逆转录病毒介导IL－2基因导入肝癌细胞的研究

利用逆转录病毒载体系统ＰＡ３１７／ＬＮＣ－ＩＬ－２所产生的含有ＩＬ－２基因及新霉素抗性基因（ｎｅｏｒ）的重组病毒，经共培养转染ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株。ＩＬ－２基因受巨细胞病毒早期启动子调控，转染后的细胞置于含新霉素类毒性药物Ｇ４１８（４００ｕｇ／ｍｌ）培养基内培养、筛选３０天，结果果转染率约为１～２％。对存活下来的转染有ＩＬ－２基因和新霉素抗性基因的细胞形态和生长情况进行观察，同时从水平及蛋白质水平对外源性基因的转录和翻译进行检测。结果表明：ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞在ＩＬ－２基因转染前后形态及生长情况无明显变化；培养上清活性检测发现转染后为转染前的２０～３０倍；逆转录ＰＣＲ分析显示转染后的ＩＬ－２ｍＲＮＡ量明显高于转染前。研究表明我们已成功地将ＩＬ－２基因导入肝癌细胞并获得持续、稳定、高效表达。     

miRNA在2型糖尿病胰腺中的表达

目的 探讨糖尿病胰腺组织miRNA的表达变化.方法 链脲佐菌素(STZ)40 mg/kg腹腔注射+高脂高糖饲料喂饲健康雄性SD大鼠,成模(测血糖≥16.7 mmol/L)后4周,取胰腺组织常规抽提总RNA,采用含有2340种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 模型组miRNA表达谱中异常表达(2倍以上)的miRNA共有37个.其中,17个表达上调,20个表达下调.结论 在大鼠糖尿病模型中,部分胰腺miRNA的表达发生明显变化,提示miRNA可能参与糖尿病诱发的调节作用.     

雷米普利对2型糖尿病大鼠microRNA表达谱的影响

目的:建立链脲霉素(streptozocin,STZ)+高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,并以血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)药物雷米普利处理,筛查用雷米普利后2型糖尿病大鼠胰腺组织microRNA(miRNA)表达的变化,并进行实时定量PCR验证芯片结果,寻找与2型糖尿病功能改善相关的miRNA?方法:STZ(40 mg/kg)腹腔注射+高脂高糖饲料喂饲健康雄性SD大鼠,测随机血糖≥16.7 mmol/L成模后1周,雷米普利50 mg/(kg·d)灌胃28 d?实验结束后,取胰腺组织常规抽提总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达谱的改变?结果:2型糖尿病大鼠经雷米普利处理后,miRNA表达谱中出现明显差异表达(1.5倍以上)的miRNA共有27个,其中20个表达上调,7个表达下调?结论:在2型糖尿病大鼠模型中,用雷米普利处理后部分胰腺miRNA的表达发生明显变化,提示miR-1?miR-30c可能参与胰腺功能改善的调节?     

Study of gene expression profile in type 2 diabetes mellitus

目的 筛查胰腺组织基因mRNA的表达变化,寻找与2型糖尿病(T2DM)发生相关的基因.方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,10只)和糖尿病模型组(B组,20只).链脲菌素(STZ)40mg/kg联合高糖高脂饮食诱导T2DM大鼠模型,取胰腺组织常规提取总RNA,采用基因芯片检测系统进行mRNA表达谱差异分析,用实时定量PCR验证,并进行生物信息学的分析.结果 基因芯片共检测出237个基因mRNA差异表达;其中,B组有17个基因发生了3倍以上的明显差异表达(上调12个,下调5个);生物信息学分析发现,差异表达基因涉及通路共9条.结论 在大鼠糖尿病模型中,胰淀粉酶(Amy)1、Amy2、Amy3、聚-1-精氨酸酞酰胺(Pap2)、胰腺再生蛋白3α(Reg3a)等基因的表达均发生明显变化,提示其可能与糖尿病的发生密切相关.     

2型糖尿病相关基因表达谱的研究

目的筛查胰腺组织基因mRNA的表达变化,寻找与2型糖尿病(T2DM)发生相关的基因。方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,10只)和糖尿病模型组(B组,20只)。链脲菌素(STZ)40mg/kg联合高糖高脂饮食诱导T2DM大鼠模型,取胰腺组织常规提取总RNA,采用基因芯片检测系统进行mRNA表达谱差异分析,用实时定量PCR验证,并进行生物信息学的分析。结果基因芯片共检测出237个基因mRNA差异表达;其中,B组有17个基因发生了3倍以上的明显差异表达(上调12个,下调5个);生物信息学分析发现,差异表达基因涉及通路共9条。结论在大鼠糖尿病模型中,胰淀粉酶(Amy)1、Amy2、Amy3、聚-l-精氨酸酞酰胺(Pap2)、胰腺再生蛋白3α(Reg3a)等基因的表达均发生明显变化,提示其可能与糖尿病的发生密切相关。