雌二醇改善慢性温和性应激诱导的去卵巢雌鼠空间学习记忆障碍

目的:探讨雌二醇(E2)对慢性温和性应激(chronic mild stress,CMS)引起的卵巢摘除(ovariectomized,OVX)抑郁模型雌鼠认知功能障碍的改善作用及其机制?方法:采用CMS制备抑郁症动物模型,检测正常及抑郁症模型小鼠的血浆皮质酮水平?造模2周后开始给予OVX小鼠E2,同时继续造模1周?末次给药后采用Morris水迷宫测试其空间学习记忆能力?检测血浆E2以及海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS) mRNA和蛋白表达水平,并标记海马齿状回nNOS阳性细胞数?体外采用雌性胎鼠海马神经元原代培养,给予皮质酮(CORT)及CORT合并E2后24 h,检测nNOS mRNA及蛋白表达水平?此外,体外给予E2后24 h,检测胞外调节激酶(ERK)磷酸化水平?结果:CMS造模后小鼠血浆皮质酮水平均显著上升?外源性补充E2可逆转CMS诱导的OVX雌鼠血浆E2水平的降低?CMS及体外CORT诱导的海马nNOS mRNA及蛋白表达水平的降低,并恢复OVX雌鼠空间学习记忆功能?此外,E2可显著升高雌性胎鼠海马神经元的ERK磷酸化水平?结论:E2逆转了由CMS诱导的OVX抑郁模型雌鼠海马nNOS的异常表达,并改善了其空间学习记忆缺陷,其作用可能是通过ERK磷酸化介导的?     

疫情防控期间生物化学在线课程建设的探索

新冠肺炎疫情特殊时期,在线教学由原来的辅助教学手段转变为主要教学手段。生物化学是药学相关专业的一门基础必修课程。文章探讨了疫情防控期间基于"OOARP模式"五步法在超星平台的生物化学在线课程的建设与实施,力争达到较好的教学质量和教学效果,最大限度地减少新冠肺炎疫情对药学相关专业生物化学教学的影响,最终实现"停课不停教,停课不停学"的目标。     

Plasmocin对人多能干细胞支原体感染的消除研究

目的:探究应用Plasmocin消除人多能干细胞支原体感染时的最佳浓度和所需天数,检测消除支原体感染后的人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)向神经元的定向分化?方法:应用25.0?12.5?8.5?5.0 μg/mL 4种不同浓度的Plasmocin进行支原体感染的消除,用PCR比较消除结果;对已消除支原体的hPSC进行维持培养以及定向分化?结果:应用4种浓度的Plasmocin均能消除支原体的感染,但其中高浓度组(25.0 μg/mL)出现细胞毒性反应,消除支原体后存活下来细胞较少,而低浓度组(5.0 μg/mL)消除支原体所需给药时间较长,12.5 μg/mL浓度组对细胞生长有不利影响,而8.5 μg/mL浓度组对细胞生长影响较小?hPSC在消除支原体感染后可高效分化至前脑神经元,并且9个月后未检测出支原体?结论:应用8.5 μg/mL的Plasmocin加药1周即可彻底消除hPSC中支原体的感染,并且不会对其定向分化能力造成影响?     

人类3D大脑类器官研究进展

人类3D大脑类器官为研究人脑发育和神经系统疾病提供了新的模型。体外培育的人类3D大脑类器官主要是由人多能干细胞（human pluripotent stem cell,hPSC）,包括人胚胎干细胞（embryonic stem cell,ESC）和诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）分化而来。iPSC重编程技术与3D大脑类器官技术相结合,可以获得来自患者的iPSC并分化成包括神经元及大脑类器官在内的几乎任何人体细胞或组织,是动物实验向临床试验转化的桥梁。本文回顾了从多能干细胞技术到3D大脑类器官诞生并发展的历程,介绍了以3D大脑类器官为工具构建脑发育和神经系统疾病的研究模型,讨论了大脑类器官在其他方面的应用和相关技术的研究进展,并分析了3D大脑类器官的局限性及其未来可能的发展方向。     

血清miRNA-181a在帕金森病中神经保护作用及机制分析

目的:探讨miRNA-181a对l-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的帕金森病（Parkinson’s disease,PD）多巴胺能神经元损伤的影响及其相关机制。方法：采用胎龄12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中脑进行多巴胺能神经元原代培养,依据不同处理方法分为4组：①空白对照（Control）组;②PD模型（MPP+）组;③阴性对照（miRNA-NC+MPP+）组;④miRNA-181a+MPP+组。酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以选择性标记多巴胺能神经元,因此采用荧光显微镜对各组TH染色阳性神经元数目、初级突触分枝及最长突触长度进行观察,分析各组之间的差异。结果：Control组多巴胺能神经元细胞体积较大,呈圆形或三角形,胞体发出1个、2个或多个长的分枝以及轴突发出的次级突起,胞体和轴突表面光滑,形态完整,神经元分枝之间相互交织呈网络,联系密切。miRNA-NC+MPP+组经MPP+作用后多巴胺能神经元的数量减少,绝大多数表现为胞体存在,分枝数目及最长突触长度明显减少,网状交织稀少,表面不光滑,有的呈串珠样肿胀或轴突中断、丢失,仅存胞体,少数也表现为胞体空虚、丢失,仅存突起。miRNA-181a+MPP+组较miRNA-NC+MPP+组多巴胺能神经元数目有所增加,胞体形态较好,分枝数目与最长突触长度较miRNA-NC+MPP+组有所改善,且表面较光滑,神经元死亡程度较低。结论：miRNA-181a对MPP+所致多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用。