法　以免疫磁珠分选法从人外周血单个核细胞中分离CD4 + DC ,流式细胞仪检测所得细胞的纯度 ,光镜、电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其形态 ,SP免疫细胞化学方法检测DC的分子表达。结果　此纯化方法所得细胞纯度可达到 80 %以上 ,形态学观察可见纯化细胞具有典型的DC特征 ,该细胞能高表达HLA DR和S 10 0分子。结论　免疫磁法可获得较高纯度典型DC ,为进一步进行DC与肿瘤的融合实验及临床应用提供了可能     

乙酰苯肼、X射线和环磷酰胺联合复制小鼠再生障碍性贫血模型

目的以乙酰苯肼、X射线、环磷酰胺联合应用的方法建立小鼠再生障碍性贫血动物模型。方法BALB/c小鼠,采用皮下注射乙酰苯肼100mg/kg,次日X射线2.0Gy照射后,于试验第5天环磷酰胺80 mg/kg腹腔注射,第15天重复以上步骤但不给予射线处理。观察试验小鼠的血象、骨髓象、造血细胞内的线粒体、造血干细胞集落的形成及肝脏、脾脏的病理变化。结果与正常对照组相比,再障模型组小鼠外周血象三系细胞均有显著降低:促红细胞生成素(EPO)含量升高;骨髓有核细胞数显著降低,造血干细胞集落的形成减低,肝脾出现再障的病理改变。结论本方法建立的再生障碍性贫血小鼠模型,简便,成功率高,外周血和骨髓的病理变化持续、稳定,符合再生障碍性贫血的临床表现。     

人类不同肺癌细胞株aurora-A的表达与DNA含量的相关性

目的检测人类肺癌细胞株中aurora-A的表达,探讨其与DNA含量的关系。方法通过半定量RT-PCR检测三种肺癌细胞aurora-A的表达;流式细胞仪检测三种肺癌细胞DNA含量(4N及>4N),分析aurora-A的表达与DNA含量(4N及>4N)的相关性。结果半定量RT-PCR电泳结果显示,A549、PG、NCI-H460三种肺癌细胞与正常肺组织aurora-A/-βactin比值分别为:1.247±0.0847,1.135±0.1050,0.872±0.1794,0.270±0.0724。提示三种肺癌细胞aurora-AmRNA均高表达,与正常肺组织比较差异有显著性(P<0.01);三种肺癌细胞之间比较:A549与PG之间差异无显著性(P>0.05),A549与NCI-H460,PG与NCI-H460之间差异有显著性(P<0.01)。A549、PG、NCI-H460四倍体(4N)的细胞比例分别为15.0%,19.9%和10.6%,两两比较差异有显著性(P<0.01);含有多倍体(>4N)的细胞比例分别为3.6%、2.7%和2.3%,A549与PG、NCI-H460之间差异有显著性(P<0.01),PG与NCI-H460之间差异无显著性(P>0.05)。结论三种肺癌细胞中aurora-A均高表达,其表达水平存在差异;三种肺癌细胞的DNA含量(4N、>4N)亦存在差异。A549与NCI-H460在aurora-AmRNA表达与DNA含量(4N、>4N)之间存在相关性,A549与PG、PG与NCI-H460无明显相关性。aurora-A可能是肺癌新的肿瘤标记物,有可能成为肺癌的分子治疗靶点;但是aurora-AmRNA的表达与肺癌细胞DNA含量(4N、>4N)的相关性需要进一步研究。     

E-cadherin基因在卵巢癌高低转移细胞中的差异表达及其机制的探讨

[目的]探讨上皮性细胞黏附分子在人卵巢浆液性囊腺癌高、低转移细胞株HO-8910和HO-8910PM的表达情况.[方法]采用蛋白印迹及免疫细胞化学方法检测2种细胞株的E-cadherin蛋白表达差异,用RT-PCR法检测2种细胞株的mRNA表达差异,用PCR及基因测序法检测基因突变情况.[结果]E-cad蛋白及mRNA在HO-8910中表达,在HO-8910PM中不表达.在E-cadherin基因外显子6～9未发现突变.[结论]E-cad的表达可能与肿瘤的转移能力负相关.     

自体造血干细胞的体外净化

目的:综合分析自体造血干细胞体外净化的方法。资料来源:应用计算机检索Medline 1991-01/2003-12有关自体造血干细胞体外净化方法的文章,检索词“purging,HSCT”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索CNKI数据库1991-01/2003-12有关自体造血干细胞体外净化方法的文章,检索词“体外净化,PUVA”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对相关资料进行整理,选取同一领域、不同方面的文献,以近期发表或权威杂志的文章优先。资料提炼:共检索到42篇有关自体造血干细胞体外净化方法的文献,其中24篇文章符合要求。排除18篇,其中15篇系重复同一研究,3篇为Meta分析。资料综合:自体造血干细胞的体外净化方法很多,如物理方法、生物学方法、药物方法、免疫净化、基因净化等。每种净化方法都有其各自的优势和不足,如淋巴系统疾病可以采用免疫净化;慢性粒细胞白血病患者可考虑反义技术;大多数患者则均可以考虑药物净化的方法。结论:针对不同的疾病,可以选择不同的净化方法,还可以将几种净化方法联合起来,其效果和方法的改进也在不断的研究探索中。     

Raf-1基因可能与口腔上皮癌细胞多药耐药性发生机制有关

目的 通过检测Raf-1基因在口腔上皮癌多药耐药细胞株(KBV)及敏感细胞株(KB)中表达的差异,探讨Raf-1基因在口腔上皮癌细胞多药耐药性发生中的作用. 方法 体外培养口腔上皮癌多药耐药株及敏感株,通过RT-PCR技术及免疫荧光技术、免疫印迹技术检测Raf-1基因在KB及KBV细胞中转录及翻译水平的差异,通过MTT法及流式细胞检测技术(FCM)检测KB及KBV细胞对长春新碱(VCR)敏感度的差异.结果 KB组细胞株在Raf-1基因转录和翻译水平均非常显著地低于KBV组(P<0.01);MTT法检测结果显示,KBV组细胞对长春新碱的耐药性是KB组的16.5倍;流式细胞术检测结果显示,KB组细胞凋亡率显著高于KBV组(P<0.01).结论Raf-1基因可能参与口腔上皮癌耐药性的发生过程,成为引起肿瘤细胞耐药的重要原因之一.     

在教学中体现学生的主体地位

现代教育观强调学生在认知过程中的主体地位及教师的主导作用。这就要求教师有必要重新设计教学形式 ,重新组织教学内容。以下就如何在组织学教学中体现学生的主体地位谈几点粗浅体会。1　找共性抓特点人体的细胞种类繁多 ,器官结构复杂 ,如果每种形态教师都面面俱到地讲述 ,学生都平均使用力量去学 ,势必教学效果甚微。如果我们重新设计一下教学模式 :指导学生在掌握规律的基础上 ,重点掌握每一个结构的特点 ,必然会达到事半功倍的效果。以被覆上皮为例 ,理论课上首先用挂图或多媒体等形式将每种被覆上皮都展示出来 ,明确指出其位置 ,清晰…     

我国不同地区马来丝虫DNA多态性的比较分析

目的 分析我国周期型马来丝虫DNA多态性。方法收集长爪沙鼠保种的湖北谷城（H）株、四川乐山（S）株和浙江安吉（Z）株马来丝虫成虫，提取基因组DNA，采用RAPD技术分析DNA多态性。结果得到17个DNA扩增片段，大小为50～1000bp。其中a、c为H、S、Z株共有条带，d、e、f、g为H、S株共有条带，b、h、i为H株特有条带。结论RAPD分析3个地区株马来丝虫在基因结构上既有同源性，又存在差异，表明我国马来丝虫似有种内分化的趋向。