苦参碱和川芎嗪抑制白血病细胞侵袭转移作用的实验研究

目的探讨苦参碱及川芎嗪对低氧(3%O2)培养条件下人B淋巴细胞白血病细胞株Raji细胞、人慢性髓系白血病细胞株K562细胞侵袭转移的抑制作用及机制。方法体外常规培养细胞,低氧环境下继续培养24 h后,分别加入终浓度为0、0.15、0.2、0.25 g/L苦参碱或0、0.1、0.15、0.2 g/L川芎嗪处理,以常氧培养不加药物的细胞为对照组,分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力,并以RT-PCR方法检测HIF-1α、VEGF mRNA的表达。结果低氧环境下Raji细胞和K562细胞的黏附、迁移和侵袭能力,以及HIF-1α、VEGF mRNA的表达均较常氧对照组显著增强(P<0.01)。0.15、0.2、0.25 g/L苦参碱均有效抑制低氧环境下Raji细胞的黏附、迁移和侵袭能力,并下调HIF-1α、VEGF mRNA的表达(P<0.05)。0.2、0.25 g/L苦参碱均有效抑制低氧环境下K562细胞的黏附、迁移和侵袭能力并下调HIF-1α、VEGF mRNA的表达(P<0.05)。0.1、0.15、0.2 g/L川芎嗪均有效抑制Raji细胞、K562细胞的黏附、迁移和侵袭能力,并下调HIF-1α、VEGF mRNA的表达(P<0.05),均呈剂量依赖性。结论苦参碱和川芎嗪能有效抑制低氧环境下Raji细胞和K562细胞黏附、迁移和侵袭能力,其作用机制可能通过下调细胞内HIF-1αmRNA的表达,从而减少VEGF mRNA的生成来实现。     

Ⅰ期改良Pe(n)a术治疗新生儿中高位先天性肛门直肠畸形

目的 探讨Ⅰ期改良Pe(n)a术治疗新生儿中高位先天性肛门直肠畸形的临床可行性及有效性.方法对48例先天性肛门直肠畸形的新生儿行Ⅰ期Pe(n)a术,其中31例进行2个月至4年4个月随访,对临床及随访资料进行回顾性分析.结果术后1例因肺部感染加重出现呼吸循环衰竭死亡,2例切口部分裂开,余恢复良好.31例坚持随访2个月至4年4个月,3例便秘,3例稀便时污粪,1例用力时污粪,2例直肠黏膜脱垂,1例切口感染,1例肛门狭窄(未坚持扩肛所致).无完全大便失禁、瘘管复发、尿潴留等并发症出现.17例中高位肛门直肠畸形术后行肛门直肠测压检查,有3例存在RAIR.结论Ⅰ期Pe(n)a术治疗先天性肛门直肠畸形,术后肛门功能良好,早中期疗效满意,Ⅰ期Pe(n)a术是一种创伤小、花费少、美观、简洁的手术方式.     

胃镜检查对儿童过敏性紫癜的早期诊断价值研究

目的　探讨儿童过敏性紫癜（HSP）胃镜下黏膜病变特点及胃镜检查在其早期诊断中的价值。方法　回顾性分析2009年1月至2010年5月重庆医科大学附属儿童医院79例HSP患儿的胃镜结果。结果　HSP胃镜表现为胃肠道黏膜弥漫性充血水肿,广泛多发糜烂、溃疡、出血,尤其是黏膜类似于皮肤紫癜改变的出血点比较特异;胃镜检查发现病变沿上消化道越深入越明显,尤以十二指肠降部病变程度最严重;胃镜检查深入到达空肠输入端1例。结论　典型的胃镜下表现有助于HSP的早期诊断,尤其是无皮疹的HSP;胃镜检查可以明确胃肠道病变程度,指导临床治疗;在儿童HSP的早期诊断中,胃镜检查深入到空肠输入端十分必要。     

HGF/c-Met轴介导EPCs治疗大鼠HPAH的初步实验研究

目的：探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）/c-Met轴介导内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）移植入低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary artery hypertension,HPAH）大鼠对大鼠的肺动脉压力和肺血管重构的影响。方法：构建HPAH模型大鼠;大鼠骨髓原代EPCs提取、培养和鉴定;构建c-Met腺病毒并转染EPCs;将大鼠分为c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组,每组10只。前2组大鼠通过尾静脉分别输注c-Met-EPCs细胞和EPCs细胞,后2组大鼠输注生理盐水;饲养一周后检测平均肺动脉压力（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）和右心室肥大指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）;透射电镜检测肺动脉超微结构改变,肺组织病理切片观察肺小动脉改变;ELISA法测定血清内皮素-1（endothelin-1,ET-1）含量,Griess法测定血清一氧化氮（nitric oxide,NO）含量。结果：c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组4组大鼠的mPAP值分别为（23.17±3.07）、（30.85±3.15）、（33.55±5.47）、（20.30±1.99） mmHg;RVHI值分别为（32.48±2.38）%、（37.54±4.42）%、（38.53±2.81）%、（26.05±3.05）%;血清ET-1值分别为（69.45±6.32）、（95.76±7.31）、（99.14±8.39）、（62.35±6.06） ng/L;血清NO值分别为（99.63±11.40）、（56.07±3.32）、（48.83±6.56）、（125.50±12.26） μmol/L。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的mPAP、RVHI和血清ET-1含量明显高于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显降低（P<0.05）。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的血清NO含量明显低于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显升高（P<0.05）。透射电镜显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀、内皮细胞中断不连续,而c-Met-EPCs细胞肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀不显著。肺组织病理切片显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺血管重构明显,而c-Met-EPCs细胞组肺血管重构减轻。结论：HGF/c-Met轴介导内皮祖细胞移植入低氧性肺动脉高压大鼠后可明显降低肺动脉压力和和改善肺血管重构,其机制可能与抑制ET-1释放和促进NO产生有关。     

股骨锁定加压钢板（LCP）在儿童股骨转子下骨折中的应用

目的：探讨股骨锁定加压钢板（LCP）对儿童股骨转子下骨折的临床疗效。方法回顾性分析本院2010年2月至2012年12月收治的22例股骨转子下骨折患儿临床资料,其中男16例,女6例,平均年龄8．5岁。结果22例均获得随访,随访时间6～48个月,平均27个月,22例均骨性愈合,无断钉、脱钉、钢板松动、断板及髋内翻、关节活动障碍等并发症发生。结论股骨锁定加压钢板（LCP）对于儿童股骨转子下骨折可以有效改善传统保守牵引、克式针、弹性髓内钉固定及其他治疗方法的不足,可早期进行功能锻炼,减少关节僵直,效果良好。     

基于危重新生儿协作网中重庆5家三级甲等医院危重新生儿数据分析

目的 基于危重新生儿协作网（简称数据库）的数据,反映危重新生儿的诊治现状,为提高诊疗水平提供帮助。方法 数据库上报小早产儿、新生儿败血症、坏死性小肠结肠炎(NEC)、有创和无创机械通气治疗时间≥4 h的新生儿,且在上报医院住院时间≥24 h。根据上述4种疾病情况,设置一般信息、围生期情况、动脉导管未闭、神经系统、早产儿视网膜病变、氧气支持或呼吸机治疗、新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）、感染、炎性指标、抗感染治疗、NEC、转归11个模块用于分析,协作医院均安排专人负责数据的收集及录入和审核,并行统一培训。结果 2013年1月至2014年9月数据库纳入重庆5家三级甲等协作医院1 501例危重新生儿,小早产儿435例(29.0%),新生儿败血症814例(542%),NEC 343例(228%),有创和无创机械通气治疗时间≥4 h新生儿742例(494%),总体存活率为752%(1 129/1 501)。出生体重＜750 g、~999 g、~1 249 g、~1 499 g、≥1 500 g小早产儿存活率分别为500%（3/6）、565%（13/23）、654%（53/81）、749%（131/175）和820%（123/150）; ＜27、27~、28~、29~、30~、31~和≥32孕周的小早产儿存活率分别为231%（3/13）、650%（13/20）、694%（26/36）、712%（52/73）、718%（61/85）、809%（89/110）和816%（80/98）。315例（724%）小早产儿行头颅B超检查,其中生后3 d内完成检查占 453%（197例）。264（607%)使用机械通气,163例有创机械通气,101例单纯nCPAP。217例（499%）小早产儿发生NRDS。165/217例(760%)使用PS。74/813例（91%）使用碳青霉烯类抗生素时间>2周,预防与非预防使用碳青霉烯类抗生素存活率分别为889% (16/18),875%(42/48),差异无统计学意义（χ2=0024,P=1000）。数据库上报的1 501例病例中NEC 343例（229%）,174例在腹胀10 d内能做出NEC诊断,313例行腹部X线片检查,仅有44例描述具有确诊意义的X线征象（肠壁积气、肠穿孔和肝门积气）。742例（494%）接受机械通气治疗,单纯无创机械通气180例,有创机械通气562例,无创机械通气和有创机械通气总体并发症发生率分别为11%（2/180）和174%（98/562）。结论 危重新生儿协作网对了解和提高中国危重新生儿诊疗水平有积极的探索性意义。危重新生儿诊治在3 d内行头颅B超检查、无创通气和践行气管插管-使用PS-拔管使用CPAP技术等方面需要进一步加强。     

没食子酸抑制人神经母细胞瘤增殖作用的实验研究

目的研究没食子酸抑制小鼠模型中人神经母细胞瘤增殖的作用以及对化疗药物的协同作用。方法建立人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株免疫活性C57BL/6j小鼠移植瘤模型,随机分配成4组,每组10只:①PBS荷瘤对照组,按PBS0.5ml/只,腹腔注射,作为阴性对照;②没食子酸组,按250mg/kg,1次/2d给药,连续2周;③环磷酰胺组,按75mg/kg给药,每周2次,连续2周,作为阳性对照;④没食子酸+环磷酰胺组,没食子酸在环磷酰胺给药前24h给药,没食子酸与环磷酰胺独立给药,剂量和时间同前。药物均9:00腹腔注射给药,每周监测相对肿瘤体积(RTV),治疗时间共2周,次日处死小鼠,称体质量和瘤质量(Wt)、计算抑瘤率(IR),BrdU标记检测移植瘤细胞增殖。结果没食子酸组、环磷酰胺组、没食子酸+环磷酰胺组在2周的移植瘤瘤质量分别为(4559.0±677.7)、(2117.0±749.6)、(637.7±319.6)mg,平均抑瘤率分别为36.94%、70.72%、91.18%,与PBS组比较差异有显著性(P<0.01),没食子酸+环磷酰胺组瘤质量与环磷酰胺组比较差异有显著性(P<0.01)。各给药组肿瘤增殖指数分别为0.1229±0.0219、0.1076±0.0156、0.0413±0.0130,与PBS组肿瘤增殖指数(0.2308±0.0759)比较差异有显著性(P<0.01),同时没食子酸+环磷酰胺组与没食子酸组或环磷酰胺组比较差异有显著性(P<0.01)。结论没食子酸具有抑制人神经母细胞移植瘤增殖、协同环磷酰胺抗肿瘤生长的作用。     

支气管肺发育不良合并肺动脉高压危险因素的Logistic回归分析

目的:探讨支气管肺发育不良(BPD)合并肺动脉高压(PH)的危险因素?方法:收集2010年1月~2014年6月深圳市儿童医院新生儿重症监护病房收治的胎龄<32周的新生儿180例,依据BPD诊断标准,诊断为BPD 130例,8例先心病?13例持续肺动脉高压及9例先天性膈疝被剔出实验,余下100例分为轻度BPD 30例,中度BPD 44例,重度BPD 26例?在出生后2个月对纳入实验的100例BPD患儿行心脏超声检查,PH的诊断依据心脏超声诊断分为PH组或非PH组?对两组患儿的临床特征和结果进行回顾性分析?通过多因素Logistic回归分析BPD患儿并发PH的危险因素?结果:①轻度BPD合并PH比例低,中重度BPD合并PH比例较高,所有BPD患儿合并PH的比例为32.0%;②BPD患儿合并PH组及不合并PH组临床指标比较,5 min Apagar评分≤6分?羊水过少?急性呼吸窘迫综合征?36周后仍需氧?绒毛膜羊膜炎两组间有统计学差异;③Logistic回归分析显示,5 min Apgar评分≤6分[RR=8.13,95% CI:2.48~26.62]?羊水过少[RR=16.69,95%CI:4.43~62.85]是PH的危险因素,提示低5 min Apgar评分≤6分?羊水过少为PH发生的独立危险因素?结论:5 min Apagar评分≤6分和羊水过少是BPD合并PH的危险因素?     

钙视网膜蛋白在肠无神经节细胞症诊断中的应用

目的分析钙视网膜蛋白在小儿肠无神经节细胞症诊断中的应用意义。方法回顾性分析本院自2011年1月1日至2014年12月31日收治的确诊小儿肠无神经节细胞症、肠神经节细胞发育异常症患儿术前直肠黏膜活检标本中钙视网膜蛋白的表达情况和HE染色结果、根治术或造瘘术后病变段钙视网膜蛋白表达情况和病理检查HE染色结果。结果①肠无神经节细胞症中术前直肠黏膜活检检查钙视网膜蛋白的表达在所有病例中阴性表达11 1/114例,HE染色未见神经节细胞112/114例;根治手术后痉挛段肠壁中钙视网膜蛋白均呈阴性表达133/133例,HE染色未见神经节细胞133/133例,而在扩张段的肠壁中钙视网膜蛋白的表达均呈阳性表达133/133例,HE染色可见发育正常的神经节细胞133/133例;②肠神经节细胞发育异常症中术前直肠粘膜活检钙视网膜蛋白表达阴性4/4例,HE染色见到发育不良神经节细胞1/4例,其余3例均未见到神经节细胞;根治术或造瘘术后病变段钙视网膜蛋白表达阳性42/42例,HE染色见到神经节细胞发育异常或减少42/42例。结论钙视网膜蛋白染色可以作为肠无神经节细胞症的诊断依据之一,但仍然有假阳性及假阴性结果可能,特别是在术前直肠粘膜活检的应用中。