内源性抗氧化剂PRDX4及其在生殖系统作用的研究进展

过氧化物还原酶4（PRDX4）是过氧化物还原酶家族成员,是一种细胞内源性抗氧化剂,可锚定在内质网调节蛋白质氧化折叠,也可分泌到细胞外基质发生抗氧化作用。在女（雌）性生殖系统,氧化应激影响卵巢的功能状态,定位在颗粒细胞及卵母细胞的体细胞型PRDX4（PRDX4s）通过抗氧化应激机制促进卵泡发育成熟、抑制卵母细胞老化,并参与多囊卵巢综合征（PCOS）和卵巢功能减退的病理过程。在睾丸组织内同时表达两种PRDX4亚型,PRDX4s和睾丸特异型PRDX4（PRDX4t）。PRDX4通过抑制内质网应激、清除胞质和细胞外基质活性氧簇（ROS）保护睾丸组织结构与细胞功能,参与调节精子发生和精子形成,抑制生精细胞凋亡。综述PRDX4的结构与功能,及其在调节配子发生中的作用。     

细胞内Ca~(2+)及其在卵母细胞成熟中的作用

Ca~(2+)是重要的第二信使,与多种蛋白结合,调节蛋白质的定位、活性及功能。细胞膜及细胞器上的钙通道严格控制细胞质和细胞器的Ca~(2+)浓度,以保证细胞内信号的正常传导。在卵母细胞成熟和受精的过程中,Ca~(2+)控制卵母细胞的成熟过程,维持受精并启动胚胎发育。卵母细胞体外成熟技术(IVM)是目前临床上不孕不育的重要治疗手段,但它的低成功率一直是IVM不能广泛应用的主要因素。Ca~(2+)拮抗剂能抑制细胞核的提前成熟,使得细胞核与细胞质成熟同步,成为现在IVM的研究热点。本文主要介绍Ca~(2+)的通道,如何介导Ca~(2+)的平衡,Ca~(2+)调控卵母细胞减数分裂的机制和IVM中Ca~(2+)的作用。     

补肾活血方通过VEGF/VEGFR2相关通路促进生精障碍模型小鼠睾丸微循环的研究

目的探索补肾活血方养精胶囊促进生精障碍模型小鼠睾丸微循环的作用及其机制。方法成年小鼠分为空白组、环磷酰胺(CP)模型组、养精胶囊(YC)治疗组(低、中、高剂量)。以石蜡切片HE染色观察小鼠睾丸组织形态;以石蜡切片免疫组化及Western-blotting检测小鼠睾丸CD34表达;RT-qPCR与Western-blotting分别检测组织VEGFR2、SRC、AKT1的mRNA与蛋白表达。结果模型组CD34染色深度与蛋白表达均明显低于空白组,虽然YC低、中、高剂量组CD34的染色深度逐步加深,但只有YC高剂量组CD34蛋白表达明显高于模型组;模型组小鼠睾丸Vegfr2的mRNA表达明显高于空白组,而模型组小鼠睾丸VEGFR2的蛋白表达较空白组明显下降,YC高剂量组小鼠睾丸VEGFR2的蛋白水平较模型组明显上升。各组小鼠睾丸在Src与Akt1的mRNA表达上无统计差异,但在蛋白表达上,模型组小鼠睾丸SRC表达较空白组明显降低,而YC高剂量组小鼠睾丸SRC蛋白水平较模型组明显提高;模型组AKT1蛋白表达较空白组明显下降,YC治疗组小鼠睾丸AKT1蛋白表达与模型组比较无统计学差异。结论补肾活血方能够通过上调小鼠睾丸VEGF/VEGFR2通路中VEGFR2与SRC的蛋白表达进而改善CP模型小鼠睾丸微循环。     

表观遗传学和环境因素与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)是一种雌激素依赖的炎性疾病,发病机制尚不清楚。越来越多的证据表明,一些基因的表观遗传学特性与EMs的发病有关。表观遗传学是指DNA序列不发生变化,但基因表达却发生了可遗传的改变,包括DNA甲基化、组蛋白共价修饰及染色质构象变化,这些改变可能会引发一系列包括肿瘤在内的病理变化。EMs异位组织中芳香化酶基因的Cp G岛序列低甲基化和(或)反式作用因子上调芳香化酶基因的表达;卵巢异位上皮及间质细胞的雌激素受体α(ERα)低表达而ERβ显著高表达;在位细胞的孕激素受体α(PRα)和PRβ均高表达;EMs异位内膜细胞的类固醇生成因子1(SF-1)启动子低甲基化而在位内膜高甲基化。此外,EMs异位组织E-钙黏蛋白(E-cadherin)基因及在位组织同源框基因A10(HOXA10)表达降低也与EMs有关;环境因素可能会影响表观遗传基因导致EMs的发生。综述表观遗传学改变和环境因素在EMs发病中的作用。     

医疗助理在辅助生殖专家门诊诊间患者管理中的作用

近年随着不孕不育人群的增加及医学模式的转变,传统的门诊服务模式受到了严重的冲击。为了不断完善服务模式、持续改进服务质量,为患者提供更加优质的医疗服务,本中心创新性地设立了新的工作岗位,即门诊医疗助理岗。该岗位由护士担任,用于维持门诊就诊秩序,保证一对一就诊模式,诊前对检验结果进行整理归类及安排常规检查,就诊结束后开立相关医嘱、进行宣传教育及交代注意事项,帮助患者预约下次门诊就诊时间等。门诊医疗助理岗的设立不仅帮助患者节约了就诊时间,还大大提高了患者的满意度。     

多囊卵巢综合征患者卵泡液中6种miRNAs表达的检测

目的:分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液外泌体中miRNA-9、miRNA-18b、miRNA-19、miRNA-24、miRNA-199和miRNA-320水平,初步探讨其在PCOS发生、发展中的潜在意义。方法:48例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者,分为PCOS组(23例)和对照组(25例),留取其卵泡液。采用超速离心法提取卵泡液外泌体,分别用外泌体粒径分析(NTA)、蛋白质印迹(Western blotting)和透射电镜验证外泌体。通过实时荧光聚合酶链式反应(PCR)法检测卵泡液和外泌体miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19,miRNA-24,miRNA-199,miRNA-320的表达情况。结果:卵泡液中PCOS组miRNA-199的表达水平高于对照组(5.42±0.80 vs.1.02±0.94,P0.01),miRNA-320的表达水平低于对照组(0.47±0.06 vs.1.23±0.09,P0.01);2组间miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19和miRNA-24的表达水平差异无统计学意义(P0.05)。在外泌体中,PCOS组miRNA-9和miRNA-18b的表达水平高于对照组(8.94±0.54 vs.1.01±0.97,2.66±0.19 vs.1.12±0.06,均P0.01),miRNA-199和miRNA-320的表达水平则低于对照组(0.43±0.11 vs.1.22±0.07,0.53±0.09 vs.1.18±0.15,均P0.01)。结论:PCOS患者卵泡液和外泌体存在miRNA-9,miRNA-18b和miRNA-199的表达,可能与PCOS发生、发展相关。     

甲型血友病胚胎植入前遗传学诊断成功一例

1临床资 育龄夫妇（女方29岁）因甲型血友病（HaemophiliaA）生育风险，于2011年11月1日到南京医科大学第一附属医院生殖医学科门诊咨询。女方弟弟患有甲型血友病，基因检测发现F8 c.3385 C＞T半合子突变，女方及其母亲为F8 c.3385 C＞T杂合突变携带者，家系图及突变位点见图1。     

姜黄素对衰老小鼠卵巢功能的影响

目的探讨姜黄素对D-半乳糖(gal)所致雌性衰老小鼠卵巢功能的影响。方法 60只雌性SPF级C57BL/6小鼠随机分为D-gal组、姜黄素组和空白对照组,每组20只。D-gal组颈部皮下注射D-gal(250 mg·kg~(-1)·d~(-1));姜黄素组在D-gal注射造模的同时腹腔注射姜黄素(100 mg·kg~(-1)·d~(-1));空白对照组颈部皮下注射相同体积生理盐水;1次/d。6 w后检测血清雌激素(E2)、孕激素(P)水平及卵巢组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;使用HE染色方法观察各组卵巢组织始基卵泡计数;应用RT-PCR的方法检测卵巢组织抗苗勒管激素(AMH)、SOD2和过氧化氢酶(CAT)mRNA的表达;Western印迹法检测P16衰老蛋白的表达。结果 D-gal组较空白对照组血清E2、P和卵巢组织SOD水平明显下降(P0.01),卵巢组织MDA则明显上升(P0.01);与D-gal组比较,姜黄素组血清E2、P及卵巢组织SOD水平显著上升(P0.05),卵巢组织MDA则显著下降(P0.01)。与对照组比较,D-gal组卵巢始基卵泡计数显著减少(P0.01);而姜黄素组始基卵泡计数较D-gal组显著增多(P0.05)。与对照组比较,D-gal组AMH mRNA表达显著下降,而CAT mRNA和SOD2 mRNA表达显著升高(P0.01);与D-gal组比较,姜黄素组卵巢AMH mRNA表达升高(P0.05),而CAT mRNA和SOD2 mRNA表达明显下降(P0.05和P0.01)。衰老蛋白P16在空白对照组表达较低,在D-gal组表达最高;与姜黄素组相比,D-gal组P16的表达明显降低(P0.05)。结论姜黄素可明显改善D-gal致衰老雌性小鼠的卵巢功能,可能有益于延长卵巢的生殖寿命。     

体外受精子代小鼠性成熟期心血管功能的评估

目的探讨体外受精(IVF)子代心血管系统的安全性。方法利用C57BL/6J小鼠建立IVF子代小鼠模型(IVF组,n=12),以C57BL/6J自然妊娠子代小鼠为对照组(n=12),观察比较小鼠性成熟期的体质量、血压,并利用彩色超声评估其心脏结构及功能。结果 12周龄IVF组子代小鼠的体质量[(26.13±4.58)g]高于对照组[(22.50±2.37)g],差异有统计学意义(P0.05);仔鼠的血压组间无统计学差异(P0.05)。彩色超声显示仔鼠心血管功能的主要指标(对照组,IVF组),左心室射血分数(65.41%±5.26%,65.77%±6.71%)、左室短轴缩短率(35.41%±4.05%,35.81%±4.84%)、颈动脉中内膜厚度[(0.05±0.01)mm,(0.05±0.01)mm]等无统计学差异(P0.05);左房内径[(2.13±0.12)mm,(2.25±0.10)mm]、左心室质量指数[(8.24±0.46)g/m~2,(11.87±2.03)g/m~2]、主动脉内径[(1.33±0.06)mm,(1.45±0.11)mm]3项指标IVF组显著高于对照组(P0.05)。结论 IVF子代小鼠与自然妊娠小鼠相比,部分心血管指标存在差异,提示IVF对性成熟期子代小鼠的心血管结构与功能可能存在潜在的影响,需要更多的远期随访。