无锡地区外周血胎儿染色体非整倍体高通量测序的临床应用

目的评估无锡地区外周血胎儿染色体非整倍高通量测序(NIPT)技术在胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的应用价值及筛查效率。方法收集2015年4月至2017年9月于南京医科大学附属无锡妇幼保健院就诊、行NIPT并完成妊娠结局随访的单胎妊娠孕妇10 269例。对NIPT结果为高风险的孕妇,建议进行羊膜腔穿刺行产前诊断,低风险者随访妊娠结局。评价无锡地区NIPT在筛查胎儿常见染色体疾病的敏感性、特异性、阴阳性预测值等指标。结果 10 269例单胎妊娠孕妇中,高风险131例(1.27%,131/10 269),NIPT对筛查T21、T18、T13的敏感性分别为97.29%、100%、100%,特异性分别为99.98%、99.92%、99.97%,筛查T21、T18、T13阳性预测值分别为94.74%、39.46%、57.14%,阴性预测值分别为99.99%、100%、100%。结论NIPT对T21的产前筛查效率近似诊断水平,对染色体数目异常嵌合体也有一定的筛查价值,对性染色体、常染色体拷贝数异常的筛查效率有待进一步提高。     

应用Multiple-SNaPshot技术无创性产前检测唐氏综合征

目的:探讨1种相对便捷?准确?经济的适用于杂合型SNP位点的无创性产前检测胎儿唐氏综合征的方法?方法:选择50例孕整倍体胎儿(孕15~21周)?13例孕21三体胎儿(孕19~26周)的母血浆样本,应用Multiple-SNaPshot法检测胎盘源性PLAC4基因上5个SNP等位基因的基因比率及其杂合性,从而对杂合型SNP位点的胎儿无创性产前检测唐氏综合征;同时对我国苏南地区200例人群的5个SNP位点进行基因型别研究?结果:从63例单胎孕妇外周血中成功提取到PLAC4 mRNA,检测出17例PLAC4上为杂合型SNP的样本,通过分析SNP等位基因比率检测出14例正常整倍体胎儿及3例21三体胎儿?苏南地区人群PLAC4上Rs8130833和Rs4818219位点的杂合度分别为0.278和0.343?结论:对PLAC4基因上为杂合型SNP位点的胎儿,用Multiple-SNaPshot法检测其等位基因比率可用于无创性产前筛查唐氏综合征?苏南地区人群PLAC4基因上SNP杂合度较高的位点有Rs8130833和Rs4818219?     

CNVplex联合STR技术在复发性流产遗传学查因中的应用

目的 运用快速检测绒毛染色体拷贝数变化的方法探讨复发性流产查因途径.方法 对60例反复自然流产病例的绒毛样本(孕13周前)分别进行多重DNA拷贝数(CNVplex)和荧光原位杂交(FISH)技术检测,所有样本同时行绒毛培养核型分析验证.结果 48例培养成功的复发性流产病例,染色体异常率为60.42％.其中48例CNVplex检测结果与核型分析相一致:包括20例染色体正常者、23例常染色体三体,3例三倍体和2例45,XO(Turner综合征);而FISH检测结果中与核型分析结果相符的只有38例.对于非嵌合体和非结构异常样本,两种方法与细胞遗传学核型分析结果符合率分别为100％ (CNVplex)和79.17％ (FISH).结论 应用CNVplex联合短串联重复序列(STR)技术可检测绒毛染色体拷贝数及检测5 Mbp以上的重复和缺失异常,利于分析流产病因.     

2003～2010年3790例孕妇产前诊断结果分析

目的:探讨妊娠中期不同指征孕妇行羊膜腔穿刺的临床意义。方法:对2003年～2010年间在无锡市妇幼保健院产前接受羊膜腔穿刺术的3 790例孕妇的资料进行回顾性分析。结果:3 790例孕妇均一次穿刺成功,羊水培养成功率99.23%(3 761/3 790);唐氏综合征筛查高风险接受羊膜腔穿刺者占73.64%(2 791/3 790);染色体核型异常检出率4.85%(184/3790),夫妇双方之一染色体异常时子代染色体异常检出率最高,达22.58%(7/31),孕妇高龄羊膜腔穿刺者阳性率5.99%(27/451);中孕血清学筛查21-三体及18-三体高风险病例穿刺阳性诊断率为4.37%(122/2 791)、9.09%(8/88);因羊膜腔穿刺者结果异常终止妊娠率55.43%(102/184)。结论:妊娠中期羊膜腔穿刺是安全可靠的侵入性产前诊断方法,详细收集孕妇病史信息、结合超声检测结果明确产前诊断指征可提高异常染色体核型的检出率。     

中孕羊水细胞培养和染色体制备方法的分析

目的探讨一种高效、简便和稳定的羊水细胞染色体制备方法,提高产前诊断的准确性和成功率。方法选择2002年9月3日到2009年7月9日孕周为16.0～29的产前筛查为高风险的孕妇2689位,抽取羊水进行细胞培养,行羊水细胞染色体核型分析。结果 2689例羊水细胞培养成功率为99.9%,核型分析的成功率为99.8%,发现异常核型74例,异常核型率为2.8%,其中18-三体10例,占0.37%,21-三体19例,占0.71%。结论本方法具有高效、简便、染色体带纹清晰等优点,在产前诊断中具有结果准确可靠和实用价值。     

中孕期孕妇血浆胎儿PLAC4基因含量的动态变化

目的探讨胎盘特异性基因4(PLAC4)mRNA在不同孕期孕妇血浆中表达的动态变化。方法经羊水穿刺核型分析确诊为孕正常整倍体胎儿的单胎妊娠孕妇82例(对照组),按收集血样时的不同孕周范围(17-23周)进行分组,采用定量PCR法检测PLAC4mRNA的表达水平。同时对18例孕非整倍体胎儿孕妇血浆(病例组,其羊水核型分析均为21三体胎儿)PLAC4mRNA行定量分析。比较PLAC4mRNA在不同孕期及两组间的含量差异。结果对照组血浆中PLAC4mRNA在17-18周(中孕)时的表达水平低于20-23孕周(P<0.05);对照组与病例组间的胎儿PLAC4mRNA含量无统计学差异(P>0.05)。结论中孕期孕妇血浆中胎儿游离PLAC4mRNA含量在20-23孕周时较高;中孕期21三体孕妇血浆中胎儿基因PLAC4mRNA含量与孕正常整倍体胎儿的孕妇无统计学差异。     

孕中期血清学筛查在产前诊断及妊娠结局预测中的应用

目的评价中孕期产前血清学筛查在产前诊断及指导妊娠结局中的应用价值。方法应用时间分辨荧光免疫法（DELFIA）
对2011~2013年在我院产检的25 520例中孕期单胎妊娠孕妇进行free-β-HCG、μE3、AFP三联血清学指标检测,对筛查高风险者
进行羊水穿刺产前诊断,对开放性神经管缺陷（NTD）高风险者进行多普勒超声检查确诊,并随访其妊娠结局。结果25 520例
产前筛查孕妇中,共筛出高风险1254例（4.91%）,818例行介入性产前诊断者染色体结果异常共47例（5.75%）。随访结果显示
筛查高风险人群不良妊娠结局发生率为1.91%（24/1254）,显著高于筛查低风险人群的0.1%（25/24256）,差异有统计学意义（P<
0.01）。产前诊断结果显示高龄组对21三体征的检出率（15%）显著高于35岁以下组（1.65%）,差异有统计学意义（P<0.01）;另对
189例因产前筛查单项指标中位数MoM值异常行产前诊断的病例分析,染色体异常率为3.17%（6/189）。结论中孕期血清学
筛查,除可筛查胎儿染色体及解剖结构异常,还可用于不良妊娠结局的指导,此外对高龄孕妇出生缺陷的预防也有较高的应用
价值。产前筛查单指标MoM值异常对胎儿染色体异常有一定的提示价值。
     

产前诊断与血清学筛查在高龄孕妇唐氏综合征中的应用比较

目的 :比较孕中期血清学筛查和产前诊断在预防高龄孕妇唐氏综合征等出生缺陷中的临床应用价值。方法 :选取2011~2013年间在南京医科大学附属无锡妇幼保健院行羊水穿刺产前诊断的506例孕中期单胎妊娠高龄孕妇为研究对象,分为两组:一组孕妇在诊断前知情同意后自愿进行了孕中期游离绒毛膜促性腺激素、游离雌三醇、甲胎蛋白等血清学指标检测,筛查均为高风险(筛查高风险组,136例,神经管缺陷高风险未计入内);另一组孕妇为≥35岁未行血清学筛查而直接行羊水穿刺产前诊断者(单纯高龄组,370例)。根据两组诊断结果及随访妊娠结局比较血清学筛查的临床应用价值。结果:506例高龄孕妇中,共诊断染色体异常25例,阳性率4.94%。筛查高风险组共确诊唐氏综合征9例(6.60%),其他染色体异常4例(3.0%);随访发现该组不良妊娠结局发生率4.41%(6/136)。单纯高龄组中检出唐氏综合征2例(0.50%),其他染色体异常10例(2.70%),不良妊娠结局发生率0.54%(2/367)。筛查高风险组对唐氏综合征的检出率和不良妊娠结局发生率均明显高于单纯高龄组(P<0.01)。结论 :孕中期血清学筛查,不仅在高龄孕妇唐氏综合征的预防中有较高应用价值,对评估高龄孕妇发生不良妊娠结局的风险也有较好作用。     

153例辅助生育患者孕中期唐氏筛查结果分析

目的：探讨孕中期唐氏筛查在辅助生育患者产前筛查中的意义。方法选择该院2011～2012年间辅助生育患者153例为辅助生育组,并取同期自然妊娠且单胎妊娠的孕妇150例为自然妊娠组,采用时间荧光免疫分辨法进行血清标志物孕妇甲胎蛋白（AFP）、绒毛膜促性腺激素（β‐HCG）、游离雌三醇（uE3）3项指标筛选孕中期唐氏综合征,对所有接受产前筛查的孕妇追踪妊娠结局。结果辅助生育组假阳性率高于自然妊娠组（5．26％vs．4．70％,P＜0．05）,β‐HCG值高于自然妊娠组（P＜0．05）。结论孕中期唐氏筛查在辅助生育患者中预测异常胎儿和不良妊娠结局有一定的意义,但假阳性率较自然妊娠患者高。     

孕妇血浆中胎儿游离DNA的来源、基本特性和应用

随着分子生物学的飞速发展及各项技术的逐渐成熟,DNA测序技术推动产前诊断向前飞速发展,现已成为产前诊断研究的热点和突破口,这些成果是在香港中文大学的卢煜明教授（Dennis Lo）等研究的基础上逐渐发展起来。