SP1基因在sublytic C5b⁃9促大鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用

目的：检查特异性蛋白1（specificity protein 1,SP1）在Thy?1肾炎（Thy?1 nephritis,Thy?1N）大鼠肾组织中和亚溶解型C5b?9（sublytic C5b?9）刺激的大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cells,GMCs）中的表达情况,并探讨SP1表达上调对sublytic C5b?9促大鼠GMCs增殖的作用。方法：复制大鼠Thy?1N模型,同时用sublytic C5b?9刺激体外培养的大鼠GMCs,分别用real?time PCR和Western blot检查Thy?1N大鼠肾组织（体内）和sublytic C5b?9刺激的大鼠GMCs（体外）中SP1基因的mRNA和蛋白表达水平及其表达时相。与此同时,构建SP1基因的表达质粒（pEGFP?N1/SP1?His）和发夹状小干扰RNA质粒（SP1 shRNA,shSP1）。将上述质粒分别转染大鼠GMCs（同时设对照质粒转染组）,再给予或不给予sublytic C5b?9刺激。用real?time PCR和Western blot检查SP1表达量,并行CCK?8实验检查GMCs的增殖情况。结果：在Thy?1N大鼠肾组织和sublytic C5b?9刺激的大鼠GMCs中,SP1 mRNA和蛋白表达水平均显著上调,且其体内外表达时相较为一致。体外过表达SP1可显著促进GMCs增殖,而沉默SP1可明显抑制sublytic C5b?9诱导的GMCs增殖反应。结论：Sublytic C5b?9刺激大鼠GMCs后能通过上调SP1表达促进GMCs增殖。