40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植妊娠结局分析

目的：探讨40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的妊娠结局，旨在为高龄女性提供生育咨询以及为改善高龄女性个体化辅助生殖治疗结局提供临床依据。方法：选择我院生殖中心2015年1月—2017年12月女方年龄≥40岁且使用自身卵子行体外受精的共2 467个治疗周期资料，对各项临床数据进行回顾性分析。结果：40岁及以上行辅助生殖治疗的患者，随着女性年龄增加获卵数明显减少（40～48岁女性平均获卵数分别为2.97、 2.69、2.17、2.01、1.77、1.61、1.68、1.29和1.00，44～48岁与40～43岁依次组间比较均P＜0.05），尤其是44岁以上女性胚胎发育潜能明显降低（40～48岁囊胚形成率分别为48.90%、43.72%、33.67%、34.29%、24.39%、21.14%、26.32%、16.67%和0%，44～48岁与40～43岁组间依次比较均P＜0.05）。共有518个周期行新鲜胚胎移植，结果显示，随女性年龄增加，临床妊娠率（40～48岁临床妊娠率分别为26.92%、21.15%、20.79%、10.96%、18.87%、11.11%、5.88%、0%和0%，43～48岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05）、种植率（40～48岁种植率分别为23.65%、19.51%、17.70%、8.54%、7.49%、10.81%、5.56%、0%和0%，43～48岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05）和活产率均显著降低（40～46岁活产率分别为18.46%、10.58%、9.90%、5.48%、5.66%、2.78%和5.88%，43～46岁与40～42岁组间依次比较均P＜0.05），43岁以上者结局更差。44岁以上女性自然流产率明显增高（40～45岁流产率分别为31.43%、50.00%、52.38%、50.00%、70.00%和75.00%，44～45岁与40～43岁组间依次比较均P＜0.05）。46岁女性仅1例妊娠并分娩，47岁和48岁女性均无成功妊娠。与抗苗勒管激素（AMH）＞1.0 ng/mL组相比，AMH≤1.0 ng/mL组妊娠率、种植率及活产率均显著下降（27.04% vs. 14.74%，22.99% vs. 13.50%，15.88% vs. 7.37%；均P＜0.05），流产率明显升高（41.27% vs. 50.00%，P＜0.05）。结论：≥40岁高龄女性随年龄增长生育力逐渐降低。40～43岁年龄段女性助孕仍有一定的价值，尤其是卵巢仍有一定储备者（AMH＞1.0 ng/mL），但44岁以上女性原则上不再建议ART助孕，对于46岁以上卵巢功能衰竭的女性强烈建议卵子捐赠或收养。     

排卵后卵母细胞老化的研究进展

卵母细胞老化与许多不良因素有关,氧化应激和线粒体功能紊乱等均致其质量低下,影响进一步发育。作为卵母细胞老化的一种类型,排卵后卵母细胞老化（POA）在体外培养时较为常见,可造成卵母细胞质量下降、胚胎发育不良,导致妊娠率下降和出生缺陷增加。氧化应激是POA过程中的重要触发因素,可激活细胞凋亡通路,影响卵母细胞质量和胚胎发育潜能。现就近年来有关POA的影响因素、与氧化应激的相互作用关系以及使用不同抗氧化剂延缓POA的发生等方面研究进行综述。     

JAK2/STAT3通路参与过氧化氢抑制小鼠原代颗粒细胞增殖的研究

目的通过过氧化氢(H2O2)处理体外培养的小鼠原代颗粒细胞(mGC),探讨JAK2/STAT3信号通路在H2O2抑制mGC增殖中的作用。方法应用H2O2、JAK2抑制剂AG490(不同浓度、不同作用时间)处理mGC;用CCK-8、增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)水平检测细胞增殖情况,RT-PCR检测JAK2mRNA水平,Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Cyclin D1的蛋白表达水平。结果 H2O2与AG490均以剂量和时间依赖方式降低mGC活率。750μmol/L的H2O2处理mGC 24h明显降低细胞活率(P0.01),降低PCNA蛋白水平(P0.01),并下调JAK2mRNA和蛋白表达水平(P0.01);80μmol/L的JAK2抑制剂AG490可降低细胞活率(P0.01),且使细胞中的p-JAK2、JAK2、STAT3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1表达均下降(P0.05)。结论 H2O2抑制mGC增殖可能与JAK2/STAT3信号通路有关。     

排卵后卵母细胞老化的研究进展

卵母细胞老化与许多不良因素有关,氧化应激和线粒体功能紊乱等均致其质量低下,影响进一步发育。作为卵母细胞老化的一种类型,排卵后卵母细胞老化(POA)在体外培养时较为常见,可造成卵母细胞质量下降、胚胎发育不良,导致妊娠率下降和出生缺陷增加。氧化应激是POA过程中的重要触发因素,可激活细胞凋亡通路,影响卵母细胞质量和胚胎发育潜能。现就近年来有关POA的影响因素、与氧化应激的相互作用关系以及使用不同抗氧化剂延缓POA的发生等方面研究进行综述。     

miRNA与胎盘发育的相互功能调控及其在早期复发性流产中的研究进展

<正>微小RNA(miRNA)是一类高度保守的内源性非编码RNA,通过与靶基因的3'-UTR区进行互补配对,在转录后水平通过翻译抑制或者靶基因降解来调节基因表达~([1])。体外研究[2]证实,一些miR NA在调节滋养层细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成中有重要调节功能。在异常妊娠胎盘组织中发现多个miRNA的异常表达。自然流产是妊娠期常见的并发症之一,发病率达10%~15%,其中80%以上的流产发生     

甲型血友病胚胎植入前遗传学诊断成功一例

1临床资 育龄夫妇（女方29岁）因甲型血友病（HaemophiliaA）生育风险，于2011年11月1日到南京医科大学第一附属医院生殖医学科门诊咨询。女方弟弟患有甲型血友病，基因检测发现F8 c.3385 C＞T半合子突变，女方及其母亲为F8 c.3385 C＞T杂合突变携带者，家系图及突变位点见图1。     

拮抗剂方案中应用促性腺激素释放激素激动剂诱发卵母细胞成熟后不同黄体支持方案对妊娠结局的影响——一项提前终止的前瞻随机临床对照研究

目的 (1)在促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案中应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)诱发卵母细胞最终成熟后,在黄体支持方案中比较孕激素+人绒毛膜促性腺激素(HCG)和孕激素+雌激素两种不同的黄体支持方案对妊娠结局的影响;(2)在GnRH-ant方案中比较添加高纯度人绝经期促性腺激素(HP-HMG)和添加人重组黄体生成素(rLH)对妊娠结局的影响.方法 前瞻随机对照的临床实验.对照组32例,添加rLH,GnRH-a诱发卵母细胞最终成熟后12h添加1,000 IU、35 h添加500 IU HCG,取卵后应用孕激素;实验Ⅰ组37例,添加HP-HMG,黄体支持方案同对照组;实验Ⅱ组33例,添加HP-HMG,取卵后应用孕激素和雌激素.结果 对照组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组的新鲜周期胚胎移植周期临床妊娠率分别是38.10％、23.08％和8.70％,实验Ⅱ组新鲜周期临床妊娠率明显低于本中心质控标准,该临床实验提前终止.对照组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组未妊娠者已有33例进行了冷冻胚胎移植周期,其临床妊娠率分别为50.00％,63.64％和57.14％.三组均无中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生.结论 拮抗剂方案中应用GnRH-a诱发卵母细胞成熟可以避免中重度OHSS的发生,且不影响胚胎质量.GnRH激动剂诱发卵母细胞成熟对黄体功能和内膜容受性存在不利影响,单纯补充雌孕激素无法替代HCG的作用.     

异种嵌合体的前世今生与未来

在发育生物学中,嵌合体是指在同一个个体中,由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混合状态。如果细胞来自不同的物种,所组成的个体就被称为异种嵌合体,也称为种间嵌合体。如果细胞来自同一物种,则称为同种嵌合体,也叫种内嵌合体。本文着眼于异种嵌合体,首先介绍了异种嵌合体的起源,随后就不同干细胞来源的异种嵌合体的发展和形成异种嵌合体的关键因素进行了深入分析,并对异种嵌合体在研究领域的应用和临床发展前景进行了展望。     

雷帕霉素对肥胖小鼠卵巢功能的影响

目的：研究雷帕霉素对母源性肥胖导致的卵巢功能异常的干预作用以及药物的安全性评估。方法：建立一种高脂饮食的雌性肥胖小鼠模型,然后随机分为注射雷帕霉素的处理组和注射PBS的对照组,24周后统计其排卵数目,收集卵母细胞进行纺锤体免疫荧光染色,以评估雷帕霉素对肥胖小鼠排卵功能及卵母细胞质量的影响,并通过蛋白免疫印迹分析和RT?qPCR分析检测卵巢相关基因在蛋白和mRNA表达水平的变化。结果：雷帕霉素处理的肥胖小鼠体重下降,其卵巢磷酸化核糖体蛋白（phosphorylated ribosomal protein 6,P?rps6）和磷酸化起始因子4E结合蛋白（phosphorylated 4E binding protein 1,P?4EBP1）的表达明显降低,且超排的卵母细胞数目与对照相比有增加趋势,但卵母细胞纺锤体染色结果显示卵母细胞质量无明显差异;处理后的卵巢肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorα,TNF?α）的mRNA表达水平增加;血清中雌激素和促卵泡激素都无明显变化。结论：雷帕霉素有改善排卵功能的趋势,尚未发现对卵母细胞质量有明显影响,为未来研究雷帕霉素对肥胖女性生育力的影响提供了实验基础。     

分化抑制因子Id3对雌性生育能力的研究

目的：通过构建ID3-Gdf9-Cre+的条件性敲除小鼠对雌性小鼠的表型进行研究,从而进一步确定分化抑制因子Id3对雌性生育能力的影响。方法：我们利用配繁出的ID3-Gdf9-Cre+的条件性敲除小鼠,通过HE染色、卵泡计数条件性敲除小鼠卵巢中的卵泡发育的情况进行检测,通过卵母细胞体外成熟实验和体外超排实验对卵母细胞的体外成熟进行检测,通过交配实验对生育力进行检测。结果：通过RT-pcr、WB的结果显示出我们成功在卵母细胞中对ID3进行了敲除;对3W、8W小鼠卵巢进行HE染色并对各级卵泡进行计数,结果表明条敲小鼠中各级卵泡发育正常;通过卵母细胞体外成熟以及体外超排实验显示了条敲小鼠中卵母细胞体外成熟正常;结论：在正常饲养条件下,条件性敲除ID3不影响正常卵泡的发育以及雌性小鼠的生育力。