盐酸多奈哌齐对慢性低灌注大鼠认知功能的改变

目的 观察盐酸多奈哌齐对慢性低灌注大鼠P300各波潜伏期的影响并探讨其意义。方法 对双侧颈总动脉结扎后的大鼠采用盐酸多奈哌齐连续治疗6w，再将其水迷宫及P300的测定结果与正常组、低灌注组及盐水治疗组大鼠相比较。结果 低灌注组大鼠与正常组大鼠相比，水迷宫完成时间显著延长，错误次数显著增多，P300各波潜伏期也显著延长；但经盐酸多奈哌齐治疗后的低灌注大鼠，虽然与正常组大鼠仍有差异，但其水迷宫试验及P300各波的潜伏期均显著优于模型组大鼠，盐水治疗组大鼠则无此改变。结论 慢性低灌注能明显影响大鼠的认知功能，盐酸多奈哌齐对慢性低灌注所造成的认知功能损伤有肯定的预防和治疗作用。     

以直立性低血压为主要表现的Shy-Drager综合征42例分析

目的:探讨Shy-Drager综合征的临床表现,以便早期诊断治疗.方法:回顾性分析经临床诊断的42例Shy-Drager综合征患者的相关资料.结果:Shy-Drager综合征患者临床以直立性低血压、睡眠呼吸暂停综合征、鼾症、便秘最常见.结论:Shy-Drager综合征临床以自主神经功能障碍为主要表现,综合性治疗能够改善患者症状,提高生活质量.     

人14-3-3γ基因的腺病毒载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的:构建携带人14-3-3 γ基因的重组腺病毒表达载体并确定其对PC12细胞的感染效率.方法:采用PCR方法,从Top10/pHis-14-3-3 γ质粒中扩增14-3-3 γ DNA序列,将14-3-3 γ基因定向克隆到穿梭质粒载体pAdTrack-CMV,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1载体同源重组后得到携带...     

脑源性神经营养因子基因多态性与散发性帕金森病的相关性

背景：脑源性神经营养因子对多巴胺能神经元具有特殊保护作用，而帕金森病的主要病理改变是黑质致密部多巴胺能神经元的变性和丢失。帕金森病的发生可能与脑源性神经营养因子基因多态性有关。目的：探讨中国人群中脑源性神经营养因子基因多态性与散发性帕金森病的相关性，以期为该病的一级康复预防提供遗传学数据。设计：以散发性帕金森病患者DNA为研究对象，以社区健康人群DNA为对照，探索性基础研究。单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科，华中科技大学人类基因组中心。对象：以武汉协和医院神经内科提供85例散发性帕金森病患者(研究组，均为汉族，居在华中地区长期居住)DNA和华中科技大学人类基因组中心提供的健康人(对照组，均为汉族，居在华中地区长期居住)DNA为研究对象。方法：采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析方法，对健康人和散发性帕金森病患者进行基因分型。主要观察指标：检测两组G196A和C270T多态性位点的基因型及等位基因。结果：研究组和对照组G196A多态性位点均以G／A基因型为主，频率分别为50．6％和52．0％；C270T多态性位点均为C／C基因型。两组间脑源性神经营养因子基因G196A和C270T多态性位点各基因型和等位基因频率差异均无显著性(P&;gt;0．05)。结论：中国华中地区汉族人群中脑源性神经营养因子基因多态性与散发性帕金森病发病无明显关系。     

可溶性CD40基因修饰树突状细胞对实验动物淋巴细胞增殖及胞毒活性的影响

目的探讨可溶性CD40-增强绿色荧光蛋白C(sCD40-EGFP)修饰树突状细胞(DC)对实验动物免疫功能的影响,为利用DC诱导供体特异性移植免疫耐受提供实验依据。方法应用基因工程技术构建CD40胞外区与EGFP重组载体质粒pEGFP-N1/sCD40,采用脂质体转染法,将其导入DC2.4细胞株。采用荧光分光光度计和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定转染质粒pEGFP-N1/sCD40的DC培养上清;将经未修饰DC细胞及sCD40-EGFP及空载体修饰DC经腹腔注射致敏Balb/c小鼠,取单个核细胞作为反应细胞,分别以不同组DC为刺激细胞,行混合淋巴细胞培养,采用MTS比色法检测细胞增殖,乳酸脱氢酶法测定细胞毒活性。结果sCD40分子与EGFP融合基因载体构建成功,在树突状细胞中获得表达,并分泌至上清;sCD40-EGFP融合蛋白对不同组DC致敏或未致敏小鼠的同种细胞刺激的增殖反应均有明显的抑制作用,sCD40-EGFP基因修饰DC诱导不同DC致敏组小鼠淋巴细胞增殖反应均明显降低,sCD40-EGFP融合蛋白对各实验组淋巴细胞胞毒活性有显著的抑制作用,sCD40-EGFP基因修饰DC致敏组小鼠淋巴细胞胞毒活性较其余实验组明显降低。结论稳定表达sCD40-EGFP融合蛋自的DC致敏可显著降低同种小鼠淋巴细胞的增殖反应,并能诱导淋巴细胞对靶细胞的胞毒活性降低。     

磁敏感成像检测帕金森病脑内铁沉积的研究

目的 比较帕金森病 (Parkinson disease,PD)患者和健康对照者多个脑结构的相位偏移值,探讨其诊断PD的价值.方法 30例PD患者及30名年龄相匹配的健康对照者均在1.5 T MR系统中进行头部检查.采用磁敏感成像(susceptibility-weighted imaging,SWI)获得相位图,测量双侧尾状核、壳核、黑质致密带(substantia nigra pars compacta,SNc )、黑质网状带(substantia nigra pars reticulata,SNr)、红核、脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)、额叶白质(frontal grey matter,FWM)及额叶皮质(frontal white matter,FGM)感兴趣区的相位偏移值.结果 PD组SNc、尾状核、红核的相位偏移值均数较健康对照组明显降低(P＜0.05),两组间SNr、壳核、CSF、 FWM、FGM的相位偏移值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过测定PD患者脑感兴趣区相位偏移值可估测其脑内铁沉积.     

新发病重症肌无力患者外周血IL-18、TGFβ-1水平与糖皮质激素疗效的研究

目的探讨糖皮质激素（GC）对新发病重症肌无力（MG）患者外周血白介素18（IL-18）、转化生长因子β-1（TGFβ-1）水平及临床疗效的影响。方法采用ELISA法检测26例新发病重症肌无力患者GC治疗前、治疗2月后和30名健康对照组血清IL-18、TGFβ-1水平,肌无力严重程度和临床疗效判定采用临床绝对和相对记分法。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平均高于健康对照组（P〈0.05）;GC治疗2月后MG患者IL-18水平显著下降（t=8.92,P〈0.01）,TGFβ-1水平升高（t=-6.66,P〈0.05）;GC治疗前后预后差的全身型MG患者IL-18水平始终高于预后好的眼肌型MG患者（P〈0.05）,MG患者IL-18、TGFβ-1变化值与临床相对评分无明显相关性（r=0.301、r=-0.386,P〉0.05）。结论 GC可通过抑制IL-18、提高TGFβ-1血清分泌水平而有效调节MG患者细胞免疫功能。     

叶酸在缺血/再灌注损伤中的作用

叶酸是B族维生素的一种,本身不具有生物活性,叶酸在肝脏转换成二氢叶酸再转变为四氢叶酸并具有生物活性[1].同型半胱胺酸并不是从食物中获得的,而是甲硫氨酸经代谢得到的.缺乏维生素B6、叶酸和B12可导致高同型半胱胺酸血症.高同型半胱胺酸血症的患者发生血栓形成和心脑血管疾病的概率相比正常人群更高[2].叶酸在缺血/再灌注的多个环节中起保护作用,该文将通过高同型半胱胺酸血症、核因子κB（nuclear factorκB,NF-κB）激活以及内皮一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）解联合等环节阐述叶酸缺乏可促进缺血/再灌注损伤.     

转化生长因子β1促进骨髓间充质干细胞Snail表达的信号转导通路

目的 探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-Akt信号转导通路在转化生长因子β1(TGF-β1)引起骨髓间充质干细胞(BMSCs)Snail表达改变中的调控作用. 方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠BMSCs,用免疫荧光法对培养第3代的细胞进行鉴定.应用Western blotting检测TGF-β1对p-ERK1/2及p-Akt表达的影响,以不同浓度ERK特异性抑制剂(PD98059)或PI3K通路特异性抑制剂(Wortmannin)干预后检测BMSCs ERK、Akt磷酸化水平变化,确定PD98059和Wortmannin分别抑制Snail诱导的BMSCs ERK和Akt磷酸化的有效浓度,进而用RT-PCR、Western blotting技术证实TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的影响. 结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠BMSCs,免疫荧光检测显示,培养的细胞CD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性;Western blotting分析显示,TGF-β1作用6h后BMSCs p-Akt和p-ERK水平较对照组明显增高;Wortmannin和PD98059可分别以剂量依赖性抑制BMSCs p-Akt和p-ERK水平;可有效抑制TGF-β1诱导的BMSCs ERK及Akt的磷酸化,PD98059和Wortmannin相应浓度分别为30 μmol/L和40 nmol/L.PD98059(30 μmol/L)、Wortmannin(40 nmol/L)明显抑制了TGF-β1诱导的Snail mRNA及蛋白水平,而两者联合应用对骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的抑制作用具有协同作用,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 TGF-β1能促进BMSCs的Snail的转录及蛋白的表达,且ERK1/2及PI3K转导通路的激活在此过程中具有调控作用.     

采用量子点标记的寡核苷酸探针检测ApoEε4等位基因

目的 探讨新型纳米荧光材料量子点标记的寡核苷酸探针在确定基因型中的应用价值.方法 采用以CdSe 为核心的量子点与 ApoEε4基因的等位基因特异性寡核苷酸反应合成探针.对 ApoEε4-PT7-PL 质粒和正常人标本进行 Southern blot检测,并与地高辛标记方法作相应比较.结果 量子点与地高辛标记显影结果完全一致.结论 量子点在 Southern blot 检测成像中表现出优良特性,可望替代传统标记物.