免疫功能低下患者巨细胞病毒性肺炎的诊断和治疗

目的：探讨免疫功能低下患者巨细胞病毒（CMV）肺炎的诊断和治疗. 方法：对31例免疫功能低下患者CMV肺炎的临床资料进行回顾性分析.结果：均接受免疫抑制剂治疗.接受移植手术者27例,死亡7例,CMV肺炎相关病死率22.2%;患有免疫系统疾病者4例,死亡3例,CMV肺炎相关病死率75%.结论：对器官移植患者和长期接受免疫抑制剂治疗的免疫功能低下患者应加强对CMV的监测,早期诊断,及时应用以更昔洛韦为主的综合治疗.     

慢性HBV感染者肝组织HBV cccDNA的定量检测

目的建立一种肝活检组织中HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）的定量检测方法。方法待检肝组织标本共21份，来源于江苏省人民医院肝脏手术患者，包括19份慢性HBV感染，其中HBeAg（＋）标本10份，HBeAg（-）标本9份，4份非HBV感染为阴性对照组，取HBVDNA阳性的患者外周血作为rcDNA组。检测方法的主要步骤为肝组织经蛋白酶K和细胞裂解缓冲液消化后，用液相抽提法提取核酸，将提取的核酸溶液分为2等份。1份用特异性降解单链DNA的核酸酶加以消化，纯化后使用跨缺口引物和SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时荧光定量PCR分析；另1等份则用以定量检测肝细胞看家基因（β-Globin）作为样本细胞参数。检测结果的特异性主要通过PCR反应产物的序列分析及rcDNA组结果的对照进行证实，HBeAg（＋）组和HBeAg（-）组cccDNA水平的差异通过两样本t检验进行分析。结果PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析显示扩增产物的碱基数为350bp左右，DNA测序分析提示产物与目的片段的序列符合率为99％以上，且以rcDNA为对照的结果均为阴性，排除最有可能造成假阳性的rcDNA对结果的干扰。本方法对10mg HBeAg（＋）肝组织标本的cccDNA的检测阳性率为100％。血清HBeAg（＋）的肝组织样本的平均HBV cccDNA水平高于HBeAb（＋）的肝组织标本（P〈0．05）。结论通过上述三种途径证实了本文所建立方法的特异性。应用SYBR GreenⅠ荧光染料和β-Globin作为样本细胞参数所建立的实时荧光定量PCR方法检测肝细胞内HBV cccDNA，具有较高的特异性、敏感性，且成本较低的特点。     

严重发热伴血小板减少综合征病毒核蛋白核酸疫苗的构建及免疫原性研究

目的:构建SFTSV的核蛋白核酸疫苗并探讨其免疫原性?方法:采用PCR方法扩增SFTSV核蛋白基因,并用引物引入限制性内切酶酶切位点,克隆入载体pJW4303?经酶切和测序鉴定正确的质粒,用PEI瞬时转染HEK293T细胞,用免疫印迹法鉴定核蛋白的表达?同时以质粒pJW4303作为阴性对照,免疫BALB/c小鼠,酶联免疫法验证其免疫原性?结果:成功构建质粒pJW4303-N,经Western blot证实SFTSV核蛋白能够在HEK293T细胞中表达?ELISA检测免疫后小鼠血清特异性IgG抗体及其亚型发现,IgG抗体及其亚型较免疫前明显升高,亚型中以IgG2a升高为主?结论:SFTSV核蛋白核酸疫苗pJW4303-N具有良好的免疫原性,为进一步研究SFTSV核蛋白奠定了基础?     

原发毛霉菌病临床特点分析

目的:探讨原发毛霉菌病临床特征?诊断及治疗?方法:分析本院1例原发肺型毛霉菌病播散感染的临床资料,回顾分析CNKI及PubMed数据库中原发毛霉菌病的临床特征?结果:文献报道共13例患者,男8例?女5例,男女比例1.6∶1,发病年龄17~75岁,平均年龄37.92岁;病程1 d~12年,平均1.5年;其中肺型4例(30.77%)?皮肤型4例(30.77%)?鼻眼脑型3例(23.08%)?播散型2例(15.38%);病理诊断10例(76.92%),病原学联合病理诊断3例(23.08%);单纯外科清创治疗2例(15.38%),抗真菌治疗6例(46.15%),清创联合抗真菌治疗5例(38.46%);治愈9例(69.23%),死亡4例(30.77%)?结论:原发毛霉菌病是一种罕见病死率较高的侵袭性真菌病,早期诊断并及时行两性霉素B联合外科清创治疗是抢救成功的关键?     

c-Met基因过表达脐带间充质干细胞株的构建*

目的 建立c-Met慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞（hUMSC）,为治疗肝衰竭作为种子细胞。方法 培养hUMSC,经流式细胞技术检测细胞表面表型,转染c-Met慢病毒载体,在荧光显微镜下观察转染效率,确定最佳多重感染复数（MOI）。采用嘌呤霉素抗性筛选稳定表达c-Met的hUMSC细胞系,采用Western-blot法检测细胞c-met蛋白表达量。结果 P5代细胞高表达CD44、CD90和CD105抗原,不表达CD31、CD45和CD34相关造血细胞抗原,符合人脐带间充质干细胞的特性;构建成功的c-Met慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞最佳MOI=80,经嘌呤霉素筛药,在荧光显微镜下观察发现荧光阳性率为100%,且经Western-blot法检测证实该细胞过表达c-Met蛋白。结论 成功构建过表达c-Met基因的脐带间充质干细胞,为进一步实验打下了基础。     

糖皮质激素治疗重型病毒性肝炎有效性的系统评价

目的:评价糖皮质激素治疗重型病毒性肝炎的有效性?方法:计算机检索PubMed?EMbase?Science Direct?万方?维普?中国生物医学文献数据库,检索时限为1995~2010年,最后检索日期为:2010年10月10日?在严格质量评价的基础上,使用RevMan5软件进行系统评价?结果:初检出683篇文献,经筛选最终纳入12篇文献进行分析?Meta分析结果显示:①死亡率:激素组与对照组相比,有明显统计学差异,激素组死亡率减少达36%(RR=0.64,95%CI:0.42~0.98,P = 0.04)?②有效率:激素组与对照组相比,有明显统计学差异,激素组有效率增加达63%(RR=1.63,95%CI:1.35~1.98,P < 0.000 01)?结论:本系统评价显示使用糖皮质激素治疗重型病毒性肝炎与不使用相比,具有降低死亡率,改善肝功能的趋势?但由于本系统评价纳入的文献质量有限,有必要开展更多设计严谨,大样本?多中心的随机对照试验来确证?     

干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效预测因素的研究进展

对于慢性乙型肝炎患者,干扰素-α常作为首选抗乙肝病毒的药物之一,具有疗程有限、疗效持久的优点,但因其毒副作用多且抗病毒效率低等缺点限制了干扰素的临床应用。因此如何在抗病毒前预测干扰素-α抗病毒疗效至关重要。本文就影响干扰素-α疗效的各种因素进行简要综述,为临床医生选择干扰素-α治疗慢性乙型肝炎患者提供参考。     

人工肝支持系统治疗重型肝炎50例临床分析

重型病毒性肝炎(重型肝炎)由于肝细胞广泛坏死,肝功能严重障碍,有害代谢产物大量积蓄,抑制肝细胞再生,严重干扰其它脏器功能.清除积蓄的有害代谢产物,是重型肝炎治疗的重要环节.人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)具有清除代谢产物、保持内环境稳定、促进肝细胞再生和肝功能恢复的作用[1].我科在2002年2月～2003年3月对50例重型肝炎患者行ALSS治疗,取得一定疗效.     

献血者HBV自然感染后抗-HBs阴性的抗-pre-S1/pre-S2免疫应答研究

目的研究HBsAg的抗-preS在HBV自然感染后抗-HBs阴性献血者中的应答情况。方法采用ELISA法从8 265名5项血液学指标合格的献血者中筛选抗-HBs阴性,抗-HBc阳性的个体,然后再检测其抗-preS。结果共筛选抗-HBs阴性,抗-HBc阳性211例,其中抗-pre-S1/pre-S2阳性165例。结论 HBV自然感染后抗-HBs阴性个体大多数产生了针对HBsAg的抗-preS,该抗体具有更为良好的免疫原性;抗-preS检测能对抗-HBs无应答者进行进一步区分,免除不必要的免疫接种。     

人工肝留置导管2种封管方法的比较

人工肝支持系统在国内是一项治疗肝衰竭的新型血液净化技术,该系统可清除因肝衰竭而产生的多种代谢产物,部分代偿肝脏的代谢与合成功能[1].经皮中心静脉置管建立临时血管通路技术,已经被广泛应用于血液净化治疗,但感染、堵管等常见并发症的发生,可导致反复置管,尤其是股静脉置管,堵管率达17.4%[2].进行人工肝治疗的患者多需进行2～3次的人工肝治疗,少数患者需进行5次以上的治疗.