亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用及机制研究

目的:探讨亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用。方法:MTT法检测细胞活力，Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡，Hoechst33258染色观察细胞染色质固缩情况，碘化丙啶PI单染法检测细胞周期，Western blot检测p-GSK3β、GSK3β及凋亡相关蛋白 PARP、bcl-2的表达。结果:不同浓度的亚砷酸钠或粉防己碱单用均可抑制MDA-MB-231细胞增殖（P＜0.01）；与单独用药相比，两药联合使用可显著增强细胞增殖抑制效果（P＜0.000 1）。两药联用可显著诱导MDA-MB-231细胞凋亡（P＜0.01），细胞凋亡率呈现浓度依赖性递增，并出现细胞核染色质固缩。联合用药浓度为亚砷酸钠10 μmol/L+粉防己碱4 μg/ml时，S期细胞所占百分比显著增高（P＜0.05）；联合用药浓度为亚砷酸钠15 μmol/L+粉防己碱4.5 μg/ml时，G2/M期细胞所占百分比显著增高（P＜0.001）。联合用药后，凋亡相关蛋白PARP的表达显著上调（P＜0.000 1）；bcl-2的表达显著下调（P＜0.05）；p-GSK3β、GSK3β蛋白表达均显著上调（P＜0.000 1）。 结论:亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有增殖抑制作用，其机制与诱导细胞周期 S期、G2/M期阻滞、GSK3β蛋白水平上调及促进细胞凋亡有关，促凋亡作用与bcl-2蛋白水平下调、PARP蛋白水平上调有关。     

中医药治疗耳鼻咽喉头颈外科领域临床优势病种的探讨

在耳鼻咽喉头颈外科常见病的诊疗中，中西医各有优势与局限。临床诊疗中，中西医结合治疗的疗效肯定，但在优势病种选择及诊疗方案选择方面尚无统一意见。中华中医药学会组织中西医耳鼻咽喉头颈科专家一起进行探讨，从病因、机制、临床诊疗方法等方面出发，基于多项临床研究结果，综合专家意见，推荐将急性咽炎、慢性咽喉炎、咽异感症、癔症性失音、过敏性鼻炎、主观性耳鸣、耳源性眩晕遴选为优势病种，制定出中西医融合的诊疗方案及建议并形成专家指导意见，供临床参考。以期通过中西医结合治疗，使更多的患者受益。     

蜘蛛香环烯醚萜部位干预CUMS致抑郁小鼠脑组织的1H-NMR代谢组学分析

目的:利用代谢组学技术分析慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁模型小鼠脑组织样本,寻找与抑郁相关的差异代谢物,探讨蜘蛛香环烯醚萜部位(IEFV)可能的抗抑郁作用机制。方法:42只昆明小鼠随机分为6组,包括正常组,模型组,氟西汀组(2.5 mg·kg-1),IEFV低、中、高剂量组(给药剂量分别为5.73,11.47,22.94 mg·kg-1)。采用CUMS对小鼠造模,以IEFV及阳性药(氟西汀)为干预药物,用行为指标和生化指标进行药效学评价。采用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术分析IEFV对CUMS抑郁模型小鼠脑组织中内源性物质的影响,结合多变量统计分析方法来确认差异代谢物,并对差异代谢物参与的代谢通路进行富集。结果:造模后,小鼠的不动时间大幅度提高、蔗糖偏好率明显下降,兴奋性神经递质5-羟色胺和去甲肾上腺素显著下降,表明造模成功。给予IEFV和氟西汀后,小鼠不动时间、蔗糖偏好率和兴奋性神经递质向正常水平回调,提示给药后抑郁状态得到了一定程度的缓解。脑组织中内源性代谢物主成分分析(PCA)结果显示,模型组可与正常组明显分开,同时IEFV低、中、高剂量组和氟西汀组均显示有偏离模型组向正常组靠拢的趋势,与行为学结果一致。模型组与正常组进行正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)得到了16个变化显著的差异代谢物,包括12个水溶性差异代谢物和4个脂溶性差异代谢物。通过MetPA数据库分析得到7条潜在靶标代谢通路,包括三羧酸循环(TCA),牛磺酸和亚牛磺酸的代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等。IEFV高剂量组可显著回调11种差异代谢物。结论:IEFV可能主要通过影响能量代谢,氨基酸代谢和神经递质水平发挥抗抑郁作用,可为IEFV抗抑郁作用机制的深入研究提供参考依据。     

尪痹制剂与非甾体抗炎药对比治疗膝骨关节炎的随机对照试验的系统评价

目的系统评价尪痹制剂与非甾体抗炎药治疗膝骨关节炎(KOA)的疗效及安全性。方法手工和在线检索尪痹制剂治疗KOA的随机对照试验文献,电子数据库包括中国期刊全文数据库(CNKI)、中国学术期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国科技期刊全文数据库、PubMed、Embase。依据纳入标准筛选合格研究并提取数据,采用Cochrane协作组评分方法行偏倚风险评估、方法学质量评价,Revman软件实施异质性检验、Meta分析、绘制倒置漏斗图等方法分析相关数据。结果纳入4篇临床研究文献,全部研究均报道了有效率及不良反应率,Meta分析结果显示,与非甾体抗炎药比较,尪痹制剂治疗OA有效率较高[OR=5.76,95%CI(2.43,13.65),Z=3.97,P0.0001],且不良反应率较低[OR=0.09,95%CI(0.03,0.25),P0.000001],但在改善关节疼痛方面,二者比较差异无统计学意义[MD=-0.13,95%CI(-0.36,0.11),P=0.29]。尪痹制剂组红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)均低于非甾体抗炎药组。结论基于目前证据,尪痹制剂可以有效治疗KOA,安全性较好,但鉴于较低的纳入研究质量以及本研究的局限性,目前证据尚难以得出较可靠的结论。     

基于Nrf2通路研究二仙解毒方对弱精子症大鼠精子微环境的影响*

目的基于Nrf2信号通路研究二仙解毒方对弱精子症模型大鼠精子微环境的改善作用及可能机制。方法 使用奥硝唑法构建成熟雄性大鼠弱精子症模型,随机分为模型组、二仙解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组、左卡尼汀组,每组各12只,连续灌胃4周后,检测各组大鼠精子浓度、精子活动力、相关氧化应激指标、大鼠睾丸及附睾中基于Nrf2蛋白表达及mRNA表达。结果 二仙解毒方可增强弱精子症模型大鼠精子活动力,剂量越高,氧化应激指标改变越显著,二仙解毒方高剂量组可将模型组大鼠的精液抗氧化能力恢复至正常大鼠水平;二仙解毒方可促进大鼠附睾、睾丸组织Nrf2基因转录与蛋白表达。结论 二仙解毒方确有提高精子活动力的作用,其可能的作用机制为通过诱导上调生殖细胞内Nrf2 mRNA和蛋白表达,以改善弱精子症大鼠精液氧化应激状态,从而提高精子活动力。     

母婴分离/束缚应激模型小鼠海马小胶质细胞变化及温阳解郁方的调节作用

目的 观察母婴分离/束缚应激诱发焦虑抑郁小鼠海马小胶质细胞激活和白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达情况,探讨温阳解郁方抗焦虑抑郁的机制。方法 84只雄性C57BL仔鼠于出生后第0天（PD0）随机分为空白组、束缚应激组和造模组,造模组采取母婴分离结合束缚应激制备焦虑抑郁模型,将造模组按随机数字表法分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组。在离乳第21天（PD21）至成年第90天（PD90）,空白组、束缚应激组和模型组饲喂正常饲料,其余饲喂药混饲料（温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组用药剂量分别为5.85,12.03,16.71 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。采用旷场实验,O迷宫和社会交互实验评估模型组小鼠焦虑抑郁状态;免疫组化法（IHC）观察海马小胶质细胞及离子钙接头蛋白-1（Iba-1）表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测IL-1β,IL-6,TNF-α,Iba-1,糖皮质激素受体（GR）mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著减少（P<0.01）,开臂活动时间与活动总路程明显减少（P<0.05,P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间显著增加（P<0.01）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,GR mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,IHC结果显示小胶质细胞的过度激活。与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著上升（P<0.01）,开臂活动时间显著上升（P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间明显降低（P<0.05,P<0.01）;Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,GR mRNA表达水平显著上升（P<0.01）,IHC结果表明小胶质细胞的形态恢复;温阳组和解郁组小鼠开臂活动时间显著上升（P<0.01）,辨别探查时间明显降低（P<0.05）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-6 mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;温阳组小鼠GR mRNA表达水平明显上升（P<0.05）,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05）;解郁组小鼠5 min运动总路程显著上升（P<0.01）,训练探察时间明显降低（P<0.05）,IL-1β mRNA表达水平明显降低（P<0.05）,IHC结果表明两组小胶质细胞有所恢复。结论 温阳解郁方的综合疗效和药理作用优于温阳方和解郁方,其作用机制可能通过抑制母婴分离/束缚应激小鼠海马小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等细胞因子的表达,增加海马GR表达,从而改善小鼠的焦虑抑郁样行为。     

基于网络药理学的济生肾气丸治疗骨质疏松症的分子机制研究

目的应用网络药理学分析技术研究济生肾气丸治疗骨质疏松症(OP)的分子作用机制。方法通过TCMSP数据库查询并筛选出济生肾气丸全方共10味中药的活性成分及有效靶点;检索Comparative Toxicogenomics Database (CTD)、Gene Cards、Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)三大疾病靶点数据库查询骨质疏松症相关靶点;利用Venny 2.1统计复方与疾病的交集靶点,并绘制Venn图。利用Cytoscape 3.6软件,绘制活性成分-交集靶点网络图。将交集靶点导入String数据库后获得的数据经Cytoscape的Cyto Hubba插件构建蛋白互作网络图。通过DAVID数据库进行基因功能GO分析和KEGG通路富集分析,并利用R-studio软件进行气泡图绘制。利用Cytoscape绘制核心靶点与KEGG通路的网络图。结果济生肾气丸中共得到63个活性成分,预测出211个相关靶点;经过三大数据库共检索出OP相关靶点3 126个;复方与疾病交集靶点132个。通过Cytoscape构建交集基因蛋白互作网络图与核心靶点-通路网络图,按照连接节点(degree)大小排列显示济生肾气丸主要通过作用于AKT1、MAPK1、IL6、MAPK8、JUN、VEGFA等靶基因及调控肿瘤坏死因子信号通路、白细胞介素17信号通路、AGE-RAGE信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化信号通路等发挥治疗OP的作用。结论济生肾气丸治疗OP具有多成分、多靶点、多系统的特点,其作用机制可能通过抑制破骨细胞的生成、刺激成骨细胞的活性、调节骨代谢平衡、降低炎症反应等途径有关。     

柴贝止痫汤添加治疗难治性癫痫复杂部分性发作的临床研究

目的观察评价刘金民教授治疗难治性癫痫经验用方柴贝止痫汤联合抗癫痫药物(anti-epileptic drugs,AEDs)治疗难治性癫痫复杂部分性发作的临床疗效和安全性。方法选择符合诊断和纳入标准的病例60例,随机分为治疗组和对照组,分别给予AEDs添加柴贝止痫汤及单纯的AEDs治疗。定期随诊并记录治疗后患者的痫性发作频率、中医症状积分及不良反应等。以痫性发作频率、中医症状积分及脑电图异常程度的改善程度作为疗效判定标准。结果在改善患者的痫性发作频率方面,经Wilcoxon秩和检验,治疗12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05);经χ2检验,治疗8周、12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。在改善患者的中医症状积分方面,经Repested Measures检验(Greenhouse-Geisser法校正),治疗4周、8周、12周的不同观测时点、观测时点与组别的交互作用及组别之间的差异均具有统计学意义(P0.05);经χ2检验,治疗8周、12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05);经秩和检验,治疗4周后,在失眠症状积分上,治疗组疗效优于对照组(P0.05),治疗8周、12周后,在胸闷、痰多、疲乏、失眠四个症状积分上,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。结论柴贝止痫汤添加用药治疗难治性癫痫复杂部分性发作,在改善患者的痫性发作频率及中医症状积分上均有明显的优势,且随着疗程的延长,疗效逐渐显著,未发现任何不良反应。柴贝止痫汤添加治疗难治性癫痫复杂部分性发作安全、有效。     

经方桃核承气汤在男科疾病中的应用研究进展

桃核承气汤功效在于泄热逐瘀,其主要病机是瘀热互结下焦、气血凝滞不通。通过系统收集近年来的相关文献,发现临床研究及实验研究均证实其可用于治疗多种男科疾病,如:慢性前列腺炎、前列腺增生、附睾炎、精囊炎、勃起功能障碍和男性不育等;尤其是对Ⅲ型前列腺炎患者,实验研究及临床研究数据显示其具有良好疗效;在附睾炎、精囊炎、勃起功能障碍、男性不育中亦有报道显示其具有良好疗效,但报道较少,尚需要更多的研究加以验证;现就详细内容综述如下。     

胫骨结节下单平面开放胫骨高位截骨术治疗内侧间室膝骨关节炎的近期效果观察

目的观察胫骨结节下单平面开放胫骨高位截骨术(OWHTO)治疗内侧间室膝骨关节炎(KOA)的临床疗效和安全性。方法选取2017年6月至2019年1月在北京中医药大学东直门医院和北京中医药大学第三附属医院接受胫骨结节下单平面OWHTO治疗的KOA患者50例(51膝)为研究对象,观察术中有无胫骨外侧合页骨折、术后截骨区愈合情况、随访期间并发症发生情况;比较患者手术前后胫骨后倾角、Insall-Salvatti(I-S)指数、股胫角、下肢负重线比率;比较手术前后膝关节疼痛视觉模拟评分(VAS)和美国膝关节协会评分(KSS)。结果患者均顺利完成手术,术中有1例出现胫骨结节骨折,对症治疗后愈合良好,术后3个月内截骨部位均达到骨性愈合。随访期间无感染、血栓、内固定系统松动及断裂等并发症发生。手术后胫骨后倾角较术前变小[(9. 43±1. 83)°比(8. 64±2. 32)°],下肢负重力线比率升高[(26. 04±15. 33)%比(62. 38±4. 06)%],股胫角变小[(180. 83±5. 01)°比(171. 15±2. 18)°](P <0. 05);术后KSS临床和功能较术前升高[(56. 3±11. 3)比(85. 6±4. 1)分]、[(46. 33±9. 35)比(80. 3±10. 7)分],VAS降低[(6. 9±1. 0)比(1. 9±0. 9)分](P <0. 05),I-S指数与术前相比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论胫骨结节下单平面OWHTO可以纠正患者的下肢力线,有效缓解症状,且避免了胫骨后倾角的增大和低位髌骨的出现;术中对胫骨外侧合页钻孔道分散了骨皮质的应力,减少了胫骨外侧合页骨折的发生。