人精子染色体异常的检测

对人精子染色体的研究,可以推测父方染色体异常的情况。通过用人精子和仓鼠卵融合的方法对人精子的核型进行分析及用特殊染色体DNA探针进行荧光原位杂交(FISH)可以对人精子染色体进行研究。两种方法的研究显示人精子中每一条染色体成为双体的机率接近0.1％,而全部染色体是非整倍体的机率约5％～6％。精子染色体中整倍体的分布并不均匀一致,核型分析和FISH分析结果均表明:21号染色体和性染色体成为非整倍体的机率均明显升高。在睾丸癌患者化疗前和化疗后2～13年间,其精子核型分析结果显示染色体数量和结构异常的机率在化疗前后无明显差异。同样对精子中1号、12号、X和Y染色体进行FISH分析,显示它们双体的机率在治疗前后也无显著差异。在不育男性精子中1号、12号、XX、YY和XY染色体进行了FISH分析,显示1号、13号、21号和XY染色体双体的机率比对照组有显著升高。     

男性特发性不育症与DAZ基因关系的探讨

目的探讨特发性无精子症和严重少精子症与DAZ基因的关系及意义.方法应用PCR技术对50例无精子症和严重少精子症患者(其中无精子症38例,严重少精子症12例)的外周血细胞进行DAZ基因检测.结果 50例中发现6例(12%)有DAZ基因微缺失(其中无精子症4例,占8%;严重少精子症2例,占4%);SRY基因PCR扩增均为阳性.50例已有生育的正常男性均无DAZ及SRY的微缺失.结论 DAZ为无精子因子(AZF)的重要候选成分,DAZ微缺失可能是引起无精子和严重少精子并造成男性不育的重要原因之一.     

基因芯片技术及其在医学中的应用

基因芯片是在承载基片上,通过微加工技术构建不同的基因片段阵列。基因芯片可用于杂交测序、基因突变检测、RNA表达分析及基因诊断和基因治疗的设计。综述基因芯片的种类、作用原理、在医学中的应用及其发展趋势。     

功能基因组学和蛋白质组学在生殖医学研究中的应用

后基因组时代,或者称为功能基因时代,是基因组研究的收获时代,研究重点已经从揭示生命的所有遗传信息转向整体水平上对生物功能的研究.第一个转向标志就是产生了"功能基因组学"学科,它采用了生物芯片(Biochip)、微阵列制样(Microarry)等新技术,对成千上万的基因表达进行分析和比较,力图从基因组整体水平上对基因的活动规律进行阐述.但是由于生物功能的体现者是蛋白质,仅仅从基因的角度来研究是远远不够的,因此在人类基因组计划和功能基因组学研究基础上,产生了一门在整体水平上研究细胞内蛋白质的组成及其活动规律的新兴学科--蛋白质组学(Proteomocs).     

2例46,XX性发育睾丸疾病报道并文献复习

目的:探讨46,XX性发育睾丸疾病患者的表型、病因病机及其分子生物学特点。方法:对2例46,XX性发育睾丸疾病患者进行病史采集,盆腔B超扫描,染色体核型分析,PCR扩增法检测SRY、YRRM1、DYS240、DAZ基因。结果:两例患者均表现为小睾丸,无精子,第二性征较差。盆腔B超探查未发现女性内生殖器官。两患者染色体核型均为46,XX,且SRY(+),其中1例YRRM1(+)。结论:对性发育异常患者进行染色体核型分析和SRY基因检测,有利于了解该类患者的遗传学病因,为明确诊断和治疗提供科学依据。     

基因芯片技术在药物筛选中的应用

基因芯片是在承载基片上,通过微加工技术构建不同的基因片段阵列,可用于比较正常/病变组织或药物作用前后基因表达的变化,从而发现疾病相关基因作为药物靶标;亦可确立病原体,指导临床药物治疗。目前已用于感染性疾病和抗生素抗性基因的筛选、肿瘤药物靶标的确立、内分泌激素药物筛选及毒理学方面的研究。综述了基因芯片和药物筛选的概念、在药物筛选中的应用及其发展趋势。     

二维电泳及质谱法分离和鉴定胰腺癌差异表达蛋白质

目的 通过分离并鉴定胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织的差异表达蛋白质,发现可能用于早期诊断的胰腺癌肿瘤标志物.方法 用双向电泳分离胰腺癌、癌旁和人正常胰腺组织的总蛋白质.对胰腺癌组织中明显差异表达的蛋白点,行质谱鉴定和生物信息学分析.并对鉴定出的部分蛋白质行免疫印迹验证.结果 建立了稳定、重复性好的凝胶蛋白图谱.对分离出的在胰腺癌组织中明显差异表达的20个蛋白点,成功鉴定出11个蛋白点,其中高表达的有6个,包括:galectin-1、SLP-2、sorcin、3BP-2、BB1和NCC27.Galectin-1和SLP-2在胰腺癌组织中的高表达通过免疫印迹得到验证.结论 胰腺癌组织相对于癌旁、正常胰腺组织蛋白存在明显的表达差异.胰腺癌差异表达蛋白质可能成为用于早期诊断和评价预后的胰腺癌标志物.     

基因芯片技术在药物筛选中的应用

基因芯片是在承载基片上,通过微加工技术构建不同的基因片段阵列,可用于比较正常/病变组织或药物作用前后基因表达的变化,从而发现疾病相关基因作为药物靶标;亦可确立病原体,指导临床药物治疗.目前已用于感染性疾病和抗生素抗性基因的筛选、肿瘤药物靶标的确立、内分泌激素药物筛选及毒理学方面的研究.综述了基因芯片和药物筛选的概念、在药物筛选中的应用及其发展趋势.     

表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定

目的：构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞，以探讨其生物学功能。方法：将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中，构建重组质粒PET28a-hUBL，转化BL2l菌，以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小鼠，获得多克隆抗体。重组蛋白用Westernblot鉴定。将hUBL基因克隆到逆转录病毒质粒中并转染293T细胞，用免疫组化染色法鉴定hUBL基因的表达。结果：hUBL在大肠杆菌中获得高效表达，并纯化了hUBL—PET28a的融合蛋白，以此为抗原制备了高效价的抗hUBL蛋白的小鼠多克隆抗体。免疫组化染色表明，hUBL重组逆转录质粒可在293T细胞中高效表达hUBL蛋白。结论：成功地构建了hUBL重组逆转录病毒载体，使得其在293T细胞中表达，获得稳定表达的细胞株。     

人胚胎干细胞研究进展

人体的发生过程为:精子和卵子受精,形成合子,合子卵裂成卵裂球,于受精后72 h形成桑椹胚,并于受精后5～7 d成为囊胚。囊胚由滋养层和内细胞群组成,滋养层将分化成胎盘及胎儿附属结构;内细胞群则再分化为内胚层、中胚层和外胚层。内胚层分化发育成胎儿的消化道、呼吸道上皮和腺体、肝、胆、胰;中胚层发育分化成胎儿的结缔组织、血液、肌肉、骨骼、泌尿生殖系统;外胚层则分化发育成胎儿的体表结构和神经系统。1 干细胞的基本概念1.1 定义干细胞为具有自我复制能力、在一定条件下能够分化成各种功能细胞的细胞。1.2 分类1.2.1 全能干细胞 包…