氯氰菊酯对模式动物秀丽隐杆线虫生殖能力的损伤作用

目的：应用模式动物秀丽隐杆线虫研究菊酯类农药氯氰菊酯的生殖毒性,并对秀丽隐杆线虫模型在生殖毒理学中应用的可行性进行初步探讨。方法：将L4期野生型秀丽隐杆线虫分别于0.08、0.8和8.0 mg/L的氯氰菊酯中暴露24、48和72 h,每组10条,以K溶液为阴性对照,分别在体视显微镜和光镜下计数后代数目、子宫内受精卵数目、卵母细胞数目并观察形态,体外排受精卵速率。结果：L4期野生型秀丽隐杆线虫暴露于氯氰菊酯24 h后,各观察终点均无显著性变化;暴露48 h后,8.0 m/L浓度染毒组发生后代数目降低,0.8和8.0 m/L染毒组纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小且子宫内受精卵数目降低,0.08、0.8和8.0mg/L染毒组体外排受精卵速率均下降,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;暴露72 h后,0.8和8.0 m/L染毒组后代数目降低,纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：模式动物秀丽隐杆线虫生殖系统对氯氰菊酯具有一定敏感性,在生殖毒理学研究中具有潜在应用价值。     

利用化学蛋白组学方法分析小鼠肝中氨甲蝶呤相互作用蛋白质

目的利用基于亲和色谱的化学蛋白组学方法分析小鼠肝组织匀浆液中与氨甲蝶呤相互作用蛋白,探讨氨甲蝶呤的作用机制。方法 以键合氨甲蝶呤的琼脂糖凝胶作为亲和材料,从小鼠肝组织匀浆液中亲和富集与氨甲蝶呤相互作用蛋白,采用含有吐温-20的缓冲液洗涤凝胶,去除凝胶表面非特异吸附蛋白,采用高浓度盐洗脱凝胶亲和富集蛋白,对洗脱蛋白进行胰蛋白酶酶解,酶解产物进行HPLC/MS分析和数据库搜索。结果 对洗脱样品进行SDS-PAGE分析结果表明键合氨甲蝶呤的琼脂糖凝胶可以富集小鼠肝组织中与氨甲蝶呤相互作用蛋白。对洗脱样品酶解产物进行质谱分析鉴定了同型半胱氨酸水解酶等23种蛋白。结论 基于亲和色谱的化学蛋白组学方法是一种快速、有效的发现药物相互作用蛋白的方法。     

重金属暴露秀丽线虫中存在咽泵运动与寿命之间的显著关联

目的：分析重金属暴露秀丽线虫中咽泵运动与寿命之间的相关性。方法：毒性评估实验选择重金属Hg、Pb、Cr与Cd。分析重金属暴露秀丽线虫中咽泵运动的变化情况,并进一步利用线性回归方法分析重金属暴露秀丽线虫中咽泵运动与寿命之间的相关性。结果：在所有评价浓度下的Hg与Pb暴露以及100与200μmol.L-1浓度下的Cr与Cd暴露均可以显著降低咽泵的运动速率。咽泵运动速率的变化显著相关于秀丽线虫所暴露重金属的浓度。而且,重金属暴露秀丽线虫中的咽泵运动速率显著相关于动物的寿命长度。结论：重金属暴露秀丽线虫中存在咽泵运动速率与寿命长度之间的显著关联,且在分析环境有害物质的毒害时,其对于秀丽线虫寿命的毒害可以通过咽泵运动速率来间接进行评价。     

热激胁迫可能通过降低脂肪与糖原的积累抑制涡虫的发育（英文）

目的：研究百草枯诱导的氧化胁迫在涡虫严重致死率发生中的角色。方法：动物的存活率用于反映涡虫的致死率。百草枯用来诱导严重的氧化胁迫,氧化胁迫的发生程度通过过氧化物酶（SOD）的活性变化来监测。游离氧自由基清除剂DMSO用来在百草枯处理前或后处理涡虫。结果：浓度为2 mmol.L-1百草枯处理1 h显著降低SOD活性,而2 mmol.L-1百草枯处理2、4、8 h可以导致更严重的SOD活性降低。暴露2 h后,浓度为1 mmol.L-1百草枯不明显影响SOD活性,而浓度为2、3与4 mmol.L-1的百草枯处理则显著降低SOD活性。同时,经浓度为2、3与4 mmol.L-1百草枯处理后,继续发育3 d的涡虫存活率发生了显著的降低。进而,对浓度为2 mmol.L-1百草枯处理2、4与8 h涡虫进行预先或延后DMSO（0.1%）处理4 h可以显著增加百草枯处理动物的SOD活性。尽管如此,在2 mmol.L-1百草枯处理2、4与8 h基础上再进行DMSO（0.1%）预先或延后处理4 h涡虫动物的SOD活性尚不能够达到正常涡虫中的SOD活性水平。而且,对浓度为2 mmo.lL-1百草枯处理2、4与8 h涡虫进行预先或延后DMSO（0.1%）处理4 h还可以显著提高百草枯处理动物的存活率。结论：DMSO预先或延后处理可以有效地预防或恢复百草枯暴露涡虫中经氧化胁迫诱导的严重致死率毒害。     

基于秀丽线虫发育时期敏感性差异进行的环境暴露安全性评价研究进展

目前,模型动物秀丽线虫已经广泛应用于环境安全评价和环境毒理研究。本文系统综述基于致死率、生殖、运动行为、神经元存活与发育、神经突触活性、肠道自发荧光、应激反应等评价终点进行的秀丽线虫各个发育时期对于环境暴露敏感性差异的研究进展,并总结现有的3种用于分析秀丽线虫各个发育时期对于环境暴露敏感性的方法,进而讨论基于秀丽线虫发育时期的敏感性差异进行环境暴露安全性评价研究中尚存在的问题以及可能的解决策略。     

重金属暴露可以改变秀丽线虫的脂肪积累

目的：研究重金属暴露对秀丽线虫脂肪积累的急性中毒效应,鉴定重金属暴露秀丽线虫中发生表达模式改变的与脂肪酸代谢相关的基因。方法：银、镉、铬、铜、汞、锰和锌作为测试重金属,Nile Red荧光探针染色分析重金属暴露线虫肠道的脂肪酸含量变化,并测定重金属暴露线虫中脂肪酸代谢相关基因的转录水平变化。结果：在所分析重金属中,高浓度银、铬和铜暴露可以显著诱导线虫肠道脂肪积累的增加,而高浓度镉暴露可以显著降低线虫肠道脂肪的积累。而且,与对照组相比,高浓度的银和铬暴露不明显影响基因pod-2、gei-7、lbp-8、gpd-3、W05G11.6、C03H5.4和C07E3.9的表达水平,而在暴露的线虫动物中,基因fat-5、fat-6和fat-7的表达水平显著升高,lbp-1、acs-2和ech-1的表达水平显著降低。结论：高浓度银、铬、铜和镉暴露可以导致异常的秀丽线虫肠道的脂肪积累变化,其中高浓度银和铬暴露导致线虫脂肪积累增加的主要原因可能归因于暴露动物体内脂肪酸去饱和与线粒体β-氧化代谢途径以及脂肪酸结合能力的异常。     

Reduction of reproductive capacity of model organism Caenorhabditis elegans induced by cypermethrin exposure

目的:应用模式动物秀丽隐杆线虫研究菊酯类农药氯氰菊酯的生殖毒性,并对秀丽隐杆线虫模型在生殖毒理学中应用的可行性进行初步探讨.方法:将L4期野生型秀丽隐杆线虫分别于0.08、0.8和8.0 mg/L的氯氰菊酯中暴露24、48和72 h,每组10条,以K溶液为阴性对照,分别在体视显微镜和光镜下计数后代数目、子宫内受精卵数目、卵母细胞数目并观察形态,体外排受精卵速率.结果:L4期野生型秀丽隐杆线虫暴露于氯氰菊酯24h后,各观察终点均无显著性变化；暴露48 h后,8.0 mg/L浓度染毒组发生后代数目降低,0.8和8.0 mg/L染毒组纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小且子宫内受精卵数目降低,0.08、0.8和8.0mg/L染毒组体外排受精卵速率均下降,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05)；暴露72 h后,0.8和8.0 mg/L染毒组后代数目降低,纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:模式动物秀丽隐杆线虫生殖系统对氯氰菊酯具有一定敏感性,在生殖毒理学研究中具有潜在应用价值.     

应用离子对反相高效液相色谱法检测微卫星DNA不稳定

目的　建立一种敏感、稳定、高通量的微卫星 DNA不稳定检测技术。方法　应用离子对反相高效液相色谱法在 2 0名正常人、115例散发性大肠癌患者中检测 5个微卫星位点。正常人取外周静脉血DNA,重复 PCR反应 (标准化参照 )。癌症患者取其癌组织及同源正常组织 DNA,配对分析 PCR产物。结果　 115例大肠癌样本中 17例 (14 .8% )存在微卫星 DNA高度不稳定 ,2 3例 (2 0 .0 % )存在微卫星 DNA低度不稳定。低龄和高龄大肠癌患者中微卫星不稳定 (microsatellite instability,MSI)检出率高于中位年龄患者(P<0 .0 5 ) ;低分化大肠癌患者中 MSI检出率高于中、高分化大肠癌患者 (P<0 .0 5 )。结论　离子对反相高效液相色谱法可用于检测 MSI,并具有敏感、稳定、高通量等特点。     

百草枯处理通过诱导氧化胁迫导致严重涡虫致死率的发生

目的:研究百草枯诱导的氧化胁迫在涡虫严重致死率发生中的角色.方法:动物的存活率用于反映涡虫的致死率.百草枯用来诱导严重的氧化胁迫,氧化胁迫的发生程度通过过氧化物酶(SOD)的活性变化来监测.游离氧自由基清除剂DMSO用来在百草枯处理前或后处理涡虫.结果:浓度为2 mmol·L-1百草枯处理1 h显著降低SOD活性,而2 mmol·L-1百草枯处理2、4、8 h可以导致更严重的SOD活性降低.暴露2 h后,浓度为1 mmol·L-1百草枯不明显影响SOD活性,而浓度为2 、3与4 mmol·L-1的百草枯处理则显著降低SOD活性.同时,经浓度为2、3与4 mmol·L-1百草枯处理后,继续发育3 d的涡虫存活率发生了显著的降低.进而,对浓度为2 mmol·L-1百草枯处理2、4与8 h涡虫进行预先或延后DMSO(0.1%)处理4 h可以显著增加百草枯处理动物的SOD活性.尽管如此,在2 mmol·L-1百草枯处理2、4与8 h基础上再进行DMSO(0.1%)预先或延后处理4 h涡虫动物的SOD活性尚不能够达到正常涡虫中的SOD活性水平.而且,对浓度为2 mmol·L-1百草枯处理2、4与8 h涡虫进行预先或延后DMSO(0.1%)处理4 h还可以显著提高百草枯处理动物的存活率.结论:DMSO预先或延后处理可以有效地预防或恢复百草枯暴露涡虫中经氧化胁迫诱导的严重致死率毒害.     

利用排泄行为参数评价重金属暴露对于秀丽线虫代谢状态的毒害

目的：研究重金属暴露对秀丽线虫排泄行为的影响。方法：用于分析的CdCl2、CrCl2、HgCl2和Pb（NO3）2溶液浓度分别为50、100、150和200μmol.L-1。参数平均排泄循环长度用于评价重金属暴露秀丽线虫的代谢状态改变。线性回归用于分析平均排泄循环长度与暴露重金属浓度之间、暴露动物中平均排泄循环长度和咽泵运动速率之间的关联。结果：所有分析浓度的汞和铅暴露以及浓度为100μmol.L-1到200μmol.L-1的镉和铬暴露均可以显著增加线虫的平均排泄循环长度。线虫平均排泄循环长度具有伴随重金属暴露浓度改变而变化的特点,且平均排泄循环长度显著相关于所暴露重金属的浓度。在重金属暴露的线虫中,咽泵运动速率还显著相关于平均排泄循环长度。此外,汞和铅暴露对于线虫排泄行为的影响远比铬和镉的暴露严重。结论：参数平均排泄循环长度可以有效评价重金属暴露对线虫代谢状态的毒害,而且在重金属暴露线虫中可以观察到平均排泄循环长度与咽泵运动速率之间的显著相关性。