lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制研究

目的:探讨lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导三阴性乳腺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为MDA-MB-231/R。采用定量PCR和Western blot检测耐药细胞和亲本细胞中lncRNA 178030.2和TRPS1的表达；应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；RIP实验检测lncRNA 178030.2是否与TRPS1相结合；MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2小干扰RNA si178030.2和对照siNC转染至MDA-MB-231/R细胞，分别为干扰组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；MTT法检测MDA-MB-231/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将TRPS1过表达质粒pcmv-TRPS1和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，分别用定量PCR和Western blot检测两组细胞中TRPS1 mRNA及蛋白水平的表达情况，然后再分别应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2转染入两组细胞，MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在3 μg/ml紫杉醇中稳定生长的三阴性乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/R。定量PCR结果显示:lncRNA 178030.2在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显高于在其亲本细胞MDA-MB-231中的表达；定量PCR和Western blot显示:TRPS1 mRNA和蛋白在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显低于在其亲本细胞系MDA-MB-231中的表达；与对照组相比，高表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231细胞中TRPS1表达下降，细胞对紫杉醇的敏感性降低，细胞增殖增强，且lncRNA 178030.2确实可以与TRPS1相结合；与对照组相比，低表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231/R细胞中TRPS1表达升高，细胞对紫杉醇的敏感性升高，细胞增殖减弱；在MDA-MB-231细胞中过表达TRPS1后再过表达lncRNA 178030.2，其促进紫杉醇耐药、促进细胞增殖的作用也明显减弱。结论:lncRNA 178030.2促进三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的紫杉醇耐药，促进细胞增殖，其发生机制可能与下调TRPS1的表达有关。     

CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌细胞紫杉醇耐药的作用及机制研究

目的:探讨CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌（NSCLC）细胞紫杉醇耐药的作用和分子机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为A549/R,采用定量PCR和Western blotting检测耐药细胞和亲本细胞中CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白的表达,应用Lipofectamine 2000分别将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN及其对照质粒pcmv转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为高表达组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将CTEN干扰质粒siCTEN及其对照siNC转染至紫杉醇耐药细胞系A549/R细胞,分别为干扰组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将TGF-β1干扰质粒siTGF-β1及其对照质粒siNC转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为干扰组和对照组,分别检测两组细胞中TGF-β1 mRNA及蛋白水平的表达情况,然后再分别用Lipofectamine 2000将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN转染入两组细胞,MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在5 μg/mL紫杉醇中稳定生长的非小细胞肺癌耐药细胞系A549/R。定量PCR和Western blotting显示,CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白在紫杉醇耐药细胞系A549/R中的表达明显高于在其亲本细胞系A549中的表达;与对照组相比,高表达CTEN组的A549细胞中TGF-β1表达上升,细胞对紫杉醇的敏感性降低,细胞增殖增强;与对照组相比,低表达CTEN组的A549/R细胞中TGF-β1表达降低,细胞对紫杉醇的敏感性升高,细胞增殖减弱;在A549细胞中低表达TGF-β1后再过表达CTEN,其促进紫杉醇耐药及细胞增殖的作用也明显减弱。结论:CTEN具有促进非小细胞肺癌A549的紫杉醇耐药,促进细胞增殖的作用,其发生机制可能与上调TGF-β1的表达有关。     

伊立替康联合顺铂治疗广泛期小细胞肺癌的临床观察

目的观察周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期小细胞肺癌(SCLC)的疗效及不良反应。方法 42例经病理或细胞学诊断为广泛期SCLC患者接受伊立替康60mg/m2第1、8、15天,顺铂25mg/m2第1-3天,每28天为1个周期,治疗2个周期评价疗效,每周期评价不良反应。结果 42例入选患者均可评价疗效。获完全缓解(CR)3例,部分缓解(PR)34例,总有效率(CR+PR)为88.09%。所有患者中位疾病进展时间为225d,中位生存时间401d。主要不良反应为Ⅲ/Ⅳ度中性粒细胞下降(19例,45.2%),腹泻(7例,16.7%)和恶心、呕吐(13例,31.0%)等。结论周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期SCLC安全、有效,可作为一线化疗方案的选择。     

结肠癌转移相关基因1在食管癌细胞中的作用

目的 探讨结肠癌转移相关基因1 (MACC1)在食管癌细胞株Eca-109中的作用及其可能机制.方法 体外培养Eca-109细胞,并分为MACC1 shRNA转染重组质粒组(A组)、转染空质粒阴性对照组(B组)和Eca-109细胞空白组(C组).采用RT-PCR和Western blot法分别检测MACC1、c-MET mRNA和蛋白表达,Transwell和划痕实验分别观察转染前后Eca-109细胞侵袭和迁移能力的变化.结果 与B、C组相比,A组MACC1、c-MET mRNA和蛋白表达下调,Eca-109细胞侵袭和迁移能力降低(P＜0.05).结论 下调MACC1表达能明显抑制食管癌细胞的侵袭和转移能力,可能是通过调节下游基因c-MET表达实现的.     

卡文在晚期胃肠道肿瘤患者中的应用及护理体会

晚期胃肠道肿瘤患者由于进食困难、肿瘤消耗以及放化疗等原因,均出现明显的营养不良.肠外营养支持成为这些患者治疗中的重要一环,尤其是近年来三腔袋的出现,为肠外营养支持提供了更为便捷的使用途径.     

化疗对晚期结直肠癌患者血清VEGF水平的影响

目的探讨晚期结直肠癌患者化疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其与疗效的关系。方法收集48例晚期结直肠癌患者化疗前及化疗4周期后血清,采用ELISA法检测VEGF水平。结果晚期结直肠癌患者外周血清VEGF水平明显高于健康体检者(P0.05);48例晚期结直肠癌化疗后血清VEGF明显下降,化疗前后分别为(434.52±124.34)pg/mL、(384.45±98.95)pg/mL,差别具有统计学意义(P0.05)。血清VEGF水平的变化与疗效有关,疗效达CR+PR者血清VEGF水平化疗后(344.59±93.57)pg/mL比化疗前明显降低(P0.05);疗效为SD+PD者血清VEGF水平化疗后(417.92±123.53)pg/mL比化疗前略有下降,但差异无统计学意义;疗效达CR+PR者化疗后血清VEGF水平明显低于疗效为SD+PD者(P0.05)。结论晚期结直肠癌全身化疗能够明显影响血清VEGF水平,动态检测化疗前后血清VEGF水平能反映化疗近期疗效,并可能作为结直肠癌复发转移的重要指标。     

替吉奥联合顺铂在晚期胃癌的疗效观察

目的观察替吉奥联合顺铂（DDP）治疗晚期胃癌的临床疗效。方法 52例晚期胃癌患者随机分为两组,治疗组24例采用替吉奥联合顺铂治疗,对照组28例采用5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合顺铂治疗。结果治疗组总有效率、获益率、KPS评分改善者均显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论替吉奥联合顺铂对于晚期胃癌,近期疗效较好,不良反应可耐受,值得推广及进一步研究。     

紫杉醇联合顺铂及氟尿嘧啶在中晚期宫颈癌的临床应用

目的观察紫杉醇联合顺铂和氟脲嘧啶（5-FU）治疗中晚期宫颈癌的临床效果。方法 60例中晚期宫颈癌患者随机分为实验组和对照组,每组30例。实验组化疗采用紫杉醇联合顺铂及5-FU,对照组采用顺铂联合5-Fu,疗程结束1个月后观察两组患者的治疗有效率。结果实验组中9例完全缓解,18例部分缓解,治疗有效率为90.00%;对照组4例完全缓解,16例部分缓解,有效率66.67%。两组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论紫杉醇联合顺铂及5-FU治疗中晚期宫颈癌的疗效优于顺铂联合5-FU。     

培美曲塞联合吉非替尼治疗EGFR-TKI进展后晚期肺腺癌

目的：研究表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（ EGFR-TKI）治疗进展后,继续应用培美曲塞联合吉非替尼治疗晚期肺腺癌的临床疗效及安全性。方法既往接受过EGFR-TKI（包括吉非替尼/厄洛替尼/埃克替尼）靶向治疗后复发或进展的ⅢB或Ⅳ期肺腺癌患者36例,继续应用培美曲塞联合吉非替尼治疗,具体方案为：培美曲塞第1天500mg/m2＋吉非替尼250mg每天1次,每21天为1个周期,直至肿瘤进展或不良反应无法耐受。每接受2个周期治疗后评价临床疗效及不良反应。结果36例晚期肺腺癌患者均可评价临床疗效,其中治疗后完全缓解率为0.0％,部分缓解率为38.9％,疾病稳定率为41.7％,疾病进展率为19.4％。客观有效率为38.9％,疾病控制率为80.6％。中位无进展生存时间6个月,中位生存时间13.3个月。Ⅲ或Ⅳ度中性粒细胞减少发生率为22.2％,Ⅲ度以上皮疹的发生率为16.7％。结论 EGFR-TKI治疗进展后,继续应用培美曲塞联合吉非替尼治疗晚期肺腺癌患者,能够取得较好的临床疗效,且不良反应能耐受。