大鼠肾小球内皮细胞分离培养和鉴定

1.材料和试剂：（1）材料：SD大鼠1-2月龄,体重50-100g,雌雄各半,由东南大学医学院实验动物中心提供。Mini MACS免疫磁珠细胞分选仪、磁性分离柱LS购自Miltenyi Biotec公司。（2）试剂：Ⅳ型胶原酶、内皮细胞生长因子、胰蛋白酶及转铁蛋白均购自Sigma公司,DMEM培养基购自Gibco公司,异硫氰酸荧光素标记的抗CD34-FITC、抗波形蛋白及抗角蛋白均购自Santa Cruz公司,抗FITC免疫磁珠购自Miltenyi Biotec公司。     

纳米锰锌铁氧体的生物相容性研究

目的：研究用于肿瘤磁流体热疗的自制纳米级Mn-Zn铁氧体(Mn0.5Zn0.5Fe2O4)的生物相容性。方法：溴化—3(4，5—二甲基噻唑基—2)—2，5—二苯基四唑(MTT)实验评价其体外细胞毒性；溶血试验评价其有无溶血作用：小鼠腹腔注射其无菌生理盐水混悬液以测定其LD50及最大耐受量(MTD)；微核试验评价其有无致畸、致突变作用等。结果：MTT显示该材料对L-929细胞毒性为0～1级；无溶血作用；昆明小鼠腹腔注射该材料混悬液1ml．在极限浓度时的LD50测不出，MTD值达到6g／ks；微核实验结果表明无致畸致突变作用。结论：该材料是一种具有良好生物相容性的材料，应用于肿瘤热疗具有广阔前景。     

茶多酚对高糖时内皮细胞产生活性氧和TGF-β1的影响

目的探讨高糖对内皮细胞产生活性氧和转化生长因子岛(TGF-β1)的影响，以及茶多酚的干预作用。方法培养人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)，分为正常对照组、高糖组、茶多酚组和茶多酚干预组。培养0、12、36h后，用分光光度比色法测定细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，用RT-PCR法测定细胞内TGF-β1 mRNA的变化。结果高糖导致内皮细胞SOD活性下降和MDA含量升高，上调TGF-β1 mRNA表达，其变化随时间延长更为明显。茶多酚干预可拮抗高糖时内皮细胞的上述改变。结论茶多酚有抑制高糖对内皮细胞的损伤作用。     

高糖对人肾小球系膜细胞髓过氧化物酶、谷胱甘肽-硫转移酶活性和细胞间黏附分子1表达的影响及茶多酚的干预作用

在糖尿病肾病（DN）的发生、发展过程中，高血糖，活性氧，血管活性物质以及细胞因子都起着重要的作用。近年来，细胞间黏附分子1（ICAM-1）在DN中的作用受到重视。     

活性氧及转化生长因子-β1在进行性被动Heymann肾炎发病中的作用

通过建立进行性被动Heymann肾炎（ppHN）模型,用牛磺酸进行抗氧化干预,通过对肾小球中转化生长因子-β1（TGF-β1）及Ⅳ型胶原和纤连蛋白（FN）的表达和血清过氧化物歧化本科（SOD）及MDA水平的检测,探讨活性氧与TGF-β1在ppHN发生发展中的作用。     

高压氧联合自由基拮抗剂对大鼠肝纤维化基质金属蛋白酶-2表达及活性的影响

用高压氧来处理四氯化碳(CCl4)致肝损伤的大鼠，同时加用自由基拮抗剂消除高压氧可能导致自由基产生增多带来的不良作用，研究拟观察其对大鼠肝损伤的保护作用以及对肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及活性的影响。     

TNF-α对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1皮质醇合成的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1皮质醇合成及其合成过程中的关键基因StAR的变化.方法 50U/ml的TNF-α或(和)10-9mol/L促肾上腺皮质激素(ACTH)在不同作用时间处理小鼠肾上腺皮质细胞系Y1.台盼蓝拒染法检测细胞数目,放免法检测细胞皮质醇合成水平,RT-PCR检测类固醇急性调节蛋白相关基因(StAR)的表达变化.结果 50U/ml TNF-α或(和)10-9mol/L ACTH处理Y1细胞不同时间,发现TNF-α和ACTH共同作用后,皮质醇合成水平明显下降(P＜0.05),StAR mRNA表达明显下降(P＜0.05);而TNF-α单独作用时对皮质醇合成的抑制作用不明显,StAR mRNA表达也无明显改变(P＞0.05);ACTH单独作用时Y1细胞皮质醇的合成明显升高(P＜0.05);StAR mRNA表达明显升高(P＜0.05).结论 TNF-α与ACTH共同作用通过抑制StAR表达进而抑制皮质醇合成能力;而TNF-α单独作用无明显抑制作用,ACTH单独作用后其表达量则明显升高.     

成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用促进细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达

目的研究成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用对二者表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）的影响,初步探讨肿瘤-基质相互作用在结肠癌侵袭转移中的作用。方法结肠癌SW480细胞与HELF成纤维细胞以RPMI1640培养液分别共培养0、12、24、48h,通过RT-PCR和免疫细胞化学方法检测SW480和HELF细胞中EMMPRIN的表达。结果共培养组SW480细胞EMMPRINmRNA和蛋白的表达均明显升高,HELF细胞本来不表达EMMPRIN,与SW480细胞共培养12、24、48h后检测到EMMPRIN表达,且随时间延长而表达增加。结论成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用上调SW480细胞EMMPRIN的表达,并诱导HELF细胞表达EMMPRIN,有可能在结肠癌侵袭转移中发挥重要作用。     

具有磁感应定向加热治疗肿瘤作用的锰锌铁氧体纳米粒子的制备及其特性检测

采用改良的化学共沉淀法制备Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米磁性材料，用透射电镜、分析仪及热分析系统等进行表征及特性检测。将Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米粒子以及其不同浓度的磁流体置于200KHz的交变磁场中照射，检测其磁感应自控加热作用；用Mn0.5Zn0.5；Fe2O4浸渍液体外干预小鼠L929成纤维细胞，通过检测细胞增值率来评价其细胞毒性。结果表明，制备的锰锌铁氧体纳米粒子为圆形，约40nm，并经检索X-线粉末衍射图库证实；纳米锰锌铁氧体磁流体能磁感应加热而升温到40℃～51℃，且最终温度能稳定控制不变；纳米锰锌铁氧体浸渍液对细胞未见明显毒性作用。     

VEGF及其促肿瘤血管形成作用的研究进展

肿瘤新血管的形成，对于直径大于2mm的实体肿瘤的生长及转移是必不可少的条件。恶性肿瘤组织可分泌多种促血管形因子，其中血管内生长因子(VEGF)是最重要的因子，在生理及病理条件下，具有很强的促血管形成作用，能调节血管内皮细胞的多种生物学功能。