激光多普勒血流仪监测C57BL／6小鼠永久性大脑中动脉闭塞模型

目的评估激光多普勒血流仪监测C57BL／6小鼠永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）模型的可行性。方法C57BL／6小鼠随机分为2组,假手术组和永久性MCAO组。线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型,激光多普勒仪实时监测小鼠脑血流,术后神经功能学评分,24h后2,3,5．三苯基氯化四氮唑染色确定梗死体积。结果MCAO组术前脑血流（186．78±62．50）PU,栓线插入成功后患侧脑血流降低到（25．80±7．66）PU,降低了90．4％。神经功能学评分在（2．48±0．36）分,脑梗死面积达39．79％。假手术组脑血流在基础值波动,未见降低;神经功能学评分为0分,未见脑梗死病灶。结论激光多普勒血流仪监测是一个很好的确定小鼠脑梗死模型成功与否的筛选方法。     

机械牵张对大鼠心室肌蛋白激酶B磷酸化及心钠素分泌的影响

目的:研究机械牵张对大鼠心肌蛋白激酶B(Akt)活化和心钠素(ANF)分泌的影响。方法:采用Langendorff方法灌流大鼠心脏,膨胀球囊持续牵张左心室,从左心室游离心肌,提取胞浆蛋白,用Western blot检测磷酸化Akt、总Akt水平;收集冠脉流出液,用放射免疫分析法检测冠脉流出液中ANF含量。结果:持续牵张不影响灌流心脏的心率和冠脉流出量。但经过20min持续牵张,牵张组心脏灌流液中ANF含量(209.89±65.45pg/ml)较对照组(108.84±25.18pg/ml)明显增高(P<0.01);牵张组大鼠左心室心肌组织磷酸化Akt水平(0.76±0.03)明显高于对照组(0.32±0.02),而总Akt水平与对照组相比无显著性差异。结论:机械牵张可引起心脏心钠素的分泌增加,其机制可能与胞内Akt信号通路的激活有关。     

神经信号转导系统与酒精依赖

大量研究表明环磷腺苷（cAMP)信号转导通路、磷酸肌醇（PI）信号转导通路是介导酒精效应的细胞内靶点。酒精通过影响这些通路的多种组成成分，导致相关酶活性和基因表达调控因子的改变，从而引起细胞短期的调控功能失调和长期的基因表达改变，这些变化可能是酒精耐受和依赖发展的重要分子生物学基础。     

结缔组织生长因子在血管紧张素Ⅱ诱导的人近端肾小管上皮细胞肥大中的作用

目的　探讨结缔组织生长因子 (CTGF)在介导血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的人肾近端小管细胞肥大中的作用。方法　用 [3 H] 亮氨酸掺入、考马斯亮蓝蛋白质定量技术分别观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的人肾近端小管上皮细胞株 (HK 2 )细胞内蛋白质从头合成及细胞内蛋白质含量的影响 ;用流式细胞分析技术观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的细胞周期分布改变的影响 ;用扫描电镜技术观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导细胞形态变化的影响。 结果　AngⅡ可以显著诱导细胞内[3 H] 亮氨酸掺入和细胞内总蛋白质含量增加的作用 ,呈浓度和时间依赖性 ;抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的细胞内总蛋白质含量、[3 H] 亮氨酸掺入量的增加有抑制作用 ,呈浓度和时间依赖性。AngⅡ作用于细胞 4 8h后 ,细胞平均直径、G0 G1期细胞百分比显著增加 (均P <0 0 1) ,抗CTGF抗体可显著抑制AngⅡ诱导的细胞直径增加和细胞周期阻滞 (均P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　AngⅡ可以诱导肾小管上皮细胞发生肥大 ,CTGF可能介导了AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞肥大效应。     

NLRP3在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的:探讨炎症小体NLRP3在鼻咽癌组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达水平变化及其与患者临床预后的关系。方法:采用实时定量PCR和免疫组化检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽黏膜组织中NLRP3的表达水平。结果:1NLRP3在鼻咽癌组织中表达显著高于正常鼻咽黏膜组织(P<0.05);2在鼻咽癌患者中,NLRP3的表达水平与肿瘤的淋巴结转移以及患者的临床预后有关(P<0.05),NLRP3高表达患者较低表达患者具有更好的局部无复发生存率和无瘤生存率,但与年龄和组织病理类型无明显相关关系(P>0.05)。结论:NLRP3具有提示鼻咽癌肿瘤转移及判断患者预后的价值。     

子宫内膜异位症与血管内皮功能损伤的相关性研究

目的探讨子宫内膜异位症患者血浆不对称二甲基精氨酸(ADMA)和炎症是否与血管内皮功能具有相关性。方法测定了40例子宫内膜异位症患者的血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、IL-6、IL-8、ADMA水平以及肱动脉的血流介导性血管扩张(FMD),并和30例非子宫内膜异位症患者进行比较。结果子宫内膜异位症患者血清中超敏C反应蛋白、IL-6、IL-8、ADMA水平均明显高于对照组(P<0.05),而肱动脉FMD明显低于对照组(P<0.05)。FMD与血清ADMA水平以及hs-CRP水平呈负相关。结论子宫内膜异位症患者的血清ADMA和炎症因子水平增高可能与内皮功能受损相关。     

结缔组织生长因子介导血管紧张素Ⅱ诱导的人肾近端小管细胞肥大机制

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)介导血管紧张素(Ang)Ⅱ致肾小管上皮细胞肥大的可能作用机制。方法用AngⅡ刺激体外培养的人肾近端小管上皮细胞株(HK-2),以流式细胞仪观察抗CTGF抗体(0.5μg/ml)对AngⅡ(10-7mol/L)诱导的细胞周期分布改变的影响。用RT-PCR观察不同浓度AngⅡ(0、10-9、10-7、10-5mol/L)刺激细胞48h,和AngⅡ(10-7mol/L)在不同时间点(0、24、48、72h)时HK-2细胞p27kip1mRNA表达情况;同时观察抗CTGF抗体(0.5μg/ml)对AngⅡ(10-7mol/L)诱导p27kip1mRNA表达变化的影响。用免疫细胞化学法观察抗CTGF抗体(0.5μg/ml)对AngⅡ(10-7mol/L)诱导的细胞p27kip1蛋白表达的影响。结果AngⅡ使G0～G1期细胞百分比明显增加(P<0.01),抗CTGF抗体可显著抑制AngⅡ诱导的细胞周期阻滞(P<0.05)。AngⅡ呈时间和浓度依赖性刺激p27kip1mRNA表达上调(P均<0.05),抗CTGF抗体可以显著抑制AngⅡ诱导的p27kip1mRNA表达的增加(P<0.05),免疫细胞化学显示AngⅡ可显著增加肾小管上皮细胞p27kip1蛋白表达,此作用可被抗CTGF抗体抑制。结论CTGF在AngⅡ诱导HK2细胞肥大中可能发挥重要的作用,其机制可能与抑制细胞表达p27kip1,并逆转细胞增殖周期阻滞有关。     

复方蒂达对乳鼠急性肝细胞损伤的保护作用

目的：探讨复方蒂达对乳鼠急性肝细胞损伤的影响及其作用机制。方法：采用离体肝细胞原代培养技术，以硫代乙酰胺(TAA)复制体外培养SD乳鼠急性肝细胞损伤模型，通过检测三组(正常对照组，损伤组，复方蒂达保护组)培养液中乳酸脱氢酶(LDH)逸出量及四甲基偶氮唑盐(MTT)显色反应，了解肝细胞的损伤和增殖情况，并同时检测了培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO）的含量变化。结果：TAA可使培养液中LDH活性增加．肝细胞增生指数下降，SOD减少，NO增加，应用复方蒂达后可逆转这些改变。结论：复方蒂达不仅对TAA导致的急性肝细胞损伤有明显保护作用，而且具有促进肝细胞再生的作用。     

伊马替尼治疗的慢性髓系白血病患者JARID1B、Hes1和MMP-9基因表达水平差异的研究

目的:探讨JARID1B、Hes1和MMP-9基因表达水平与慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)疾病的病程阶段及伊马替尼(imatinib mesylate,IM)疗效的关系。方法:收集湖北医药学院附属太和医院血液科CML患者25例(慢性期15例、进展期10例)和体检中心正常人15例的外周血标本。按初次确诊为CML患者的病期和服用IM后的疗效分组(有效组和无效组),采用实时定量RT-PCR方法检测JARID1B、Hes1和MMP-9基因mRNA表达水平,分析JARID1B、Hes1和MMP-9基因表达水平差异与疾病阶段及IM疗效的相关性。结果:初次确诊未服用IM慢性期和进展期CML患者Hes1和MMP-9基因的表达水平明显高于正常人(P 0. 05); CML患者慢性期JARID1B基因的表达水平与正常人相比无明显差异(P=0. 20),进展期患者JARID1B的表达水平明显高于正常人(P 0. 05); IM治疗有效组JARID1B和Hes1基因的表达水平与无效组相比无明显差异(P=0. 85、P=0. 82),MMP-9的表达水平有效组明显低于无效组(P 0. 05)。结论:JARID1B、Hes1和MMP-9基因的表达水平与CML的不同病程分期有关; JARID1B、Hes1基因表达水平与IM疗效无关,MMP-9基因表达水平与IM疗效有关。     

神经胶质瘤细胞株H MGA1基因沉默对吉西他滨化疗敏感性的影响

目的探讨神经胶质瘤细胞株SHG-44高迁移率族蛋白A1(HMGA1)基因表达下调后对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法用HMGA1 siRNA慢病毒载体及阴性siRNA慢病毒载体分别转染SHG-44细胞。稳定转染HMGA1 siRNA的细胞为阳性组、稳定转染不含HMGA1的细胞为阴性组,未转染的细胞为对照组。RT-PCR和Western blot检测HMGA1 mRNA和蛋白的表达,MTT法和克隆集落形成实验检测吉西他滨对细胞生长、增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果阳性组HMGA1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性组和对照组(P<0.05)。经吉西他滨处理后,MTT表明阳性组细胞生长抑制率显著高于阴性组,阳性组IC50为(0.279±0.013)μg/ml,明显低于阴性组的(0.746±0.020)μg/ml(P<0.05)。克隆形成实验表明阳性组克隆形成率显著低于阴性组(P<0.05),而细胞凋亡率显著高于阴性组(P<0.05)。结论神经胶质瘤细胞SHG-44中HMGA1基因沉默后,显著增强SHG-44细胞对吉西他滨的化疗敏感性。