反相高效液相色谱法测定槐米中槲皮素的含量

中药槐米为豆科植物槐Sophora japonica L的干燥花蕾，具有清热止血的功效，用于血热所致的各种出血症。槐米的成分十分复杂，主要有效成分是芦丁和槲皮素等黄酮类生物活性物质。槲皮素具有抗炎、抗氧化、抗过敏、抗菌、抗病毒等多方面的药理作用，其对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。槲皮素是芦丁的甙元。因此分析测定槐米中黄酮类化合物含量时，一般先通过酸水解方法，使芦丁转化成槲皮素。槲皮素的高效液相色谱测定方法已有文献报道，但槲皮素的提取方法为中国药典(2000版，第一卷)记录的甲醇提取法，而且提取与酸水解同时进行，提取率低，溶剂使用量大，因此提取成本高，且会造成环境污染。本实验利用芦丁在沸水与冷水中的溶解度不同，先提取槐米中的芦丁，然后再将其酸水解为槲皮素．大大提高了提取率，为槐米中药制剂开发研制提供了一种新技术。     

TEA敏感型钾电流在gp120引起的海马神经元损伤中的作用

目的:探讨gp120对TEA敏感型钾电流的作用以及该电流在gp120引起神经元损伤中的作用。方法 :分离怀孕18d SD大鼠胎鼠的海马神经元作为实验对象,分为对照组和gp120处理组,利用全细胞膜片钳的方法记录外向延迟钾电流的变化,通过MTT和TUNEL的方法分别观察gp120处理后神经元的活力和凋亡情况。Western blot观察Kv2.1钾通道的蛋白表达变化以及在TEA敏感型钾电流中的贡献度。结果:gp120能引起外向钾电流明显增大,具有浓度依赖性,其中TEA敏感型成分参与了外向钾电流的增大。此外,MTT和TUNEL实验发现,gp120能引起神经元活力的下降和凋亡,而钾通道抑制剂TEA能缓解由gp120引起的细胞损伤。进一步实验表明,gp120可上调TEA敏感型成分中Kv2.1钾通道的表达,且其特异性抑制剂Gx TX-1E能显著抑制神经元中TEA敏感型钾电流成分。结论:TEA敏感型钾电流参与了gp120引起的神经元损伤过程,其重要组成成分Kv2.1通道蛋白上调,提示该通道蛋白可能参与了gp120引起的细胞损伤。