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1.
郭楠  许波 《安徽医药》2018,39(11):1301-1304
目的 对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵母细胞的超微结构和线粒体DNA(mtDNA)拷贝数进行分析,探讨PCOS患者卵母细胞质量下降的原因。方法 根据临床指征,选取2017年1~12月于中国科学技术大学附属第一医院生殖医学中心因男方因素行卵胞质内单精子注射技术(ICSI)助孕的患者115例,根据是否患有PCOS分为试验组和对照组,其中试验组为PCOS患者57例,对照组为非PCOS患者58例。所有患者均接受标准长方案控制性促排卵,共收集187枚卵母细胞用于透射电镜(TEM)的超微结构分析和mtDNA拷贝数的荧光实时定量PCR检测。其中试验组52枚用于超微结构观察,另38枚用于mtDNA拷贝数检测;对照组57枚和40枚分别用于超微结构观察和mtDNA拷贝数检测。对比观察试验组与对照组来源的卵母细胞超微结构各指标:透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体和内质网的形态和分布、线粒体的结构与数量。结果 与对照组相比,试验组卵母细胞的透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体、内质网等细胞结构和细胞器没有变化。但试验组卵母细胞内异常线粒体比例(58.7%高于对照组17.7%(P<0.05),且线粒体数量试验组(44.3±9.6)个/切片低于对照组(65.4±12.7)个/切片(P<0.05)。同时,试验组卵母细胞所含的mtDNA拷贝数为(54 390±19 139)个,低于对照组的(88 135±44 235)个(P<0.05)。结论 PCOS患者卵母细胞内线粒体结构和数量均出现改变,可能与其卵母细胞质量受损有关。  相似文献   
2.
朱凯  何晶晶  章枭  王亮  孙华  徐兵  王忠荣  苏义林 《安徽医学》2019,40(12):1310-1314
目的探讨Eg5基因对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖和凋亡的影响。方法取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA(siRNA),分为细胞对照组(用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞)、siRNA对照组(转染siRNA对照)和siRNA干扰组(转染Eg5 siRNA),每组6孔,每孔1×10~6个细胞。使用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测Eg5 mRNA表达水平的变化;使用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)掺入实验和克隆形成实验检测下调Eg5表达对NB细胞增殖的影响;使用流式细胞术检测下调Eg5表达对NB细胞凋亡和细胞周期的影响。结果荧光定量PCR检测结果显示,siRNA干扰组Eg5 mRNA表达水平与细胞对照组和siRNA对照组相比显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);EdU掺入实验和克隆形成结果表明,siRNA干扰组细胞中DNA的合成量和细胞克隆数量低于细胞对照和siRNA对照组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞的凋亡比率低于siRNA干扰组细胞的凋亡比率,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期的检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞中G0/G1期所占比率<50%,而siRNA干扰组细胞中G0/G1期所占比率>70%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在NB细胞中使用siRNA下调Eg5表达,能够抑制NB细胞增殖,促进细胞凋亡。  相似文献   
3.
朱凯  何晶晶  章枭  王亮  孙华  徐兵  王忠荣  苏义林 《安徽医药》2019,40(12):1310-1314
目的 探讨Eg5基因对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖和凋亡的影响。方法 取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA (siRNA),分为细胞对照组(用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞)、siRNA对照组(转染siRNA对照)和siRNA干扰组(转染Eg5 siRNA),每组6孔,每孔1×106个细胞。使用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测Eg5 mRNA表达水平的变化;使用5-乙炔基-2''-脱氧尿苷(EdU)掺入实验和克隆形成实验检测下调Eg5表达对NB细胞增殖的影响;使用流式细胞术检测下调Eg5表达对NB细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 荧光定量PCR检测结果显示,siRNA干扰组Eg5 mRNA表达水平与细胞对照组和siRNA对照组相比显著减少,差异有统计学意义(P < 0.05);EdU掺入实验和克隆形成结果表明,siRNA干扰组细胞中DNA的合成量和细胞克隆数量低于细胞对照和siRNA对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);流式细胞术检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞的凋亡比率低于siRNA干扰组细胞的凋亡比率,差异有统计学意义(P < 0.05);细胞周期的检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞中G0/G1期所占比率< 50%,而siRNA干扰组细胞中G0/G1期所占比率>70%,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 在NB细胞中使用siRNA下调Eg5表达,能够抑制NB细胞增殖,促进细胞凋亡。  相似文献   
4.
目的 探讨输卵管结扎术与胚胎移植间隔时间对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法 将2013年1月至2018年7月在安徽省立医院生殖中心实施双侧输卵管结扎术后行IVF-ET的214例患者按输卵管结扎术与胚胎移植间隔时间分成3组。A组89例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔≤3个月者;B组55例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔4~6个月者;C组70例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔>6个月者。治疗结束后比较3组鲜胚周期移植的生化妊娠率、临床妊娠率、异位妊娠率、早期流产率及活产率。结果 IVF-ET助孕后,3组的生化妊娠率、临床妊娠率、异位妊娠率、早期流产率、活产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 双侧输卵管结扎术与IVF-ET的间隔时间对生化妊娠、临床妊娠、异位妊娠、早期流产率与活产率无影响。  相似文献   
5.
目的观察化瘀通络方联合经期抗炎或通液治疗输卵管通而不畅性不孕症的临床疗效。方法将231例输卵管通而不畅性不孕症患者随机分为经期抗炎对照组(A组,45例)、通液对照组(B组,50例)、化瘀通络方联合经期抗炎治疗组(C组,70例)、化瘀通络方联合通液治疗组(D组,66例) 4组,给予相应治疗方法治疗。1个疗程后,比较4组的临床疗效、治疗前后的中医证候积分、不良反应发生情况;随访半年,比较4组的宫内妊娠率、异位妊娠率及流产率。结果 C、D组总有效率明显高于A、B组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后4组中医证候积分均较同组治疗前显著降低,差异均有统计学意义(P0.05),且C、D组降低程度明显高于A、B 2组(P0.05); C、D组宫内妊娠率明显高于A、B组,异位妊娠率和流产率明显低于A、B组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论化瘀通络方联合经期抗炎或通液治疗输卵管通而不畅性不孕症疗效显著,且安全性高,值得临床推广应用。  相似文献   
6.
多囊卵巢综合征患者卵母细胞超微结构观察   总被引:2,自引:1,他引:1  
郭楠  许波 《安徽医学》2018,39(11):1301-1304
目的 对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵母细胞的超微结构和线粒体DNA(mtDNA)拷贝数进行分析,探讨PCOS患者卵母细胞质量下降的原因。方法 根据临床指征,选取2017年1~12月于中国科学技术大学附属第一医院生殖医学中心因男方因素行卵胞质内单精子注射技术(ICSI)助孕的患者115例,根据是否患有PCOS分为试验组和对照组,其中试验组为PCOS患者57例,对照组为非PCOS患者58例。所有患者均接受标准长方案控制性促排卵,共收集187枚卵母细胞用于透射电镜(TEM)的超微结构分析和mtDNA拷贝数的荧光实时定量PCR检测。其中试验组52枚用于超微结构观察,另38枚用于mtDNA拷贝数检测;对照组57枚和40枚分别用于超微结构观察和mtDNA拷贝数检测。对比观察试验组与对照组来源的卵母细胞超微结构各指标:透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体和内质网的形态和分布、线粒体的结构与数量。结果 与对照组相比,试验组卵母细胞的透明带、卵周隙、微绒毛、皮质颗粒、高尔基体、内质网等细胞结构和细胞器没有变化。但试验组卵母细胞内异常线粒体比例(58.7%高于对照组17.7%(P<0.05),且线粒体数量试验组(44.3±9.6)个/切片低于对照组(65.4±12.7)个/切片(P<0.05)。同时,试验组卵母细胞所含的mtDNA拷贝数为(54 390±19 139)个,低于对照组的(88 135±44 235)个(P<0.05)。结论 PCOS患者卵母细胞内线粒体结构和数量均出现改变,可能与其卵母细胞质量受损有关。  相似文献   
7.
目的 研究辅助生殖技术后胚胎停育患者绒毛染色体同年龄、胚停史及自身免疫性抗体之间的关系。方法 回顾性分析2016年2月~2018年8月进行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embyro transplantation,IVF-ET)助孕术后孕早期胚胎停育行绒毛染色体检查的患者113例。同时检测患者抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)、抗心磷脂抗体(anti-cardiolipin antibody,ACA)抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroperoxidase,ATA)、抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin,ATG)。结果 ①113例患者染色体正常64例,染色体异常者49例;② 35岁以上患者染色体异常率显著高于35岁以下患者(67.57% VS 31.58%,P0.000 1);③既往有无胚停史、胚停次数与绒毛染色体异常之间并无显著联系;④染色体正常组中测出ACA、ANA、ATA/ATG阳性率虽高于染色体异常组,但差异不显著。结论 随着年龄增加,染色体异常比例显著增高;既往有无胚停史与染色体是否异常之间并无显著联系。  相似文献   
8.
何晶晶  朱凯 《安徽医学》2019,40(9):961-965
目的探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpi C,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpi C以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3’端非编码区(3’-UTR)的野生型(WT)和突变型(mut)荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果正常人卵巢上皮细胞HOSEpi C中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义(P <0. 05),选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3’-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3’-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。  相似文献   
9.
何晶晶  朱凯 《安徽医药》2019,40(9):961-965
目的 探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法 购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3’端非编码区(3’-UTR)的野生型(WT)和突变型(mut)荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义(P<0.05),选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3’-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3’-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。  相似文献   
10.
目的探讨输卵管结扎术与胚胎移植间隔时间对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法将2013年1月至2018年7月在安徽省立医院生殖中心实施双侧输卵管结扎术后行IVF-ET的214例患者按输卵管结扎术与胚胎移植间隔时间分成3组。A组89例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔≤3个月者; B组55例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔4~6个月者; C组70例:输卵管结扎与胚胎移植手术间隔> 6个月者。治疗结束后比较3组鲜胚周期移植的生化妊娠率、临床妊娠率、异位妊娠率、早期流产率及活产率。结果 IVF-ET助孕后,3组的生化妊娠率、临床妊娠率、异位妊娠率、早期流产率、活产率比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论双侧输卵管结扎术与IVF-ET的间隔时间对生化妊娠、临床妊娠、异位妊娠、早期流产率与活产率无影响。  相似文献   
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