全人源双特异性c⁃Met/PD⁃L1 scFv⁃Fc融合蛋白的优化、制备及生物学特性鉴定

目的：通过优化设计、构建c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白,探究重轻链不同组合形式对c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白与肿瘤抗原结合的亲和性和特异性的影响。方法：使用生物信息学分析、基因工程抗体技术设计、优化及制备重轻链不同组合的双特异性c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白CP1、CP2、PC1、PC2;生物分子相互作用分析仪BLItz分析融合蛋白对重组c?Met蛋白和PD?L1蛋白的亲和力,ELISA法分析其抗原结合特异性。结果：成功制备双特异性c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白,融合蛋白CP1与重组c?Met蛋白和PD?L1蛋白的亲和力和抗原结合特异性均优于CP2、PC1和PC2。结论：重轻链不同组合形式会影响c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白与c?Met和PD?L1蛋白的亲和力和抗原结合的特异性,融合蛋白CP1的亲和力和抗原结合的特异性最高,其对应的重轻链组合形式可用于c?Met/PD?L1 CAR表达载体的构建。     

PVT1在肿瘤诊断、发生发展、预后和耐药中的研究进展

长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在肿瘤发生发展中发挥着重要的调控作用。浆细胞瘤多样异位基因1(plasmacytoma variant translocation 1，PVT1）是lncRNA的一种，其不具备编码蛋白质的功能，但对肿瘤增殖、迁移和侵袭有影响。在胃癌、肺癌等多种肿瘤中，PVT1高表达。因此，PVT1可能是肿瘤诊断和预后的预测因子，并有希望成为改善药物治疗耐药性的新靶点。本文针对PVT1在肿瘤诊断、发生发展、预后和耐药中的研究进展作一综述。     

PD⁃1/PD⁃L1免疫检查点抑制剂在肺癌临床研究中的进展

免疫治疗已经在肺癌治疗策略中占据重要地位,其中PD?1/PD?L1免疫检查点抑制剂成为该领域的研究热点。PD?1/PD?L1抑制剂可通过阻断PD?1/PD?L1通路重新激活宿主的抗肿瘤免疫应答,已有大量临床研究证明其可以显著改善多种类型癌症包括肺癌的临床终点。基于各项临床研究成果,目前已有4个PD?1/PD?L1抑制剂——Pembrolizumab、Nivolumab、Atezolizumab、Durvalumab经FDA批准用于非小细胞肺癌或小细胞肺癌的一二线治疗或巩固治疗。文章将对PD?1/PD?L1抑制剂在肺癌临床研究中的进展,包括单药或联合用药的疗效、安全性、疗效预测标志物等方面进行综述,旨在为肺癌免疫治疗的临床应用提供依据。     

非小细胞肺癌发生骨转移的危险因素分析

目的:探讨影响非小细胞肺癌骨转移的危险因素。方法:选取2015年至2019年在南京医科大学第二附属医院住院治疗的非小细胞肺癌患者207例［骨转移组（n=113）、无骨转移组（n=94）］。检测血清CA125、CEA、NSE、CYFRA21-1、LDH和ALP的水平,记录年龄、性别、吸烟史、高血压、糖尿病、临床分期、肿瘤位置、组织学类型和淋巴结转移等因素。采用单因素和Logistic多因素回归分析筛选影响非小细胞肺癌患者骨转移的危险因素。结果:单因素分析结果发现两组临床分期、淋巴结转移、CA125、CEA、NSE、CYFRA21-1、LDH比较具有统计学差异（P＜0.05）;NSE、CYFRA21-1在腺癌和鳞状细胞癌血清中水平无统计学差异（P＞0.05）;Logistic多因素回归分析结果显示,临床分期、淋巴结转移和CA125是影响非小细胞肺癌患者骨转移的主要因素（P＜0.01）。结论:临床分期、淋巴结转移和CA125是影响非小细胞肺癌患者骨转移的独立危险因素,为临床早期治疗提供重要的指导意义。     

胃癌患者血清脂肪酸合酶表达水平的诊断意义

目的：探讨胃癌患者血清脂肪酸合酶（ FAS）表达水平的诊断意义。方法收集2012年1月-2013年12月在南京医科大学第二附属医院首次诊断为原发性胃癌的患者53例,其中Ⅰ和Ⅱ期患者24例,Ⅲ和Ⅳ期患者29例,并以51例来自健康体检的汉族人群与52例慢性浅表性胃炎的患者为对照,通过ELISA方法对研究对象的血清FAS表达水平进行定量检测。结果胃癌患者血清FAS的表达水平（5．25±0．48） ng/mL,明显高于健康对照组（2．82±0．28） ng/mL与慢性浅表性胃炎组（3．24±0．37）ng/mL,P＜0．05。通过ROC曲线分析,确定诊断胃癌的血清FAS最佳临界值为3．78 ng/mL。相较于Ⅰ和Ⅱ期患者FAS：（4．04±0．35） ng/mL,Ⅲ和Ⅳ期患者血清FAS （5．83±1．37） ng/mL表达水平更高（P＜0．05）。10例患者在手术前血清FAS水平＞3．78 ng/mL,其中有7例术后下降至＜3．78 ng/mL （P＜0．05）。结论血清FAS表达水平的升高与胃癌的发生、进展有关,对血清FAS含量的检测有助于胃癌的诊断与随访。     

结肠癌组织中maspin及uPA基因的表达与临床意义

目的通过对结肠癌及正常结肠黏膜组织标本中maspin和uPA基因的表达进行检测,探讨二者与结肠癌病理学特征之间的关系,以及在组织中表达的相关性,为临床寻找结肠癌早期诊断指标提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法测定62例结肠癌及30例正常结肠组织中maspin以及uPA基因的表达,对结果进行分析。结果 maspin蛋白的阳性表达率在结肠癌未侵及浆膜、淋巴结无转移及TNM分期0～Ⅰ期者中明显高于侵及浆膜、淋巴结有转移及TNM分期Ⅱ～Ⅳ期者（P均〈0.05）,在结肠癌不同性别患者中无差异（P〉0.05）。uPA蛋白的阳性表达率在结肠癌未侵及浆膜、淋巴结无转移及TNM分期0～Ⅰ期者中明显低于侵及浆膜、淋巴结有转移及TNM分期Ⅲ～Ⅳ期者（P均〈0.05）,在结肠癌不同性别患者中亦无差异（P〉0.05）。maspin与uPA基因在结肠癌的表达中呈负相关（rs=-0.416,P〈0.05）。结论 maspin和uPA基因在结肠癌和正常结肠黏膜组织中的表达有明显差异,且与结肠癌的病理学特征相关,二者在结肠癌组织样本中的表达也存在相关性,可作为反映结肠癌病理生物学行为的指标。     

microRNA-34a在上皮-间充质转化中的作用

正microRNAs(miRNAs)是一类高度保守的单链非编码RNA,长度只有20～24个核苷酸。它们可以与mRNAs的3'非翻译区域(untranslated regions, UTR)结合,抑制信使RNA(mRNA)翻译,或诱导mRNA降解或脱腺苷化,从而在转录后沉默基因表达[1]。miRNAs通过调控靶基因表达,参与多种信号传导途径,调控包括细胞增殖、转移、凋亡、衰老、分化、自噬和免疫反应等诸多生物学过程[2],并与肿瘤等疾病的发生     

血清CEA、CYFRA21-1联合ALP在非小细胞肺癌骨转移诊断中的应用

目的 探讨肿瘤标志物联合ALP在非小细胞肺癌骨转移中的诊断价值。方法 选取非小细胞肺癌患者159例[骨转移组(n=82)、无骨转移组(n=77)] 和83例肺炎患者(肺炎组)。检测血清CEA、CYFRA21-1和ALP的水平,记录年龄、性别等信息。采用Pearson相关分析评价各指标间的相关性。非小细胞肺癌患者骨转移的影响因素采用Logistic回归分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清CEA、CYFRA21-1和ALP诊断非小细胞肺癌患者骨转移的价值。结果 本研究共纳入159例非小细胞肺癌患者,未发生骨转移77例,发生骨转移82例,骨转移发生率为51.6%,腺癌与鳞状细胞癌骨转移发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。骨转移组CEA、CYFRA21-1和ALP的水平均高于非骨转移组和肺炎组(P<0.05),非骨转移组血清CEA、CYFRA21-1和ALP的水平均高于肺炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。ALP与CYFRA21-1、CEA呈正相关(r= 0.278,P<0.01;r= 0.343,P<0.01)。Logistic回归分析结果显示,CYFRA21-1、CEA和ALP是NSCLC患者发生骨转移的危险因素。ROC曲线结果显示,CEA、CYFRA21-1和ALP联合诊断非小细胞肺癌患者骨转移的曲线下面积(AUC)为0.829,95%CI:0.761～0.884,约登指数为0.512,敏感度和特异性分别为72.0%和79.2%。结论 肿瘤标志物联合ALP在非小细胞肺癌患者骨转移的诊断中具有重要价值。