Neu-P11对急性高眼压大鼠视网膜AQP4表达及眼内压的影响

<正>水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)是视网膜上重要的水通道蛋白之一,参与房水的分泌和排出,有调节眼内水、电解质运输平衡的功能~[1]。褪黑素(melatonin,Mel)是松果体合成分泌的一种吲哚类神经内分泌激素,可以作为黄斑变性、青光眼以及心血管疾病的一种辅助治疗药物,具有降低眼内压(intraocular pressure,IOP)的作用~[2-3]。然而,褪黑素药     

FoxO1在2型糖尿病中的作用及其研究进展

叉头框蛋白1(FoxO1)是机体内重要的转录因子,调控着多种基因的表达,它也是胰岛素通路中的关键因子。研究表明FoxO1通过参与胰岛素抵抗、胰岛β细胞增殖分化和凋亡、肥胖相关而在2型糖尿病(T2DM)的发生发展中发挥重要作用。本文就FoxO1对T2DM的影响做简要综述。     

重组免疫毒素TRAIL DR5/ScFv-PE25的构建及活性检测

目的:构建绿脓杆菌外毒素PE融合抗TRAIL DR5单链抗体基因TRAIL DR5/Sc Fv的原核表达载体,诱导表达,并检测其生物学功能。方法:根据TRAIL DR5单链抗体HGS-ETR2的氨基酸序列,优化密码子,合成全长的编码序列作为模板,PCR技术扩增TRAIL DR5/Sc Fv基因,基因重组技术将两段TRAIL DR5/Sc Fv与PE25基因连接,组成TRAIL DR5/Sc Fv-PE25融合基因。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),离子交换层析和亲和层析技术纯化重组蛋白。WST-8技术检测细胞毒性。结果:成功构建了重组免疫毒素基因TRAIL DR5/Sc Fv-PE25,重组蛋白经纯化后,每升发酵液可得到4.95 mg融合蛋白(纯度95%),该融合蛋白具有抑制A431/H9和Panc 3.014癌细胞增殖的作用。结论:成功表达并纯化TRAIL DR5/Sc Fv-PE25重组免疫毒素,检测其生物学活性,为TRAIL DR5阳性癌细胞的靶向治疗研究奠定了基础。     

褪黑素通过抑制ROS改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢

目的探讨褪黑素（MLT）对胰岛素抵抗（IR）HepG2细胞葡萄糖代谢的影响及机制。方法培养HepG2细胞,高糖高胰岛素（25mmol／L葡萄糖、1μmol／L胰岛素）诱导24h,建立IR细胞模型并给予MLT（1nmol／L,10nmol／L）处理。葡萄糖氧化酶法、蒽酮法和荧光探针法检测HepG2细胞的糖摄取、糖原含量及活性氧（ROS）产率。结果HGI孵育HepG2细胞24h后,细胞的葡萄糖摄取及糖原含量明显减少（P〈0．01）,ROS产率显著增加（P〈0．01）;而MLT处理增加了IR细胞葡糖糖的摄取（P〈0．01）和糖原合成（P〈0．05）,降低ROS的水平（P〈0．01）。结论MLT可能通过抑制ROS的生成而改善氧化应激,从而促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖的摄取和利用、增强其胰岛素敏感性。     

Neu-P11下调JNK及其磷酸化水平改善睡眠限制大鼠葡萄糖稳态

目的 研究新型褪黑素（MLT）受体激动剂Neu-P11对睡眠限制大鼠胰岛素敏感性的影响及其作用机制。方法 采用转笼法对SD大鼠进行8天的睡眠限制,期间每天分别给予腹腔注射Neu-P11（20 mg/kg）、MLT （5 mg/kg）、生理盐水。实验末测定空腹血糖、胰岛素、丙二醛（MDA）水平及GSH-Px、SOD活性,检测骨骼肌组织JNK及其磷酸化水平。结果 与正常对照组比较,睡眠限制大鼠空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR及MDA水平明显升高,SOD、GSH-Px 活性降低,JNK及其磷酸化水平显著增高;而Neu-P11、MLT处理的睡眠限制鼠血糖、胰岛素、MDA、JNK及其磷酸化水平均下降,同时SOD、GSH-Px 活性增强。提示Neu-P11、MLT可以改善睡眠限制鼠的抗氧化能力和葡萄糖稳态。结论 Neu-P11通过下调JNK及其磷酸化水平而改善其抗氧化能力,从而改善睡眠限制引起的胰岛素抵抗。     

Neu-P11对急性高眼压大鼠眼压及视网膜组织胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨Neu-P11对急性高眼压大鼠眼压及视网膜胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)表达的影响.方法 24只雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、高眼压组、褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组,每组6只,后3组采用Trendelenburg卧位法建立高眼压模型,各组通过眼角膜滴注方法给药.正常对照组和高眼压组滴注10 μL生理盐水,褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组分别滴注10 μL 100 μmol·L-1褪黑素和NeuP11药物治疗,给药后休息2h,再次置于卧位45 min后每小时测1次眼压,共6次,观察1周,重复实验1次.实验末注射过量戊巴比妥钠处死大鼠,留取各组大鼠眼球常规组织学切片观察SD大鼠视网膜形态学变化;免疫组织化学染色观察视网膜GFAP的表达.结果 正常对照组眼压为(13.61±0.55) mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),高眼压组眼压为(41.26±1.73)mmHg(P ＜0.01),即急性高眼压大鼠模型建立成功.与正常对照组相比,高眼压组大鼠视网膜水肿增厚,层次不清晰,GFAP表达呈强阳性.而褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组大鼠眼压较高眼压组显著降低,GFAP蛋白阳性表达明显减弱.结论 Neu-P11能够降低急性高眼压大鼠眼压,抑制视网膜组织胶质细胞的激活,降低GFAP表达,保护视网膜.     

Neu-P11通过抑制氧化应激降低急性高眼压大鼠眼内压

目的褪黑素(melatonin,Mel)是由松果体分泌的一类吲哚类神经内分泌激素,具有调节昼夜节律和抗氧化等广泛的生物学作用。新型褪黑素非选择性受体激动剂NeuP11与褪黑素作用相似。该文旨在研究Neu-P11对急性高眼压大鼠眼内压的影响及其相关机制。方法采用Trendelenburg卧位(头低脚高80°位置)法将30只健康8周龄SD大鼠建立急性高眼压模型,即动物被置于Trendelenburg卧位,用Tonopen XL接触眼压计每5 min测量1次眼内压,取20 min最大值。建模后将大鼠随机分为5组:正常眼压+生理盐水组、高眼压+生理盐水组、高眼压+10 mg·kg~(-1)Mel组、高眼压+20 mg·kg~(-1)Neu-P11组、高眼压+50 mg·kg~(-1)Neu-P11组,每组6只。给药后平位休息2 h,再次置于Trendelenburg卧位45 min后,连续监测6 h眼内压(每小时1次)。连续给药1周后,注射过量戊巴比妥钠处死SD大鼠,心脏取血,检测急性高眼压大鼠血清中MDA、SOD和GSH-Px的活性;留取各组大鼠眼球进行常规组织学切片,观察SD大鼠视网膜形态学变化。结果 Trendelenburg卧位诱导模型组大鼠眼内压值比正常组升高了约202.9%(P<0.01),且视网膜增厚,层次不清,机体氧化应激水平明显升高。而经Neu-P11和褪黑素治疗后,明显改善了机体氧化应激水平和视网膜水肿,降低大鼠眼内压。结论 Neu-P11可能通过抑制机体氧化应激水平,降低急性高眼压大鼠眼内压。