《内经》脾胃藏象辨证论治思想的临床意义浅析

《内经》脾胃藏象辨证论治思想体现在：认为生理上脾胃内与其他脏腑、外与四肢百骸具有的密切的联系，病理上将多种病证的发病原因归结为脾胃，强调了对多种病证从脾胃进行辨证论治的重要性，对后世医家产生论深远的影响，对临床具有重要的指导意义。本文在《内经》脾胃藏象病证论治思想指导下，对从脾胃治疗咳嗽、心悸、失眠、黄疸、水肿等病证分别进行了分析探讨。     

血管成形术后再狭窄差异基因分析及机制探索北大核心CSCD

目的从分子水平探索支架内再狭窄(ISR)的关键基因,以及ISR的发病机制。方法通过基因表达综合(GEO)公共数据库获取GSE46560数据集,利用R语言的limma包分析获得ISR组与对照之间的差异表达基因(DEG),并对外周血的微阵列数据集进行加权基因相关网络分析(WGCNA),以探索ISR相关基因。为了鉴定枢纽基因,对DEG与关键模块中的交集基因进行了功能富集分析、通路分析和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建。通过蛋白质免疫印迹验证靶基因。结果ISR组和对照组共鉴定出243个DEG,其中有109个上调,有134个下调。WGCNA蓝色模块包含2934个基因,是GSE46560数据集中与ISR相关系数最高的模块。筛选DEG和WGCNA交集基因,有ITPK1、SMG9。GO富集和KEGG分析表明,基因主要富集于蛋白磷酸化、细胞周期调节和细胞增殖,以及细胞衰老和TGF-β信号通路。在Cytoscape中,获得2个枢纽基因,为MCM2、RAD52。结论ITPK1、MCM2、RAD52可能是ISR发病机制特异性相关基因,为ISR的鉴定和治疗提供新的靶点。     

草鱼肝细胞的分离与原代培养

目的以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞为实验对象,在不同条件下进行原代培养,以探讨适合草鱼肝细胞生长的最佳条件及培养方法,用于饲料营养与非营养物质对草鱼肝细胞代谢、损伤作用机制的研究。方法采用温胰蛋白酶消化法和红细胞裂解液分离、纯化肝细胞,MTT法测定细胞增殖率,并测定不同时期培养液上清液中LDH、Alb和BUN的含量,分析肝细胞生长状况。结果采用0.25%浓度的温胰蛋白酶消化法,消化20 min,分步收集肝细胞,经台盼蓝染色检测和血球计数板计数,活细胞数≥99%。结论在含10%胎牛血清、10 μg/mL胰岛素的M199培养基中,以接种浓度1.7×10⁶cell/mL左右为宜,置于27℃、4.5% CO₂浓度的恒温培养箱中,可成功培养草鱼原代肝细胞。     

一种斑马鱼高脂血症模型的建立方法

目的：建立一种稳定可靠的斑马鱼高脂血症模型。方法：受精5天后(5 dpf, days post fertilization)的斑马鱼幼鱼随机分成普通饲料组和高胆固醇饲料模型组,普通饲料为纯蛋黄干粉,高胆固醇饲料是向纯蛋黄干粉中添加不同百分比的胆固醇配制而成,连续喂养10天后通过显微镜实时观察和幼鱼体内生理生化指标的检测进行评估。结果：添加5%胆固醇的模型组斑马鱼幼鱼体宽显著大于普通饲料组(p<0.01),其幼鱼体内总胆固醇(TC,total cholesterol)和总甘油三酯(TG,total glyceride)水平较普通饲料组显著升高(p<0.01),且低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,low-density lipoprotein cholesterol)水平也显著升高(p<0.05)。此外,显微镜下观察到不同百分比的高胆固醇饮食模型组幼鱼尾部血管动脉脂质沉积量均极显著高于普通饲料组(p<0.01),增加高胆固醇饲料投喂量可以加快高脂血症模型建立。结论：5%高胆固醇饲料喂养10天可以诱导斑马鱼高脂血症的发生。     

浒苔粗多糖化妆品开发潜力研究

目的研究浒苔粗提多糖作为化妆品的开发潜力。方法经水提乙醇沉淀得到浒苔粗多糖,测定其抗氧化性、保湿性吸湿性及防晒效果。结果浒苔多糖在抗氧化,吸湿保湿性和防晒方面均有较好作用。抗氧化方面,浒苔多糖对DPPH自由基的清除率在浓度为1.5mg/mL时高达92.11%,对羟自由基的清除率在浓度为3mg/mL达到83.40%;保湿吸湿方面,多糖的吸湿性在湿度为55%和85%时均明显优于甘油和商品化爽肤水(千纤草丝瓜水),多糖与甘油1∶1混合时在湿度43%和55%时保湿效果最好;防晒方面,0.4mg/mL多糖防晒效果优于商品化防晒隔离水(防晒系数30+的曼秀雷敦新碧户外骄阳防晒喷雾)。结论浒苔多糖具开发为化...     

沉默ANLN基因对胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响

目的 探讨肌动蛋白结合蛋白ANLN在体外对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测胃癌细胞株、胃黏膜细胞株中ANLN的表达情况和验证siRNA对ANLN基因的敲减情况。划痕实验和Transwell检测沉默ANLN基因表达对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响。CCK-8实验、细胞荧光染色和流式细胞术检测沉默ANLN基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的变化。结果 胃癌细胞株SGC-7901/MGC-803中的ANLN的mRNA和蛋白表达显著高于正常胃黏膜细胞株GES-1（P<0.001）。siRNA干扰后RT-PCR和Western blot结果证明转染成功，转染组的mRNA和蛋白表达量与对照组差异有统计学意义（P<0.05）。下调ANLN能够显著降低胃癌细胞的迁移、侵袭、增殖和凋亡能力。结论 下调ANLN的表达可以显著降低胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡能力。     

条斑紫菜藻胆蛋白对小鼠免疫功能及抗氧化活性的影响

目的本实验研究了条斑紫菜藻胆蛋白对小鼠免疫功能及抗氧化活性的影响。方法通过小鼠衰老模型探讨不同浓度藻胆蛋白提取液(CPP)灌胃30 d后,对小鼠免疫器官重量、血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及肝组织丙二醛(MDA)生成的影响。同时,研究了纯化的R-藻红蛋白(R-PE)和C-藻蓝蛋白(C-PC)对二苯代苦味酸自由基(DPPH)的清除作用及对H2O2诱导的小鼠红细胞溶血和小鼠肝匀浆脂质过氧化生成的抑制作用。结果藻胆蛋白提取液可以提高免疫器官脏器指数,并且显著提高小鼠血清SOD和GSH-Px活性,显著降低了肝组织MDA生成。R-PE和C-PC浓度在1.4 mg.mL-1时,对DPPH的清除率达到最大,分别为89.01%和60.52%;在浓度为0.12 mg.mL-1时,对小鼠红细胞溶血的抑制率达到最大,分别为73.85%和63.42%;在浓度为0.2 mg.mL-1和0.3 mg.mL-1时,对肝匀浆脂质过氧化的抑制率分别达到66.63%和66.67%。以上活性均高于同浓度下的维生素C。结论条斑紫菜藻胆蛋白能提高小鼠的免疫功能,是一种具有良好应用前景的抗氧化剂。     

结核分枝杆菌环丝氨酸药物敏感性及耐药机制研究

目的 检测耐多药结核病(MDR-TB)临床分离株的环丝氨酸最低抑菌浓度(MIC),并从基因水平进行环丝氨酸耐药机制的研究,为环丝氨酸的快速耐药测定提供理论依据。方法 采用Middlebrook 7H9液体培养基,在96孔板中对140株MDR-TB和37株敏感结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行环丝氨酸药敏试验,筛选出对环丝氨酸耐药及敏感的菌株,再对Ald、Alr、ddlA基因进行突变位点及基因表达量的分析。结果 MDR-TB对环丝氨酸的耐药率仅为4.28%,初步将MIC≥32 μg/mL的结核分枝杆菌菌株判定为对环丝氨酸耐药;Ald、Alr、ddlA基因位点突变与结核分枝杆菌对环丝氨酸耐药无明显相关性,环丝氨酸耐药菌株在Alr基因位点处基因表达量明显高于敏感菌株。结论 目前临床的MDR-TB患者对环丝氨酸的耐药率较低,使用环丝氨酸治疗MDR-TB是一种有效的选择。尚未发现明确的环丝氨酸耐药突变位点,但Alr基因的过表达与MTB环丝氨酸耐药高度相关,可能是其耐药的新机制。     

餐具洗涤剂中甲醇的自动顶空气相色谱测定法

为探讨餐具洗涤剂中甲醇的自动顶空气相色谱测定法,将样品经过自动顶空进样器处理后进入气相色谱仪进行检测。经HP-INNOWAX色谱柱分离后,通过氢火焰离子化检测器进行检测。该方法的线性方程为y=94891x+664.6,r=0.9997,线性范围为0.00014～2.0mg/ml。RSD为0.4%～1.4%,定性检出限为0.14μg/g,定量检出限为0.70μg/g,回收率为103%~105%。该检测方法快速、灵敏、准确,适合于餐具洗涤剂中甲醇的检测。