高速逆流色谱法分离制备厚朴中magnoloside A

目的采用高速逆流色谱(HSCCC)法分离制备厚朴中magnoloside A。方法考察溶剂系统、转速、体积流量、温度、进样量对分离效果的影响,HPLC、NMR法对分离产物进行纯度检验和结构鉴定。结果最佳条件为两相溶剂系统乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水(1∶1∶0. 2∶2),上相固定相,下相流动相;转速850 r/min;流动相体积流量3 m L/min;温度45℃;进样量1 000 mg,粗提物中分离得到magnoloside A 121. 9 mg,纯度为95. 8%,回收率为81. 7%。结论该方法简便快速,回收率高,可用于分离制备厚朴中magnoloside A。     

以多糖为主要部位的6种腰痛宁衍生方对巨噬细胞中炎症因子表达及软骨细胞增殖的影响

目的以腰痛宁胶囊组方药材有效部位为基础,考察6种以多糖活性部位为主的腰痛宁衍生方的细胞药理活性,为风湿骨病处方候选药物筛选提供依据。方法分别以甘草多糖、苍术多糖、川牛膝多糖、麻黄多糖、淫羊藿多糖、桑寄生多糖为主要部位(组方中比例50%)组成6种腰痛宁衍生方,酶联免疫方法测定脂多糖(LPS)诱导的Ana-1细胞中前列腺素E_2(PGE_2)及Ana-1细胞中自细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,CCK8法检测软骨细胞增殖活性。采用半数抑制浓度(IC_(50))及半数有效浓度(EC_(50))评价各样品的活性,通过比较各组方实验EC_(50)/IC_(50)与其理论叠加值的差异,分析样品中活性部位间的相互作用。结果 6个腰痛宁衍生方中,以桑寄生多糖或淫羊藿多糖为主的2个组方抑制LPS诱导的Ana-l细胞分泌PGE2、促进Arna-I细胞分泌IL-6、IL-1β及TNF-α及促进软骨细胞增殖的活性显著弱于腰痛宁全方,其余由腰痛宁处方药材多糖为主的4个组方的相关活性优于腰痛宁全方或与腰痛宁全方相当,无统计学差异。其中川牛膝多糖占50%的组方在抑制LPS诱导的Ana-1细胞分泌PGE2、促进Ana-1细胞分泌IL-6、IL-1β及促进IL-1β诱导的软骨细胞增殖方面均具有良好效果。结论以川牛膝多糖为主的腰痛宁衍生方具有良好的细胞抗炎、免疫调节和促进软骨细胞增殖活性,可作为风湿骨病处方中多糖的优选部位。     

中药酸味的药性表达及在临证配伍中的应用

对中药五味中"酸"味的概念、功效内涵、来源以及与药性理论的内在联系进行了归纳。阐述应用电子舌仿生技术及化学分析手段进行酸味物质基础研究的思路和模式,提出酸味的表征方式及其物质基础拆分的研究方法,并总结了酸味中药的临床应用与配伍规律,为酸味药性的表达及临床合理应用提供研究思路和理论依据。     

5种黄酮有效部位的不同组方的细胞抗炎、免疫与骨细胞修复活性的比较

目的:以腰痛宁中生物碱加黄酮有效部位拆方为基础比较不同中药黄酮有效部位对细胞抗炎、免疫及骨细胞修复的影响,为风湿骨病处方候选药物筛选有效部位提供依据。方法:在腰痛宁马钱子、麻黄生物碱基础上,分别加入50%的甘草黄酮、淫羊藿黄酮、红花黄酮、骨碎补黄酮、桑寄生黄酮以及5种黄酮的等比例混合物,得到6个有效部位组方。采用半数有效浓度(EC50)或半数抑制浓度(IC50)评价各样品对巨噬Ana-1细胞分泌白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症因子的促进作用;对脂多糖(LPS)诱导的Ana-1细胞释放前列腺素E2(PGE2)的抑制作用;对IL-1β诱导的软骨细胞增殖的影响。同时采用最小二乘优化方法,计算各样品的EC50或IC50叠加值,根据EC50或IC50叠加值与实验值之间的差异分析各有效部位间的相互作用关系。结果:骨碎补黄酮为主的组方促进IL-1β分泌的活性最强;红花黄酮为主的组方促进IL-6分泌的活性最强且其他活性仅次于最佳的组方;由马钱子、麻黄生物碱+5种黄酮混合物构成的组方抑制PGE2分泌及促进TNF-α分泌、促进软骨细胞增殖的活性最强,且各模型下该组方中有效部位间有极强的协同作用。促软骨细胞增殖模型下,单一黄酮有效部位与生物碱构成的组方中的有效部位之间均表现出较强的拮抗作用。结论:不同药材黄酮之间有出色的协同增效作用,红花黄酮、骨碎补黄酮及各药材黄酮混合物具有良好的抗炎、免疫及骨细胞修复等综合药理活性,提示红花黄酮、骨碎补黄酮及不同药材黄酮混合物可作为风湿骨病药物的优选有效部位。     

临床研究规范性对腰痛宁胶囊循证医学分析结果的影响

目的:探讨临床研究规范性对腰痛宁胶囊疗效评价的影响,为合理、规范地开展临床研究提供方向。方法:计算机检索中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、万方数据库,收集腰痛宁胶囊治疗风湿骨病的随机对照试验(RCT),提取资料并进行质量评价后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析,比较辩证情况、疗程、服药方式对腰痛宁胶囊疗效评价的影响,在此基础上提出综合反映临床规范性的指标——循证值概念,并考察其对腰痛宁胶囊疗效评价结果的影响。结果:共纳入71项RCT,合计11 009例患者。Meta分析结果显示,辩证情况下腰痛宁胶囊的疗效优于其他药物(P=0.02),非辩证情况下腰痛宁胶囊的疗效劣于其他药物(P<0.01);疗程≤30 d时,腰痛宁胶囊的疗效劣于其他药物(P<0.05),疗程>30 d时,腰痛宁胶囊的疗效与其他药物无统计学差异(P=0.99);不按说明书服药时,腰痛宁胶囊的疗效劣于其他药物(P<0.05),按说明书服药时,腰痛宁胶囊的疗效与其他药物无统计学差异(P=0.94)。循证值≥5时,腰痛宁胶囊的疗效好于其他药物(P=0.03);循证值=4时,腰痛宁胶囊的疗效与其他药物无统计学差异(P=0.56);循证值≤3时,腰痛宁胶囊的疗效劣于其他药物(P<0.05)。结论:严格按照辩证医治的原则和规律,按疗程及说明书服用药物,是腰痛宁胶囊发挥疗效的重要保证;临床应严格按照药品说明书规范试验,以保证临床研究结果客观、公正。     

丹参中丹酚酸A转化方法

目的研究丹参中丹酚酸A的转化方法。方法考察提取溶剂种类、加热温度、加热时间、提取溶剂p H、液料比与离子强度等因素对丹酚酸B转化为丹酚酸A的影响,并确定最佳转化条件。结果最佳转化条件为以磷酸缓冲液(p H 6.0)为提取溶剂;液料比为12∶1;在140℃下加热4 h。25 g丹参中丹酚酸A的摩尔转化率为53.7%。结论该方法准确有效,可直接从丹参药材中通过降解丹酚酸B制备丹酚酸A。     

加热与常温渗漉-层析提取工艺对丹参水提物的影响

分别采用渗漉层析耦合和不同温度下加热提取工艺,从同一批丹参中提取水溶性成分丹酚酸,并采用高效液相色谱分析产物,研究提取工艺和温度对丹参水提物中丹酚酸B的含量、提取率及产物色谱谱图的影响。结果表明,用渗漉层析耦合工艺得到的丹参水提物中的丹酚酸B含量最高且小分子酚酸类化合物很少;采用加热提取工艺时小分子酚酸类化合物种类及含量随温度（60~100 ℃）的升高而增加,丹酚酸B含量及提取率随提取温度的升高呈现由高到低又增高的规律、两者在100 ℃时达到最大值。研究表明应根据对丹参水提物及其制剂的质量与安全性要求选择合适的工艺及工艺条件。     

新型“超级细菌”特性及其抗菌药研究进展

2010年8月英国医学期刊《柳叶刀传染病》杂志报道,在印度、巴基斯坦发现新型"超级细菌",随后,欧洲和亚洲也相继报道了感染病例,且传播全球。最近,在细菌群体中出现耐药基因的传播,从而再度引起了科学家们的密切关注。文章综述了新型"超级细菌"的特性,受其感染的临床用药及新抗菌药物的研究开发进展。新抗菌药物的开发将为新型"超级细菌"感染的治疗开拓广阔的前景。     

板蓝根多糖的系统分离纯化与组成分析

目的建立板蓝根多糖的系统分离纯化方法,并对分离得到的均一多糖进行组成测定。方法以抗病毒活性较好的80%醇沉板蓝根粗多糖为研究对象,对其进行DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、Sephacryl-200葡聚糖凝胶柱色谱以及高效凝胶色谱系统分离纯化。分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)和邻苯二甲醛(OPA)衍生化HPLC法对分离得到的板蓝根均一多糖进行单糖组成和氨基酸组成测定。结果利用系统分离纯化策略,从80%醇沉板蓝根粗多糖中分离得到2种均一板蓝根多糖(IRPS1A和IRPS1B)和2种均一板蓝根糖蛋白(IRPS2A和IRPS3A)。其中,IRPS1A与IRPS1B的单糖组成均为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;IRPS2A的单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;IRPS3A的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。糖蛋白IRPS2A与IRPS3A均含有天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸,共14种氨基酸残基。同时,IRPS2A还含有酪氨酸残基。结论该系统分离纯化的策略可应用于板蓝根均一多糖(糖蛋白)的获取,为板蓝根多糖的结构分析及药理活性研究奠定基础。     

扶正化瘀方抗大鼠肝纤维化疗效的代谢组学研究

目的利用代谢组学方法,评价扶正化瘀方(丹参、桃仁、松花粉等)对大鼠肝纤维化的治疗效果,并探索其可能的机制。方法将SD大鼠随机分成正常对照组(n=6)、二甲基亚硝胺(DMN)诱导肝纤维化模型组(n=6)及扶正化瘀方给药组(n=6),采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UHPLC-TOF-MS)技术对大鼠血清进行分析,所得数据采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)进行模式识别处理。结果正常组和模型组大鼠的血清代谢轮廓存在显著差异,而给药组在空间投影上呈现出"偏离模型组且接近正常组"的趋势。根据变量重要性投影值(VIP),筛选出19种相关代谢标志物。结论验证了扶正化瘀方对大鼠肝纤维化的治疗效果,其潜在机制可能与修复体内异常的脂质和氨基酸代谢有关。