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目的: 应用RNA干扰技术沉默肺癌A549细胞中 PIN1 (protein interacting with N1MA1)基因的表达,探讨其对A549细胞增殖、细胞周期和裸鼠成瘤能力的影响。 方法: 构建靶向 PIN1 基因的shRNA真核表达质粒pGPU6-GFP-Neo-PIN1和无义对照质粒pGPU6-GFP-Neo,以脂质体法转染A549细胞,G418筛选稳定沉默 PIN1 基因的细胞株。Real-time PCR和Western blotting验证 PIN1 基因在mRNA和蛋白水平的表达,MTT法和流式细胞术检测A549细胞增殖和细胞周期分布。将稳定沉默 PIN1 的A549细胞与对照细胞皮下接种裸鼠,观察接种后肿瘤生长情况。 结果: 成功构建了pGPU6-GFP-Neo-PIN1载体,转染A549细胞并筛选获得稳定克隆。稳定转染pGPU6-GFP-Neo-PIN1的A549细胞中 PIN1 mRNA表达量较pGPU6-GFP-Neo转染组下降了893%;蛋白表达同时也显著抑制。 PIN1 基因沉默组的A549细胞增殖速率明显下降(P<0.01),细胞出现G1期阻滞。小鼠体内实验显示, PIN1 沉默的A549细胞在裸鼠体内成瘤能力降低(P<0.01)。结论: pGPU6-GFP-Neo-PIN1质粒稳定转染肺癌A549细胞能有效沉默 PIN1 基因的表达,从而抑制A549细胞的增殖、影响细胞周期和抑制成瘤能力。 相似文献
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目的:检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系?方法:采用免疫组织化学方法检测MMP-2蛋白在106例食管鳞癌和50例癌旁正常食管上皮组织中的表达情况?结果:MMP-2蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为80.2%,与正常食管上皮组织相比,差异有统计学意义(P < 0.05);MMP-2蛋白表达阳性率在食管鳞癌不同分化程度?浸润深度?淋巴结有无转移和不同临床分期中的差异具有统计学意义(P < 0.05)?结论:MMP-2蛋白在食管磷癌组织中呈高表达,对其检测在食管鳞癌浸润?转移的预后判断上有重要临床意义? 相似文献
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目的:探讨术前诱导化疗序贯同步放化疗治疗局部晚期食管癌的疗效与不良反应?方法:将111例经病理证实的Ⅱ~ⅢB期食管癌(T3N0M0,T1~3N1~2M0或T4N0~1M0)随机分为术前诱导化疗后序贯同步放化疗组(诱导组)52例和术前同步放化疗组(同步组)59例?诱导化疗方案:紫杉醇135 mg/m2(第1天),顺铂25 mg/m2(第1~3天),每21 d重复,共2个周期?同步放化疗方案:紫杉醇60 mg/m2(第1?8天),顺铂20 mg/m2(第1~3天),每28 d重复,放疗期间共完成2个周期化疗?放疗剂量为45 Gy?手术在完成同步放化疗后3~8周进行?结果:放化疗后诱导组有效率(完全缓解+部分缓解)高于同步组(78.8% vs. 61.0%,χ2=4.135,P=0.042)?同时诱导组术后TRG0率亦高于同步组(42.6% vs. 22.4%,χ2=4.435,P=0.035)?诱导组的1?2?3年总生存率和1?2?3年的无进展生存率均优于同步组?诱导组的急性不良反应发生率要高于同步组,但多为轻度的Ⅰ~Ⅱ度反应,两组的晚期不良反应相似?结论:术前诱导化疗序贯同步放化疗治疗可切除的局部晚期食管癌能够提高局部控制率和生存率,不良反应可以耐受,值得临床推广应用? 相似文献
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