间充质干细胞在肿瘤靶向递药系统中的应用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层,属于多能干细胞,由于其具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低、肿瘤部位趋向性、取材方便、易于工业化制备等特征,有可能成为最具临床应用前景的多能干细胞。本文介绍间充质干细胞的基本特性以及其在肿瘤靶向递药系统中的研究进展、临床应用现状,为间充质干细胞在肿瘤靶向递药系统中的进一步研究提供依据。     

色谱技术在药物定性分析应用中的研究进展

色谱分析是1种利用混合物中组分在两相间的分配以获得分离的分析方法.综述HPLC法、指纹图谱法以及其他分析技术在药物定性分析中应用的文献资料,讨论了应色谱技术的进步对未来药物、生物样品分析的意义,并对其应用的研究进展作一分析.     

血管内皮生长因子靶向抗肿瘤药物的研究与开发

血管内皮生长因子（VEGF）家族在肿瘤血管生成与转移中起关键作用，从不同途径阻断VEGF的生物学作用可以达到治疗肿瘤的目的。目前以VEGF及其受体为靶标研究开发了抗体、可溶性受体、酪氨酸激酶抑制剂、核酸和多肽类药物，均取得了较好的进展。     

维生素C混菌发酵中地衣芽胞杆菌对氧化葡萄糖酸杆菌伴生活性的研究

对维生素C混菌发酵中地衣芽胞杆菌的伴生活性进行了研究。分别对单独培养、混合培养条件下地衣芽胞杆菌的生长特性进行分析,并以氧化葡萄糖酸杆菌的生长密度、产酸量为指标,考察地衣芽胞杆菌胞外液的伴生活性以及蛋白酶抑制剂对活性的影响。结果表明,活性物质在地衣芽胞杆菌对数生长期阶段合成并释放至胞外,使胞外液上清对氧化葡萄糖酸杆菌的生长和产酸产生促进作用。随着伴生菌培养时间的延长,其胞外上清活性也逐渐提高,18 h胞外液活性达到最高。蛋白酶抑制剂（苯甲基磺酰氟,PMSF）对胞外液活性并没有表现出抑制作用,可能没有参与伴生过程。     

胰高血糖素样肽1及其类似物的研究进展

2型糖尿病（T2DM）是世界范围内日益严重威胁人类健康的疾病，全球T2DM患者已经超过1.5亿，预计到2025年T2DM患者将增加1倍。T2DM患者的传统治疗模式一般是遵循饮食控制、口服抗糖尿病药物和外源性胰岛素的阶梯式治疗。但目前多数治疗方法很少能理想地控制血糖水平，而且还存在一些副作用和限制，例如现有的各类非胰岛素类抗糖尿病药物的主要缺陷是不能完全控制糖化血红蛋白（HbA1c）的水平，多数T2DM患者最终将出现胰岛β细胞功能的严重衰退而需要进行胰岛素治疗，而基于胰岛素的治疗方法并不适用于复杂的激素分泌不规律的患者，例如T2DM特征性的胰高血糖素的高分泌。     

P40家族成员及其在自身免疫性疾病中的作用

作为P40家族中研究最为广泛的细胞因子,白细胞介素-12(Interleukin-12)其最显著的特点是有助于Th1细胞分化,参与由Th1细胞所介导的免疫性疾病。而白细胞介素-23(Interleukin-23)与Th17细胞增殖有关,最新发现Th17介导的免疫反应在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和多发性硬化症(MS)疾病方面发挥重要作用,并且其分化途径的提出对传统的Th1/Th2细胞免疫也带来了新的挑战[1]。该家族的另外两个成员P40单体和P40同源二聚体也参与免疫调控,实验证明P40分子不仅在细胞内感染及炎症过程中起着重要的调节作用,而且与银屑病、多发性硬化症、Crohn’s病等多种自身免疫性临床疾病的发病密切相关。     

叶酸受体α与卵巢肿瘤

卵巢肿瘤的死亡率为妇科肿瘤之首,积极探索早期卵巢癌的筛查方法和新型治疗药物,对降低死亡率具有重要意义。叶酸受体α(FRα),对叶酸具有高度亲和性。在生理情况下,叶酸受体α仅低度表达于少数正常组织细胞,而在多种人类上皮源性肿瘤中,尤其是卵巢肿瘤中,都可以检测到高水平表达的叶酸受体α。卵巢上皮癌中有90%以上可见叶酸受体α的高表达,其在卵巢肿瘤中的表达水平可高于正常10～100倍。更为重要的是,叶酸受体α在早期卵巢肿瘤中有很高的阳性率。叶酸受体α为一种极具潜力的卵巢癌相关性的肿瘤抗原,可以作为卵巢肿瘤早期诊断标志物,以及卵巢肿瘤被动免疫治疗的靶点。     

毕赤酵母菌分泌表达重组抑肽酶的高密度发酵工艺研究

目的:对毕赤酵母高密度表达重组抑肽酶的发酵工艺进行探讨。方法:先通过摇瓶培养方法,确定表达抑肽酶的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需的最佳配方。在此基础上,采用分批补料培养方法,对毕赤酵母pSA/GS115进行高密度发酵。紫外吸收法测定重组抑肽酶竞争性抑制胰蛋白酶对底物BAEE的水解活性。结果:BSM培养基中毕赤酵母生长必需的最佳配方为甘油40 g.L-1、氨水单次补加量0.1%、甲醇流加量1%。经过毕赤酵母高密度发酵,发酵液上清中蛋白的表达量为37.08 mg.L-1,目的蛋白活性达到4 450 BAEEU.ml-1,比摇瓶培养表达提高了8倍。结论:本发酵工艺可实现酵母工程菌的高密度表达发酵,其发酵产物具有较高的生物活性,为下一步大规模化制备抑肽酶奠定了基础。     

微柱凝胶法和凝聚胺法在维持性血透患者交叉配血中的应用分析

目的:比较首次输血和多次输血后不规则抗体检测的阳性率,探讨微柱凝胶法(microcolumn gel test,MGT)和凝聚胺法(manual polybrene test,MPT)在维持性血透患者交叉配血中的应用价值。方法:采用MGT和MPT对需输血的96例维持性血透患者进行交叉配血试验。结果:96例血透患者462例次交叉配血中,MGT法和MPT法配血相合差异有统计学意义(P<0.01)。其中MGT主侧次侧凝集62例直接抗人球蛋白试验全部阳性。并且随着输血的次数增加,MGT和MPT不规则抗体的阳性率均增加(P<0.01)。MGT检测总阳性率高于MPT(P<0.01)。结论:维持性血透患者长期、多次输血后,会出现抗体的不规则性。在MGT中致敏红细胞会导致配血困难。结合MPT进一步了解凝集的性质,可以提高输血的安全性。在MGT交叉配血次侧阳性的情况下,同时做MPT交叉配血具有很好的互补性。     

两种β2m重组质粒的构建及其表达与纯化

目的 获得大量有活性的人胆β2m重组蛋白，为构建HLA与抗原肽的复合体及HLA四聚体作准备。方法 采用RT-PCR克隆法构建重组质粒，于BL21（DE3）菌中原核表达后，经金属螯合亲和层析纯化，BCA Protein Assay Kit测定蛋白含量，应用SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况及Westem blot分析重组抗原的活性。结果 成功地构建了两种融合表达载体PET-22b/β2m及PET-28a/β2m，两者的表达量分别为5-10mg/L，40-80mg/L，纯度均为95％。结论 通过比较，确定了β2m最佳表达载体系统及表达条件，为研究轻链在原核系统中表达、纯化以及构建HLA复合体，探讨免疫识别机制奠定了基础。