重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达

目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin.结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin.结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用.     

儿童紫癜性肾炎的治疗进展

过敏性紫癜(HSP)是以全身性坏死性小血管炎为主要病理改变的疾病。临床以皮肤紫癜、关节炎、胃肠道病变以及肾脏损害为特点的综合征。紫癜性肾炎是指HSP引起的肾脏损害。临床上在HSP病程中(包括病程6个月以内)出现血尿和(或)蛋白尿即可诊断。HSP的病因不明,多认为与感染和变态反应有关。免疫功能紊乱是本病主要发病机制。本文就该病在激素、免疫抑制剂、抗血小板聚集剂、抗凝剂、血管扩张剂、抗氧化剂、中药、血浆置换和肾移植方面的治疗进展予以综述。     

姜黄素抑制脂多糖刺激的系膜细胞增殖及其白细胞介素1β和巨噬细胞趋化蛋白1基因的表达

目的　观察姜黄素对系膜细胞增殖以及对系膜细胞基质蛋白分泌的影响 ,并进一步探索姜黄素对系膜细胞白细胞介素 (IL 1β)和巨噬细胞趋化蛋白 (MCP 1)基因表达的改变。 方法　采用不同浓度姜黄素处理体外培养的人肾小球系膜细胞后 ,分别收集上清液及细胞 ,应用ELISA的方法测定上清液中胶原Ⅳ和Ⅲ的蛋白分泌量 ,MTT法测定系膜细胞活性 (吸光度值 ) ,RT PCR的方法测定系膜细胞IL 1β和MCP 1基因的相对表达量 ,以未加LPS及姜黄素和仅加LPS不加姜黄素作为对照组。结果　当姜黄素浓度大于或等于 6 2 5 μmol/L时 ,系膜细胞增殖明显受到抑制 (P <0 0 1) ,且表现为浓度依赖性。在基础状态下 ,系膜细胞分泌一定量的胶原Ⅳ和Ⅲ [(10± 9 13)ng/ml和 (2 9 5± 0 5 8)ng/ml],亦有MCP 1mRNA表达 [(42 1± 14 98) % ],但IL 1βmRNA几乎不表达 ;经LPS刺激后其胶原Ⅳ和Ⅲ分泌增加 [(138 75± 2 3 2 3)ng/ml和 (38 2 5± 5 38)ng/ml],同时IL 1β和MCP 1基因表达上调 [分别为 (16 91± 1 6 8) %和 (76 6± 6 5 9) % ],而姜黄素浓度为 4 μmol/L时即能明显抑制LPS刺激的系膜细胞胶原Ⅳ和Ⅲ的蛋白分泌 (P <0 0 5 ) ,且在高浓度时作用更为明显 ;同时姜黄素还能消除LPS上调系膜细胞IL 1β和MCP 1基因表达的作用 (P <     

荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响

目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响.方法:PCR扩增NPHS2eDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆人pEGFP-C2.将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况.结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布.结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布.     

以慢性腹泻为首发表现的节细胞神经母细胞瘤1例

患儿，女，1岁7个月，腹泻4个月，曾于当地医院予抗感染、补液及蒙脱石散、双歧三联活菌等治疗后腹泻未见好转，仍表现为黄色稀水样便，4、5次／d，每次约200mL，体质量由12kg降至9kg，无发热、腹痛、便血。转诊本院查电解质K^＋2．4mmol／L，Cl^-110mmol／L；肾功能正常。血气分析：pH7．25，HCO3^-12．6mmol／L。门诊拟慢性腹泻病收入院。     

儿童免疫球蛋白A肾病临床与病理分析

目的分析儿童免疫球蛋白(Ig)A肾病(IgAN)临床、病理特点及临床和病理的关系。方法经肾活检诊断为原发性IgAN的39例儿童,男32例,女7例,发病年龄2岁11个月~14岁1个月,对其临床表现和肾小球、肾间质及免疫病理进行分析。结果性别和病程不同的儿童IgAN,其病理分级程度无差异性(Uc=0.018 P>0.05;χ2=1.365 P>0.05),临床分型、肾间质病变和免疫沉积种类不同的有差异性(Uc=2.277 P<0.05;χ2=7.66 P<0.01)。结论不能根据病程长短来判断儿童IgAN病理轻重,有蛋白尿者病理分级较重,必须尽早行肾活检明确诊断及病理类型,早期予正确有效治疗,要重视间质病变对预后的影响。