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1.
梅毒是一种由梅毒螺旋体(TP)感染引起的慢性性传播疾病,其临床表现复杂多样。目前常用实验室诊断方法主要有暗视野显微镜法和血清学方法。近年来,聚合酶链式反应(PCR)技术在梅毒实验室诊断中得以应用,在早期梅毒以及特殊梅毒的诊断中显示出灵敏度高、特异性较强、稳定性好等优点。本文就PCR检测技术在梅毒实验室诊断中的研究进展予以综述。 相似文献
2.
目的:研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的抑制作用。方法:采用Ho-echst 33258荧光染色、Western blot法和硝酸还原酶法研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用。结果:Hoechst 33258染色荧光检测发现,与正常对照组相比,ox-LDL组HUVEC中出现大量凋亡细胞,凋亡率明显增加,与ox-LDL组比较,ghrelin预处理组HUVEC细胞凋亡率呈剂量依赖性下降;Western blot检测结果表明,与对照组比较,ox-LDL可上调内细胞中Caspase-3表达,而经过ghrelin预处理后能剂量依赖性降低Caspase-3蛋白表达;硝酸还原酶法结果显示,ox-LDL可显著减少内皮细胞培养液中NO含量,经过ghrelin预处理后,ghrelin能剂量依赖性增加NO含量。结论:ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡有拮抗作用,可能与其抑制ox-LDL引起的细胞内Caspase-3蛋白水平升高及NO合成下降有关。 相似文献
3.
4.
目的构建miR-145的真核表达载体,为研究miR-145在结肠癌中的生物学功能奠定基础。方法设计并应用PCR扩增miR-145基因片段,将其导入真核表达载体pCMV-myc中构建重组质粒pCMV-miR-145后,将重组质粒转染入结肠癌细胞系HCT116中,运用RT-PCR检测miR-145的表达情况。结果酶切及DNA测序证实miR-145被正确克隆入真核表达载体pCMV-myc中,该重组质粒能在HCT-116细胞中高效表达miR-145。结论成功构建了miR-145的真核表达载体pCMV-miR-145,该载体能有效高表达miR-145。 相似文献
5.
目的研究外周血浆细胞分泌特异性结核分枝杆菌抗体对活动性结核病的诊断价值。方法纳入2013年4月至7月期间深圳市第三人民医院肺科门诊活动性结核病患者;健康对照组人员来自体检科门诊志愿者,分为3个组:活动性结核病组(104例)、结核分枝杆菌(Mtb)潜伏感染组(26例)和健康对照组(33名)。分离其外周血单个核细胞(PBMCs)。体外培养4d后收集培养上清液,用ELISA法和蛋白免疫印迹法,ELISA和蛋白免疫印迹法检测外周血浆细胞分泌的特异性结核分枝杆菌抗体;检测各组收集的PBMCs培养上清液中的特异性结核分枝杆菌抗体,比较各组间的差异。所有数据均使用GraphPadPrism5.0进行统计学分析,用受试者工作特征(ROC)曲线评价ELISA法检测的诊断价值,得出敏感度、特异度;多组间的比较采用Kruskal—Wallis检验;两组间比较采用Dunnmultiplecomparison检验;蛋白免疫印迹法用四格表的卡方检验;以P〈0.05为差异有统计学意义。结果ELISA法检测活动性结核病组特异性结核分枝杆菌抗体的A450nm值(0.593±0.206)高于Mtb潜伏感染组(0.342±0.152)和健康对照组(0.246±0.121),差异有统计学意义(H=77.27,P〈0.001)。特异性结核分枝杆菌抗体区分活动性结核病患者和Mtb潜伏感染者、健康对照者曲线下面积(AUC)分别为0.857、0.944,当诊断界限值为0.42时,其区分活动性结核病和Mtb潜伏感染的敏感度为77.9%(81/104),特异度为80.8%(21/26);区分活动性结核病和健康人的敏感度为77.9%(81/104),特异度为93.9%(31/33)。蛋白免疫印迹法检测活动性结核病和健康人的敏感度、特异度和准确性分别为79.2%(61/77)、100.0%(11/11)、81.8%(72/88)(x2=24.8,P〈0.001)。结论ELISA法和蛋白免疫印迹法检测外周血浆细胞分泌特异性结核分枝杆菌抗体诊断活动性结核病特异度高,可以作为临床结核病实验诊断的辅助方法。 相似文献
6.
目的探讨代谢综合征(MS)患者血浆网膜素1(Omentin-1)水平对高密度脂蛋白(HDL)亚类分布的影响。方法收集在南华大学附属医院就诊的MS患者102例和对照组81例的血样,采用全自动生化分析仪测定血脂浓度及载脂蛋白含量,酶联免疫吸附法测定Omentin-1的含量,双向电泳-免疫印迹法测定人血浆HDL亚类的相对含量。按Omentin-1浓度均值加减去一个标准差作为分割点,将MS患者分为3组:低Omentin-1组(Omentin-1≤9.10μg/L)、中Omentin-1组(9.10μg/LOmentin-126.68μg/L)、高Omentin-1组(Omentin-1≥26.68μg/L)。结果随着Omentin-1浓度的降低,MS患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及ApoB100/AⅠ和LDLC/HDLC比值均显著性增高(P0.05或P0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、ApoAⅠ含量显著降低(P0.05或P0.01)。与低Omentin-1组相比,高Omentin-1组中小颗粒的preβ1-HDL和HDL3b含量显著下降(P0.05或P0.01),而大颗粒的HDL2a含量显著上升(P0.05)。结论 MS患者血浆Omentin-1水平降低,且HDL颗粒呈变小趋势,低水平的Omentin-1可能与HDL亚类分布异常和血脂紊乱有关。 相似文献
7.
目的了解衡阳地区人群微量元素缺乏情况。方法将2017年8月至2018年7月南华大学附属第一医院9 140例体检者按年龄分为婴儿组、幼儿组、学龄前组、学龄儿童组、少年组及成人组,分别检测其钙(Ca)、铜(Cu)、铁(Fe)、镁(Mg)、锌(Zn)水平。结果各组人群Ca、Cu、Fe、Mg、Zn平均水平均在参考范围内;各年龄组人群中Fe和Zn缺乏率相似,婴幼儿组最高,少年组最低;少年组Ca缺乏率最高,成人组最低;成人组Mg缺乏率最高,学龄前儿童组最低;学龄儿童组Cu缺乏率最高,婴幼儿组最低,组间差异均有统计学意义(P0.05)。该地区人群对Ca的缺乏率最高。结论该地区婴幼儿容易出现Zn、Ca及Fe缺乏,而学龄儿童与少年也易缺乏Ca,该地区人群较高的Ca缺乏率也不容忽视,应该根据其特点,加强健康教育,优化膳食结构,合理饮食,补给微量元素,提高全民身体素质。 相似文献
8.
目的构建pGL3-Enhancer-ISRE4和pGL3-Enhancer-GAS两个荧光素酶报告基因载体,并对其进行生物活性鉴定。方法通过人工合成调控吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的启动序列ISRE4(4个串联的ISRE序列)和GAS7(7个串联的GAS序列),与pGL3-Enhancer连接成重组体pGL3-Enhancer-ISRE4和pGL3-Enhancer-GAS7,通过转化扩增,筛选出阳性克隆,并通过酶切、测序及生物学活性检测鉴定构建好的荧光素酶报告基因载体。结果成功地构建了pGL3-Enhancer-ISRE4和pGL3-Enhancer-GAS7两个荧光素酶报告基因载体,在IFN-γ的诱导下,能启动细胞内荧光素酶的表达。结论 pGL3-Enhancer-ISRE4和pGL3-Enhancer-GAS7的荧光素酶报告基因载体的成功构建为研究IDO蛋白的表达调控机制和以IDO为靶标的抗肿瘤免疫耐受药物快速高通量的筛选提供了重要的研究工具。 相似文献
9.
目的:表达和纯化小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)二肽基肽酶催化核心序列(FAPαc)融合蛋白(His-FAPαc),制备兔抗小鼠FAPα多克隆抗体,并用此抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。方法:将本实验室构建好的原核表达质粒pET28a(+)-FAPαc转化大肠杆菌BL21,IPTG 诱导表达目的蛋白His-FAPαc;用纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗小鼠FAPα多克隆抗体;用免疫印迹法和酶联免疫吸附试验检测该多克隆抗体与重组蛋白His-FAPαc 的反应性及检测该多克隆抗体的效价,并用该抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。结果:His-FAPαc融合蛋白可与兔抗小鼠FAPα多克隆抗体特异性结合;该多克隆抗体的效价高,特异性好,并且能检测小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast cells,MEF)及结肠癌和乳腺癌的间质细胞高表达FAPα的全长序列蛋白。结论:制备的兔抗小鼠FAPα多克隆抗体能够有效地识别小鼠胚胎成纤维细胞和肿瘤间质细胞表达的FAPα蛋白,为研究FAPα在肿瘤的发生、发展及转移中的作用和以FAPα为靶点而开展的的抗肿瘤研究奠定基础。 相似文献
10.
目的了解老年女性泌尿系感染病原菌的分布及耐药情况,指导临床合理用药。方法对医院2010~2012年泌尿系感染的老年女性患者中段尿进行细菌培养及药敏分析。结果医院老年女性泌尿系感染的细菌以革兰氏阴性菌为主,占59.2%,常见致病菌有大肠埃希菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌。真菌感染比例较高,为23.1%.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南敏感,对头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐药率较低,为4.8%~23.8%,而对其它抗菌药物耐药率较高;革兰阳性球菌对万古霉素敏感,对阿米卡星和呋喃妥因的耐药率低,为2.6%~17.9%。结论泌尿系感染病原菌的培养和耐药性监测,对临床合理用药具有重要意义。 相似文献