基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立

目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。     

前庭刺激对人脑事件相关电位的影响

目的本研究采用事件相关电位(ERPs)技术探讨前庭刺激对人脑加工功能的影响。方法选取15名健康男子进行实验。实验中受试者坐于转椅上,在下述条件下完成视觉操作任务:(1)实验测试,(2)对照测试,同时记录原始脑电资料。结果前庭刺激后,结果显示CPZ和PZ位置得到的差异波振幅均可见有显著性的改变,在前庭刺激后均明显减小。结论前庭刺激对人体的其他功能产生了明显影响,受试者在对视觉信号的感知时,特别是对需要选择的信号,明显产生了抑制现象。     

Professor Jiping ZHAO's experiences in the differentiation and treatment of peripheral facial paralysis with acupuncture

Professor Jiping ZHAO has unique thoughts on the diagnosis and treatment of peripheral facial paralysis.She pays the great attention to clinical differentiation in treatment with acupuncture, especially meridian differentiation. She believes that the differentiation of lesion is core and the early judgment is critical for the better therapeutic effects on intractable facial paralysis. The local acupoints are selected in the guide of the theory of meridian sinew and stimulated on the base of three-needling theory. The distal acupoints are decided in light of the syndrome differentiation, of which, Hégǔ(合谷 LI 4), Zúsānlǐ(足三里ST 36) and Taichōng(太冲 LR 3) are the basic acupoints. Additionally, Professor ZHAO lays the emphasis on the 5 th branch of facial nerve(cervical branch) in diagnosis and treatment.     

三维超声在产前胎儿神经系统畸形中的诊断价值分析

目的分析三维超声在诊断产前胎儿神经系统畸形中的作用。方法回顾性分析2011-04—2013-02经我院超声检查诊断为产前胎儿神经系统畸形患者84例的临床资料,结合超声检查与病理结果探讨三维超声在产前胎儿神经系统畸形中的价值。结果 84例产前胎儿神经系统畸形中,脑积水25例(29.75%),无脑、露脑23例(27.38%),脊柱裂17例(20.24%),脑膜膨出6例(7.14%),前脑无裂(全前脑)畸形1例(1.19%),脉络丛囊肿7例(8.33%);胼胝体发育不全4例(4.76%),蛛网膜囊肿1例(1.19%)。所有畸形胎儿产后磁共振诊断核实三维检测结果与三维超声诊断结果一致,即三维超声检测准确率100%。结论三维超声检查质量高,漏检率低,在胎儿神经系统畸形临床诊断中可大力推广。     

误诊为肺癌的三例肺硬化性血管瘤临床分析

目的探讨肺硬化性血管瘤(pulmonary sclerosing hemangioma,PSH)的临床特点及误诊原因。方法回顾分析我院收治的3例误诊为肺癌的PSH患者的临床资料。结果3例PSH患者中男1例、女2例,年龄40、66、59岁,2例为体检时发现肺部肿物,1例因咳嗽就诊行胸部CT检查发现肺结节。术前均临床诊断为肺癌且行胸腔镜下肺叶切除术,术后病理明确诊断为PSH。3例随访至今均健在且无术后并发症。结论PSH临床少见,术前易误诊为恶性肿瘤,需术后病理确诊。临床医生要提高对PSH的警惕性,熟知其影像学特点,拓宽诊断思维,以提高对PSH的认识,从而避免或减少误诊。     

骨形成蛋白-2、成纤维细胞生长因子-2对大鼠触须毛乳头细胞增殖和毛发诱导能力的影响

目的探讨骨形成蛋白-2(BMP-2),成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)单独及联合作用对毛乳头细胞增殖和毛发诱导能力的影响。方法采用显微机械法分离大鼠触须毛乳头并培养,行免疫荧光鉴定。CCK-8法检测毛乳头细胞的增殖活性。毛发诱导能力通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性确定。采用ELISA法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的含量。结果毛乳头细胞的ALP免疫荧光染色阳性,确定培养的细胞是毛乳头细胞。BMP-2对毛乳头细胞增殖无影响,但可提高毛乳头细胞的ALP活性并呈剂量依赖性。FGF-2促进毛乳头细胞增殖,但会降低毛乳头细胞的ALP活性并呈剂量依赖性。联合BMP-2和FGF-2既可以促进毛乳头细胞的增殖,又可以增强ALP活性,并呈时间依赖性。BMP-2可上调毛乳头细胞培养上清液中IGF-1的含量,并呈剂量依赖性。结论 BMP-2可能通过促进毛乳头细胞分泌IGF-1以保持毛乳头细胞的毛发诱导能力,按适当浓度比例联合BMP-2和FGF-2可形成互补作用,既促进毛乳头细胞的增殖,又可以保持其毛发诱导能力。     

局部麻醉下腹膜前无张力疝修补术治疗老年腹股沟疝109例

目的探讨局部麻醉下腹膜前无张力疝修补术在老年腹股沟疝患者中的临床应用。方法回顾性分析2011年1月至2014年10月北京市垂杨柳医院在局部麻醉下行腹膜前无张力疝修补术的109例老年腹股沟疝患者临床资料,分析手术时间、术中麻醉效果、术后并发症、手术费用、平均住院时间和术后随访情况。结果本组患者均顺利完成手术,术中麻醉效果良好,单侧手术时间平均52 min,术后未出现尿潴留,术后随访2~36个月,2例患者出现阴囊浆液肿和血肿,1例出现切口感染。患者平均住院时间为2.6 d,平均住院费用为4 318元。有2例患者复发。结论局部麻醉下腹膜前无张力疝修补术安全可靠,麻醉效果好,手术适应证广,术后并发症少,恢复快,住院时间短且具有良好的效价比,适用于老年患者。