hsa-miR-1908上游启动子区的生物信息学分析

目的利用各种生物信息学工具预测hsa-miR-1908上游启动子功能,以进一步研究其在人脂肪细胞中的转录调控机制。方法应用Ensemble数据库获取hsa-miR-1908上游启动子序列,利用多种在线相关软件预测出甲基化部位和转录因子结合部位。结果获取hsa-miR-1908上游启动子序列全长1 458 bp。miR-1908启动子序列中CpG岛位于(438~756)bp、(836~937)bp、(979~1374)bp处,CpG岛的存在会抑制miR-1908启动子的转录。miR-1908有15个转录因子的结合位点。结论 miRNA启动子相关生物信息学的研究,提高对启动子的研究效率,为进一步研究miR-1908的转录调控机制提供了重要的信息。     

注意缺陷障碍动物模型的行为学特征检测

目的：以国外常用的注意缺陷障碍动物模型SHR大鼠为观察对象，观察注意缺陷障碍动物模型的行为学特征。 方法：实验于2003—12／2004-01在南京医科大学动物实验中心完成，清洁级SHR大鼠（注意缺陷障碍组）和WKY大鼠（对照组）各10只，鼠龄4周，均为雄性，体质量70-90g，两组之间差异不显著。利用开场试验观察记录大鼠穿越的格子数、大鼠直立次数、理毛次数，以及粪便数，lat迷宫观察大鼠穿越角落的频数及直立和斜搭在墙上的频率，跳台试验记录每只大鼠受到电击后跳上平台的次数，以此作为学习成绩。24h后重新测试，在铜栅通电的情况下，直接将大鼠置于橡皮台上，记录第1次跳下橡皮台的潜伏期和5min内的错误次数作为记忆的成绩。 结果：10只SHR大鼠和10只WKY大鼠均进入结果分析。①白天及夜晚开场中SHR大鼠穿越格数及直立次数均较对照组WKY大鼠显著增多（白天：72．10&;#177;15．44，37．50&;#177;9．59，29．40&;#177;15．19，10．30&;#177;8．55；夜晚：83．70&;#177;11．78．49．00&;#177;7．94,42．00&;#177;18．12，14．10&;#177;10．45，P〈0．001）。②SHR大鼠在Lat迷宫中30min内，穿越角落频数、直立次数、理毛次数均较对照组WKY大鼠显著增加（128．30&;#177;29．38，151．90&;#177;46．51，14．00&;#177;5．03；46．10&;#177;22．97，36．00&;#177;26．31，7．90&;#177;4．12，P〈0．001或P〈0．05）；将其分为0～10min。10—20min、20～30min3个时间段来分析，发现随着时间的延续，SHR和WKY大鼠穿越角落频数逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠穿越角落频数仍较对照组WKY大鼠显著增加（63．80&;#177;15．5，36．10&;#177;13．34，28．40&;#177;8．34：26．40&;#177;11．01，13．30&;#177;12．18，6．40&;#177;4．97，t=6．13，3．99，7．15，P均〈0．01）。SHR和WKY大鼠直立次数随着时间的延续也逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠直立次数仍较对照组WKY大鼠多（67．30&;#177;20．49，46．60&;#177;21．58．38．00&;#177;14．31；18．80&;#177;12．04，11．60&;#177;12．21，5．60&;#177;4．38，t或t’=6．41，4．46。6．85，P均〈0．01）。③跳台实验结果显示，SHR和WKY的学习能力差异无显著性，记忆测试时SHR大鼠的潜伏期与WKY大鼠也未见显著差别，但SHR大鼠的错误次数显著高于WKY大鼠（1．42&;#177;1．00．0．56&;#177;0．73．t=2．19。P〈0．05）。 结论：利用开场实验、Lat迷宫及跳台实验等多方法结合，可以简单有效的从多动、注意障碍、学习记忆等方面对注意缺陷障碍模型进行行为学检测。     

NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响

【目的】 观察NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响。 【方法】 以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4(PID1)基因(NYGGF4-pcDNA3.1 (+)/myc-His B)的3T3-L1前体脂肪细胞,以转染空载体[pcDNA3.1(+)/myc-His B]的3T3-L1前体脂肪细胞为对照,经1-甲基-3异丁基黄嘌呤(MIX)加地塞米松、胰岛素方案诱导分化为成熟脂肪细胞,采用Real-time PCR检测线粒体代谢酶指标:己糖激酶(Hexokinase,HKI)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA,ACC)、柠檬酸合成酶( citrate synthase,CS)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyl-transferase 1,CPT1)、细胞色素C(Cytochrome c,Cyc-c)基因表达水平。 【结果】 NYGGF4(PID1)过表达显著降低3T3-L1脂肪细胞己糖激酶、乙酰辅酶A羧化酶、柠檬酸合成酶、肉毒碱棕榈酰转移酶1、细胞色素C基因表达水平,差异有统计学意义。 【结论】 NYGGF4(PID1)基因过表达,下调3T3-L1脂肪细胞中定位于线粒体的代谢关键酶,提示NYGGF4(PID1)基因过表达能影响3T3-L1脂肪细胞的线粒体代谢。     

不同浓度氧气复苏窒息极早产儿的系统评价

目的探讨不同浓度氧气复苏窒息极早产儿的临床效果。方法通过文献检索收集不同浓度氧气复苏窒息极早产儿的随机对照试验,采用RevMan 5.0分析软件,首先进行异质性检验,当结果不存在异质性,以固定效应模型描述,存在异质性时,以随机效应模型表达,将资料进行定量综合,采用比值比(OR)及其95%可信区间(95%CI)表示。结果共6篇文献符合条件纳入研究,其中4篇文献为B级,2篇文献为C级。累计低浓度氧(21%~50%)复苏组157例,高浓度氧(90%~100%)复苏组168例。不同氧浓度复苏对极早产儿复苏失败率(OR=2.03,95%CI:0.87~4.71)和病死率(OR=1.23,95%CI:0.53~2.86)无影响,对支气管肺发育不良(OR=1.07,95%CI:0.55~2.10)、颅内出血(OR=1.99,95%CI:0.76~5.23)、败血症(OR=1.00,95%CI:0.46~2.17)、早产儿视网膜病(OR=0.71,95%CI:0.18~2.73)、气胸(OR=0.28,95%CI:0.04~1.82)、动脉导管未闭(OR=0.74,95%CI:0.34~1.64)的发生率均无影响(P均<0.05)。结论不同浓度氧气复苏窒息极早产儿的效果无差异,但由于纳入文献质量有限,对于复苏开始的氧浓度、如何调整氧浓度、安全的血氧饱和度范围等问题仍需进一步大样本随机对照试验进行评价。     

新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测新生儿高胆红素血症价值的系统评价

目的 对不同国家新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测新生儿高胆红素血症价值的文献进行系统评价,为新生儿高胆红素血症的诊治提供依据。方法检索Cochrane 图书馆、PubMed、OVID、Springer数据库、中国期刊全文数据库、维普数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库,检索时间均从1990年1月至2011年3月。由2名系统评价员进行资料提取和质量评价。结果 10项研究进入分析,偏倚评价为B级6项、C级4项。不同国家制备的新生儿小时胆红素百分位曲线值有一定的差异,印度的小时胆红素百分位曲线值最高,希腊、以色列、中国次之,美国最低。在高度危险区（P95）,胆红素上升速度在生后24 h内最快;中度（P75）和低度（P40或P50）危险区,生后36 h内胆红素上升速度最快,其中印度上升速度最快最高,中国、美国、以色列次之,希腊上升速度最低。新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测高胆红素血症,高度危险区的敏感度为26.9%～75.0%,特异度为89.4%～97.3%;中度危险区的敏感度为78.7%～100.0%,特异度为48.3%～82.3%;低度危险区的敏感度为98.7%～100.0%,特异度为24.4%～56.1%;曲线下面积为0.766～0.990,其中泰国预测的准确性最高,印度、中国次之,美国最低。结论 经皮小时胆红素百分位曲线图预测新生儿高胆红素血症有较高的准确性,具有临床推广应用价值。不同国家经皮小时胆红素百分位曲线有一定的差异,各国应根据本国新生儿小时总胆红素的变化趋势制备各自相对应的曲线图作为新生儿高胆红素血症的干预参考标准。     

肿瘤坏死因子-α对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响及其机制

目的 探讨肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响,并分析其可能的机制.方法 应用1-甲基3-异丁基黄嘌呤(MIX)、地塞米松、胰岛素、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化,以人重组TNF-α或加用细胞外信号调节蛋白激酶( ERK)抑制剂PD-98059干预人成熟脂肪细胞24 h,采用Western blot技术检测细胞膜蛋白与总蛋白中STEAP4蛋白的表达.结果TNF-α干预能显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白向细胞膜转位;ERK抑制剂PD-98059联合TNF-α与单独应用TNF-α诱导人成熟脂肪细胞的细胞膜蛋白和总蛋白中STEAP4蛋白的表达水平比较均无显著差异.结论 TNF-α干预显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白的膜转位,初步排除丝裂原活化蛋白激酶信号途径参与这一调控机制.     

人类肥胖相关新基因LYRMl在人前体脂肪细胞分化过程中的表达变化

[目的] 观察LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化过程中表达水平的变化. [方法] 体外培养人前体脂肪细胞,采用RT-PCR及Western-Blot技术检测LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化不同阶段(前体脂肪细胞;0、2、6、12 d)核酸及蛋白水平的表达变化. [结果] LYRM1基因在分化第2 d(Day2)时核酸及蛋白表达水平均明显上调,与各时段的表达水平差异有显著性(P<0.01),其余各组之间差异无显著性(P>0.05). [结论] 初步揭示了LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化过程中的表达变化趋势.     

新生儿持续性肺动脉高压治疗的临床证据

目的 评价治疗新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)措施的有效性和安全性,为临床应用提供指导.方法 通过数据库检索出符合纳入分析条件的相关文献9篇,采用Meta分析方法 进行定性、定量综合分析.得出合并优势比(OR)及其95%可信区间.结果 目前尚无随机病例对照试验(randomized controlledtrial,RCT)对过度通气、高频通气、控制性碱血症、扩血管药物(硫酸镁、妥拉苏林、前列腺素与前列环素、米力农)肺表面活性物质、治疗PPHN的临床效果进行评价;口服西地那非可降低PPHN患儿的氧合指数(OI)(P<0.01),降低住院期间患儿的病死率(P<0.05);iNO治疗PPHN后30～60min可显著升高患儿的动脉血氧分压(P<0.00001)、减少使用体外膜肺(ECMO)(P<0.00001),长期神经系统的发育随访和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);成本-效果分析吸入一氧化氯(iNO)治疗PPHN,每个患儿多花费1141美元,增量成本-效果比为33 234美元;ECMO治疗PPHN可减少住院期间新生儿病死率(P<0.05),患儿1岁时神经系统发育和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 iNO可显著升高患儿的动脉血氧分压,ECMO治疗可减少患儿的病死率,但增加治疗成本;口服西地那非治疗PPHN疗效评价的随机对照实验(RCT)样本量较少,需要进一步加大样本量.对传统治疗PPHN的措施应进行设计严格、多中心、大样本的RCT.     

降钙素原在诊断早产儿医院感染败血症的临床意义

目的探讨降钙素原在诊断早产儿医院感染败血症的临床意义。方法选择我院分娩的我院分娩的早产儿(胎龄<37周)64例,其中医院感染败血症组早产儿32例,无败血症对照组早产儿32例,入院后使用抗生素前抽取静脉血检测降钙素原(PCT)与C反应蛋白(CRP),对CRP与PCT诊断早产儿医院感染败血症进行诊断性试验比较。结果与无败血症对照组早产儿相比,医院感染败血症组早产儿CRP和PCT的含量均明显升高(P<0.05),PCT诊断新生儿败血症的敏感性为93.3%、特异性为88.2%、阳性预测值和阴性预测值分别为87.5%、93.8%,诊断准确性为90.6%均较CRP高。结论 PCT对于早期诊断早产儿医院感染败血症具有较高的诊断准确性,具有一定的临床应用价值。     

子痫前期患者胎盘组织AHSG基因mRNA及蛋白表达与胰岛素抵抗的关系

目的 探讨子痫前期患者胎盘兰α2-HS-糖蛋白(AHSG)基因mRNA及蛋白表达与胰岛索抵抗的关系.方法 检测36例正常是月妊娠妇女(A组)和24例轻度子痫前期患者(B组)及17例重度子痈前期患者(C组)剖宫产前空腹血及新生儿脐血AHSG、血糖、胰岛素水平,采用RTPCR、Western blot法测定胎盘纰织中AHSG基因mRNA及篮蛋白表达水平.结果 B、C组新生儿脐血AHSC-水平均显著高于A纽(P＜0.01).C组新生儿脐血胰岛索、血糖水平量著低于A组(P＜0.05).A、B、C三组胎盘组织中AHSG基因mRNA表达水平分别为0.57±0.17、0.64±0.14、1.32±0.38,C组显著高于B、A组(P＜0.05).A、B、C三组胎盘组织中AHSG蛋白表达水平分别为0.28±0.11、0.30±0.10、0.58±0.10,C组显著高于A组和B组(P＜0.05).结论 子痫前期患者新生儿脐血AHSG水平显著高于正常足月妊娠组新生儿.重度子痫前期患者胎盘组织中AHSG基因mRNA及蛋白表达水平显著增高,胰岛素抵抗在子痫前期发病中有重要作用.