甲基转移酶SETDB2对肝癌侵袭迁移的影响及其机制研究

摘要：目的 检测甲基转移酶SETDB2对肝癌侵袭转移的影响并探讨其机制。方法 应用Western blot、免疫组 化以及 Real-time PCR 等方法检测 37 例肝癌及对应癌旁组织标本中 SETDB2 蛋白及 mRNA 表达情况。将靶向 SETDB2 的短发卡 RNA（sh-SETDB2）和空载体（sh-NC）分别转染至人肝癌 MHCC97H 细胞构建稳转细胞系,应用 Tanswell侵袭实验、细胞划痕实验检测2组细胞的侵袭和迁移能力。通过基因芯片检测敲低SETDB2后表达有变化 的基因。敲低SETDB2后,运用Real-time PCR检测PTEN的mRNA的表达变化以及Western blot检测PTEN和组蛋白 H3第9位赖氨酸的三甲基化（H3K9me3）的表达变化,CHIP 检测H3K9me3在PTEN 的启动子区域的变化。在敲低 SETDB2的同时敲低PTEN的表达,Tanswell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果 （1）Western blot和Real-time PCR的结果均表明肝癌组织中SETDB2蛋白及mRNA表达水平均高于癌旁组织;SETDB2表达的高低与肝癌组织学 分级和TNM分期有关。（2）转染sh-SETDB2的MHCC97H细胞的侵袭和迁移能力均明显低于sh-NC组。（3）基因芯 片、Western blot以及Real-time PCR等实验结果显示敲低SETDB2后PTEN表达上调。（4）在敲低SETDB2后H3K9me3 表达下调,PTEN启动子区域的H3K9me3减少。（5）与敲低SETDB1组相比,敲低SETDB2的同时敲低PTEN后细胞的 侵袭能力恢复。结论 SETDB2通过下调PTEN的表达促进肝癌细胞的侵袭迁移。     

MEIA法测定他克莫司全血浓度的问题分析

目的探讨微粒子酶免疫分析（MEIA）法测定他克莫司全血浓度出现的问题。方法对南昌大学第一附属医院开展MEIA法测定他克莫司全血浓度以来出现的问题进行统计分析。结果南昌大学第一附属医院2002-2008年MEIA法测定他克莫司全血浓度共计失败21次,其中光路出问题10次,皮带断裂6次,样本注射器漏液2次,标准品顺序放错1次,试剂盒上机前有气泡1次,试剂盒提前变质1次。结论在日常工作中,不但要严格遵守操作规程,认真仔细,减少每一步的操作误差,避免操作错误,更重要的是要按时进行仪器的保养和维护,确保仪器的正常运行,才能确保结果的准确性。     

2株不同序列分型耐黏菌素大肠埃希菌耐药机制分析

目的探讨2株黏菌素耐药大肠埃希菌的耐药机制。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定药敏系统鉴定细菌及检测常见抗菌药物敏感性,并检测菌株是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);用三维试验检测菌株是否产AmpC酶;用微量肉汤稀释法测定菌株对黏菌素的最低抑菌浓度(MIC);用PCR及测序检测耐药基因;多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的分子分型和同源性;接合试验和S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)对菌株的质粒特征进行分析。结果2株菌均对碳青霉烯类药物敏感,对黏菌素耐药,其中N408对头孢类药物耐药;PCR扩增和测序分析显示2株菌均携带mcr-1基因,且N408和N433分别携带blaCIT和blaTEM-1基因;2株菌质粒接合试验均成功,接合子均检测到mcr-1基因;MLST分析显示N408为ST453型,N433为ST8900型,PFGE显示为不同条带。S1-PFGE显示N408有2个质粒,N433有1个质粒。结论本地区已出现携带mcr-1基因黏菌素耐药大肠埃希菌,且可通过质粒在不同菌株间水平播散,应引起临床的重视,加强此类菌株的检测。     

腹泻患儿阴离子间隙检测结果分析

目的分析腹泻患儿的阴离子间隙（anion gap,AG）水平与电解质的关系及临床意义。方法测定105例腹泻患儿的AG水平及电解质,按AG水平分为高AG组（n=34）、正常AG组（n=55）和低AG组（n=16）,分别对其电解质和有无酸中毒进行比较分析。结果高AG和低AG组中的CI-和HCO3-与正常AG组比较,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;高、正常、低AG三组代谢性酸中毒与无代谢酸中毒比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论AG是评价体液酸碱状况的一项重要指标,可鉴别不同类型的代谢性酸中毒并为临床提供可靠依据。     

血清IgG4检测在IgG4相关胆管炎临床诊断及鉴别诊断的初步应用

为探讨自身抗体和血清IgG4对IgG4相关性胆管炎(IgG4associated cholangitis,IgG4-SC)的诊断及鉴别诊断的临床意义,选取42例IgG4-SC患者、168例疾病对照组患者及43例健康对照,采用免疫散射比浊法检测IgG4水平;采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)、抗中性粒细胞胞质抗体(anti-neutrophil antibody,ANCA)、抗平滑肌抗体(anti-smooth muscle antibody,SMA)和抗线粒体抗体(anti-mitochondrial antibody,AMA),并对结果进行统计分析。结果如下:(1)IgG4-SC组ANA阳性率最高为40.48%,SMA最低为0,除ANA阳性率外,其余自身抗体检测结果均显著低于疾病对照组,组间差异均具有非常显著统计学意义(P0.01)。(2)血清IgG4升高与PSC、AIH、PBC及正常对照组相比,差异具有非常显著统计学意义(P0.01);其ROC AUC=0.9640.7(P0.01)。由此得出,自身抗体和血清IgG4的高表达,对于提高IgG4-SC诊断及其与自身免疫性肝病鉴别诊断的准确性有重要临床价值。     

lgG4相关性疾病的鉴别诊断与治疗

IgG4相关性疾病（IgG4-RD）是新认识的一种慢性系统性自身免疫性疾病。该疾病的发病机制尚未明确,临床表现无特异性,因可累及全身各个系统,临床诊断时需与多种疾病相鉴别。目前,IgG4-RD的治疗以激素治疗为首选,出现耐药或复发时可考虑采用生物治疗或免疫抑制剂。     

血糖动态监测在原位肝移植术中的临床意义

目的:探讨血糖的动态变化在原位肝移植术中的临床意义。方法:术中不同时间点抽取静脉血进行血糖的测定。结果:无肝前期,血糖水平高于正常并有逐渐升高的趋势;无肝期,血糖较无肝前期进一步升高;新肝期,随着移植肝循环开放,血糖有所降低,但仍高于正常。结论:在原位肝移植术中,无肝前期血糖明显升高;无肝期血糖升至峰值,随后逐渐下降。血糖动态监测有助于术中根据它的变化及时采取相应的治疗措施。