40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植妊娠结局分析

目的：探讨40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的妊娠结局，旨在为高龄女性提供生育咨询以及为改善高龄女性个体化辅助生殖治疗结局提供临床依据。方法：选择我院生殖中心2015年1月—2017年12月女方年龄≥40岁且使用自身卵子行体外受精的共2 467个治疗周期资料，对各项临床数据进行回顾性分析。结果：40岁及以上行辅助生殖治疗的患者，随着女性年龄增加获卵数明显减少（40～48岁女性平均获卵数分别为2.97、 2.69、2.17、2.01、1.77、1.61、1.68、1.29和1.00，44～48岁与40～43岁依次组间比较均P＜0.05），尤其是44岁以上女性胚胎发育潜能明显降低（40～48岁囊胚形成率分别为48.90%、43.72%、33.67%、34.29%、24.39%、21.14%、26.32%、16.67%和0%，44～48岁与40～43岁组间依次比较均P＜0.05）。共有518个周期行新鲜胚胎移植，结果显示，随女性年龄增加，临床妊娠率（40～48岁临床妊娠率分别为26.92%、21.15%、20.79%、10.96%、18.87%、11.11%、5.88%、0%和0%，43～48岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05）、种植率（40～48岁种植率分别为23.65%、19.51%、17.70%、8.54%、7.49%、10.81%、5.56%、0%和0%，43～48岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05）和活产率均显著降低（40～46岁活产率分别为18.46%、10.58%、9.90%、5.48%、5.66%、2.78%和5.88%，43～46岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05），43岁以上者结局更差。44岁以上女性自然流产率明显增高（40～45岁流产率分别为31.43%、50.00%、52.38%、50.00%、70.00%和75.00%，44～45岁与40～43岁组间依次比较均P＜0.05）。46岁女性仅1例妊娠并分娩，47岁和48岁女性均无成功妊娠。与抗苗勒管激素（AMH）＞1.0 ng/mL组相比，AMH≤1.0 ng/mL组妊娠率、种植率及活产率均显著下降（27.04% vs. 14.74%，22.99% vs. 13.50%，15.88% vs. 7.37%；均P＜0.05），流产率明显升高（41.27% vs. 50.00%，P＜0.05）。结论：≥40岁高龄女性随年龄增长生育力逐渐降低。40～43岁年龄段女性助孕仍有一定的价值，尤其是卵巢仍有一定储备者（AMH＞1.0 ng/mL），但44岁以上女性原则上不再建议ART助孕，对于46岁以上卵巢功能衰竭的女性强烈建议卵子捐赠或收养。     

JAK2/STAT3通路参与过氧化氢抑制小鼠原代颗粒细胞增殖的研究

目的通过过氧化氢(H2O2)处理体外培养的小鼠原代颗粒细胞(mGC),探讨JAK2/STAT3信号通路在H2O2抑制mGC增殖中的作用。方法应用H2O2、JAK2抑制剂AG490(不同浓度、不同作用时间)处理mGC;用CCK-8、增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)水平检测细胞增殖情况,RT-PCR检测JAK2mRNA水平,Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Cyclin D1的蛋白表达水平。结果 H2O2与AG490均以剂量和时间依赖方式降低mGC活率。750μmol/L的H2O2处理mGC 24h明显降低细胞活率(P0.01),降低PCNA蛋白水平(P0.01),并下调JAK2mRNA和蛋白表达水平(P0.01);80μmol/L的JAK2抑制剂AG490可降低细胞活率(P0.01),且使细胞中的p-JAK2、JAK2、STAT3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1表达均下降(P0.05)。结论 H2O2抑制mGC增殖可能与JAK2/STAT3信号通路有关。     

拮抗剂方案中应用促性腺激素释放激素激动剂诱发卵母细胞成熟后不同黄体支持方案对妊娠结局的影响——一项提前终止的前瞻随机临床对照研究

目的 (1)在促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案中应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)诱发卵母细胞最终成熟后,在黄体支持方案中比较孕激素+人绒毛膜促性腺激素(HCG)和孕激素+雌激素两种不同的黄体支持方案对妊娠结局的影响;(2)在GnRH-ant方案中比较添加高纯度人绝经期促性腺激素(HP-HMG)和添加人重组黄体生成素(rLH)对妊娠结局的影响.方法 前瞻随机对照的临床实验.对照组32例,添加rLH,GnRH-a诱发卵母细胞最终成熟后12h添加1,000 IU、35 h添加500 IU HCG,取卵后应用孕激素;实验Ⅰ组37例,添加HP-HMG,黄体支持方案同对照组;实验Ⅱ组33例,添加HP-HMG,取卵后应用孕激素和雌激素.结果 对照组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组的新鲜周期胚胎移植周期临床妊娠率分别是38.10％、23.08％和8.70％,实验Ⅱ组新鲜周期临床妊娠率明显低于本中心质控标准,该临床实验提前终止.对照组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组未妊娠者已有33例进行了冷冻胚胎移植周期,其临床妊娠率分别为50.00％,63.64％和57.14％.三组均无中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生.结论 拮抗剂方案中应用GnRH-a诱发卵母细胞成熟可以避免中重度OHSS的发生,且不影响胚胎质量.GnRH激动剂诱发卵母细胞成熟对黄体功能和内膜容受性存在不利影响,单纯补充雌孕激素无法替代HCG的作用.     

40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植妊娠结局分析

目的:探讨40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠结局,旨在为高龄女性提供生育咨询以及为改善高龄女性个体化辅助生殖治疗结局提供临床依据。方法:选择我院生殖中心2015年1月—2017年12月女方年龄≥40岁且使用自身卵子行体外受精的共2 467个治疗周期资料,对各项临床数据进行回顾性分析。结果:40岁及以上行辅助生殖治疗的患者,随着女性年龄增加获卵数明显减少(40～48岁女性平均获卵数分别为2.97、2.69、2.17、2.01、1.77、1.61、1.68、1.29和1.00,44～48岁与40～43岁依次组间比较均P0.05),尤其是44岁以上女性胚胎发育潜能明显降低(40～48岁囊胚形成率分别为48.90%、43.72%、33.67%、34.29%、24.39%、21.14%、26.32%、16.67%和0%,44～48岁与40～43岁组间依次比较均P0.05)。共有518个周期行新鲜胚胎移植,结果显示,随女性年龄增加,临床妊娠率(40～48岁临床妊娠率分别为26.92%、21.15%、20.79%、10.96%、18.87%、11.11%、5.88%、0%和0%,43～48岁与40～42岁组间依次比较均P0.05)、种植率(40～48岁种植率分别为23.65%、19.51%、17.70%、8.54%、7.49%、10.81%、5.56%、0%和0%,43～48岁与40～42岁组间依次比较均P0.05)和活产率均显著降低(40～46岁活产率分别为18.46%、10.58%、9.90%、5.48%、5.66%、2.78%和5.88%,43～46岁与40～42岁组间依次比较均P0.05),43岁以上者结局更差。44岁以上女性自然流产率明显增高(40～45岁流产率分别为31.43%、50.00%、52.38%、50.00%、70.00%和75.00%,44～45岁与40～43岁组间依次比较均P0.05)。46岁女性仅1例妊娠并分娩,47岁和48岁女性均无成功妊娠。与抗苗勒管激素(AMH)1.0 ng/mL组相比,AMH≤1.0 ng/mL组妊娠率、种植率及活产率均显著下降(27.04%vs. 14.74%,22.99%vs. 13.50%,15.88%vs. 7.37%;均P0.05),流产率明显升高(41.27%vs. 50.00%,P0.05)。结论:≥40岁高龄女性随年龄增长生育力逐渐降低。40～43岁年龄段女性助孕仍有一定的价值,尤其是卵巢仍有一定储备者(AMH1.0 ng/mL),但44岁以上女性原则上不再建议ART助孕,对于46岁以上卵巢功能衰竭的女性强烈建议卵子捐赠或收养。     

Boule基因在小鼠精子发生过程中的动态表达

目的:研究雄性不育相关基因Boule在小鼠出生后首个精子发生波中的动态表达,探讨Boule在精子发生过程中的调控作用。方法:运用免疫印迹法分析BOULE蛋白在多组织中的表达情况。运用实时荧光定量、免疫组织化学和免疫荧光技术检测Boule m RNA和BOULE蛋白在雄性小鼠出生后首个精子发生波各个时间点中的表达。结果:1免疫印迹法显示BOULE蛋白在睾丸中特异性高表达,在出生后16 d睾丸可被检测到,并在随后的发育中睾丸和成年睾丸持续表达;2实时荧光定量方法证实Boule m RNA在雄鼠出生后14 d睾丸中可被检测到,20 d呈现表达高峰;3免疫组织化学显示在精母细胞及圆形精子细胞胞质中存在BOULE蛋白阳性信号。结论:Boule在精子发生过程中的表达是在发育水平精密调控的,在粗线期精母细胞和圆形精子细胞阶段的特异表达提示Boule可能在精母细胞进程和圆形精子细胞中发挥作用。     

ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程

目的:利用国内医学研究常用ICR品系小鼠,在构建用于研究卵母细胞-卵丘细胞交互作用培养模型的基础上,研究卵母细胞及其产生的旁分泌因子生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)对排卵过程中的关键事件——卵丘扩展的调控作用?方法:通过显微手术制备摘除卵母细胞后的卵丘细胞复合体(OOX),并通过与卵母细胞共培养或GDF9和BMP15 处理研究卵母细胞及其特异释放的旁分泌因子对表皮生长因子(EGF)诱导卵丘扩展过程的调控?结果:成功构建了ICR小鼠OOX培养模型,发现卵母细胞及其释放的旁分泌因子GDF9和BMP15为EGF诱导卵丘扩展所必需?结论:ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程?     

Emx2和Emx2OS在小鼠胚胎生殖嵴中的表达

目的:探讨转录因子Emx2和Emx2反义非编码长链RNA(EMX2 opposite strand/antisense RNA,Emx2OS)在小鼠生殖嵴发育过程中的表达模式以及对原始生殖细胞发育的作用。方法:分别收集孕11.5~14.5 d小鼠的生殖嵴,通过原位杂交、qRT-PCR和免疫荧光方法,观察分析Emx2和Emx2OS在生殖嵴中的表达定位及其表达水平的变化。结果:在孕11.5~14.5 d雌性和雄性小鼠胚胎生殖嵴中均检测到Emx2OS的表达,而且其表达模式与Emx2高度一致;在小鼠胚胎原始生殖细胞减数分裂的启动以及性别决定的时间点(孕12.5 d),雌性胎小鼠生殖嵴中Emx2和Emx2OS的表达量都显著上调(P0.001)。结论:Emx2和Emx2OS在胎小鼠生殖嵴中呈同步表达模式,并可能参与调控原始生殖细胞减数分裂的启动。     

miRNA与胎盘发育的相互功能调控及其在早期复发性流产中的研究进展

<正>微小RNA(miRNA)是一类高度保守的内源性非编码RNA,通过与靶基因的3'-UTR区进行互补配对,在转录后水平通过翻译抑制或者靶基因降解来调节基因表达~([1])。体外研究[2]证实,一些miR NA在调节滋养层细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成中有重要调节功能。在异常妊娠胎盘组织中发现多个miRNA的异常表达。自然流产是妊娠期常见的并发症之一,发病率达10%~15%,其中80%以上的流产发生     

甲型血友病胚胎植入前遗传学诊断成功一例

1临床资 育龄夫妇（女方29岁）因甲型血友病（HaemophiliaA）生育风险，于2011年11月1日到南京医科大学第一附属医院生殖医学科门诊咨询。女方弟弟患有甲型血友病，基因检测发现F8 c.3385 C＞T半合子突变，女方及其母亲为F8 c.3385 C＞T杂合突变携带者，家系图及突变位点见图1。     

促甲状腺激素(TSH)水平对IVF/ICSI妊娠结局的影响

目的:探讨在IVF/ICSI-ET周期中患者基础促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平与临床妊娠结局的关系。方法:回顾性分析第1次行IVF/ICSI-ET不孕患者的促排卵结局与TSH的相关性。结果:①在1 832个IVF/ICSI周期中,TSH与PRL水平呈正相关(r=0.080,P=0.002),而与获卵数、受精卵子数、受精率、可移植胚胎数、优质胚胎数、孕囊与心芽搏动数、种植率、生化妊娠率、流产率、活产率无明显相关性(P>0.05);PRL与获卵数呈正相关(r=-0.050,P=0.032),但不影响后期的受精、可移植胚胎数、优质胚胎数、着床及后期的生化妊娠率、临床妊娠率及活产率。控制PRL后对TSH本身与获卵数行相关性分析,结果两者间无相关性(r=0.004,P=0.874)。②分别比较不同TSH界值下高于界值与低于界值组的获卵数、受精卵子数、受精率、可移植胚胎数、优质胚胎数、孕囊与心芽搏动数、种植率的情况,结果界值上、下组间实验室及临床相关指标无明显差异。但当TSH界值分别为2.7 mIU/L、3.3 mIU/L、3.9 mIU/L时,低、高组间的活产率分别为83.1%和81.0%,82.3%和78.9%,83.9%和70.3%,流产率分别为16.1%和19.0%,17.7%和21.1%,16.1%和19.7%,虽未达到统计学差异,但低水平TSH组的流产率较高水平TSH组相对较低,活产率较高,并随着界值的增大,界值上、下组间的活产率与流产率差距增大。结论:在0.3~4.2 mIU/L区间,TSH水平对于IVF/ICSI-ET的妊娠结局无明显影响。当基础TSH水平>2.7 mIU/L时,流产率有上升趋势,活产率有下降趋势,需对孕妇孕期情况进行密切随访。