基于Wnt/β-catenin信号通路探讨太白楤木抗去卵巢大鼠骨质疏松症的作用和机制

目的 探索太白楤木对去卵巢大鼠骨质疏松症以及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 40 只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆胶囊组（0.3 g/kg）、太白楤木低剂量组（0.4 g/kg）和太白楤木高剂量组（0.8 g/kg）,每组8 只,除假手术组外其余组进行去卵巢手术。术后灌胃给药12周,三点弯曲试验测定骨生物力学性能,Micro-CT检测骨密度和微结构,ELISA法检测血清骨代谢指标,HE染色观察胫骨病理改变,Western blot法测定骨组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达情况。结果 经过12周治疗,与模型组相比,太白楤木高剂量组显著增大最大载荷、刚度和最大应力(P＜0.01),提高去卵巢大鼠骨密度(P＜0.01),保护骨小梁微结构不被破坏,骨吸收标志物NTX-Ⅰ和TRAP水平降低(P＜0.01),骨形成标志物BALP水平升高(P＜0.01),Wnt3a、β-catenin和RUNX2蛋白表达量升高(P＜0.01),p-β-catenin蛋白水平降低(P＜0.01)。结论 太白楤木对去卵巢大鼠生物力学性能、骨密度和骨微结构具有保护作用,太白楤木调节骨代谢可能和激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

窝儿七化学成分研究

目的研究窝儿七乙酸乙酯部位的化学成分。方法采用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等色谱技术进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据进行分析和结构鉴定。结果从窝儿七乙酸乙酯部位中分离鉴定了7个化合物,分别为:棕榈酸(1)、3-O-甲基-槲皮素(2)、β-谷甾醇(3)、鬼臼毒酮(4)、鬼臼毒素糖苷(5)、山荷叶素糖苷(6)、胡萝卜苷(7)。结论其中,化合物1和2为首次从该植物中分离得到。     

款冬花配方颗粒的质量标准研究

目的:为建立款冬花配方颗粒的质量标准提供参考。方法:采用薄层色谱法(TLC)对款冬花配方颗粒进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定款冬花配方颗粒中款冬酮的含量,色谱柱为Thermo ODS Hypersil C_(18),流动相为甲醇-水(85∶15,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果:款冬酮TLC图斑点清晰、分离度良好,阴性对照对测定无干扰。款冬酮检测质量浓度的线性范围为1.39～27.75μg/mL(r=0.999 9);定量限、检测限分别为0.153 87、0.051 42μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率为97.12%～103.96%(RSD=2.60%,n=6)。结论:该方法操作简单、准确、重复性好,可用于款冬花配方颗粒的质量控制。     

小花草玉梅中一个新的三萜皂苷

目的研究小花草玉梅的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶色谱、制备薄层色谱等色谱技术分离纯化,经NMR、MS波谱解析,结合理化性质鉴定化合物结构。结果从该植物中分离鉴定了1个三萜皂苷化合物,命名为:3-O-{β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-O-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)]-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基}-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。结论经Sci Finder数据库检索确定该化合物为新化合物。     

热者寒之细胞中药学初探

目的用热药造热证细胞模型,研究"热者寒之"的基本治则对于细胞来说是否适用。方法分别用白胡椒50μg/m L、荜菝50μg/m L、高良姜100μg/m L、吴茱萸10μg/m L、肉桂20μg/m L进行造模,再以黄连、虎杖、白薇3味寒药分5~800μg/m L 8个浓度梯度分别进行逆转。结果黄连、虎杖和白薇对5种热药所造模型可以完全逆转,这与动物实验结果一致。结论 "热者寒之"这一中医基本治则在细胞水平上是适用的,并将丰富细胞中药学的内容。     

脑心通胶囊HPLC-DAD指纹图谱研究

目的建立脑心通胶囊HPLC-DAD指纹图谱分析方法,对复方中主要特征峰进行归属和指认。方法采用Waters SunFire C_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),乙腈-0.1%甲酸,柱温30℃,流速1.0 mL·min~(-1),进样量5μL,进行梯度洗脱;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2004A版)进行相似度评价;将脑心通胶囊高效液相色谱指纹图谱与各单味药高效液相色谱指纹图谱进行比对,利用色谱峰保留时间确定脑心通胶囊主要色谱峰来源归属。结果 15批脑心通胶囊相似度均≥0.977,表明脑心通胶囊化学成分一致性良好;脑心通胶囊HPLC-DAD指纹图谱中共检出33个特征峰,均可以溯源到黄芪、赤芍、丹参等12味药材,其中13个特征峰可以明确其化学成分归属。结论建立的脑心通HPLCDAD指纹图谱分析方法,操作简单、准确,精密度、重复性好,可用于表征脑心通胶囊中化学成分信息,提高了对大复方制剂质量控制的专属性,为脑心通胶囊质量控制提供了可靠的科学依据。     

基于生物活性导向分离及灰色关联度分析的山楂核干馏液抗炎和抗菌作用物质基础研究

目的 研究山楂核干馏液抗炎和抗菌的主要物质基础。方法 使用干馏釜制备山楂核干馏液;通过大孔吸附树脂柱色谱对干馏液进行分离;基于气相色谱-质谱法对山楂核干馏液进行分析;以脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7生成一氧化氮模型评价山楂核干馏液的抗炎作用,采用微稀释法评估其体外抑制白色念珠菌生长活性,采用灰色关联度分析法建立其谱效关系,以评估其抗炎和抗菌活性,并筛选主要活性化合物。结果 山楂核干馏液及其4个亚流分具有明显的抗炎作用和抑制白色念珠菌生长作用,其中Fr.B的抗炎和抗菌作用均较强。从山楂核干馏液4个流分的色谱图中确定12个共有峰,其中发挥主要抗炎作用的成分为4、6、2、9号峰,质谱分析鉴定4个峰分别对应2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、1,2,5-三甲氧基-3-甲基苯、2,6-二甲氧基苯酚和乙酰丁香酮;发挥主要抗菌作用的成分为4、2、9、11号峰,质谱分析鉴定这4个峰分别对应2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、2,6-二甲氧基苯酚、乙酰丁香酮和二氢芥子醇。结论 山楂核干馏液具有较好的抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞生成一氧化氮的作用,同时对白色念珠菌的生长具有显著的抑制作用,明确了山楂核干馏液中2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、1,2,5-三甲氧基-3-甲基苯、2,6-二甲氧基苯酚和乙酰丁香酮4个成分对其抗炎作用贡献最大,2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、2,6-二甲氧基苯酚、乙酰丁香酮和二氢芥子醇对其抗菌作用贡献最大。研究结果为山楂核资源的开发利用及相关产品质量标准的制定提供参考。     

干旱胁迫下药用大黄根部药效成分及根际土壤微生物变化规律及其相互作用机制研究

为探讨植物在水分亏缺下土壤微生态环境、次生代谢产物含量的变化规律以及两者相互作用的反应机制,以三叶期药用大黄为研究对象,采用盆栽控水实验,对不同干旱梯度(正常供水、轻度、中度、重度干旱)下大黄的响应机制进行研究。结果表明：不同干旱胁迫水平下药用大黄根部黄酮类、酚类、萜类以及生物碱类化合物含量变化明显,轻度干旱胁迫下大黄药效成分含量较高,其根部芦丁、大黄素、没食子酸、(+)-儿茶素含量显著升高,重度干旱胁迫下芦丁、大黄素、没食子酸含量显著低于正常供水。种植药用大黄的根际土壤中细菌数目、多样性、丰富度和优势度指数均显著高于空白土壤,随干旱程度加剧,大黄根际土壤微生物物种数目、丰富度指数降低。水分亏缺下蓝藻菌门、厚壁菌门、放线菌门、绿弯菌门、芽单胞菌门以及链霉菌属、放线菌属等是药用大黄根际的优势菌群。药用大黄根部芦丁、大黄素相对含量与蓝藻菌门、厚壁菌门相对丰度呈正相关,(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素没食子酸酯相对含量与拟杆菌门、厚壁菌门相对丰度呈正相关。综上所述,适当的干旱胁迫能从生理诱导和增加与有益微生物之间的联系2个方面,提高药用大黄根部次生代谢产物含量。     

川乌和附子的毒性与热性的细胞实验研究

目的:研究川乌和附子的毒性与热性之间的关系,探讨本实验室前期建立的评价寒热药性的方法是否适用于有毒中药。方法:用噻唑蓝(MTT)比色法考察川乌和附子对Hela细胞体外增殖的影响,倒置显微镜观察对细胞形态特征的影响。结果:川乌、附子在所选浓度范围(5~800μg/m L)内对细胞增殖的影响皆表现为抑制。形态学观察表明川乌和附子在≤10μg/m L时使细胞密度增加,促进细胞的生长增殖。而当浓度≥10μg/m L时使细胞密度减小,死亡细胞增加,而细胞形态变化不大。台盼蓝染色表明川乌和附子在低浓度下没有细胞毒作用,而在高浓度下对这试药细胞具有细胞毒作用。结论:研究结果表明川乌和附子性热,在低浓度下表现为热性,而在高浓度下表现为细胞毒作用,可以杀死细胞。本实验室前期建立的评价寒热药性的方法适用于有毒中药。     

复方威灵仙胶囊对小鼠免疫功能的影响

目的探讨复方威灵仙(Cpd.WLX)胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法将实验小鼠随机分为Cpd.WLX胶囊高剂量组(1.8g·kg-1)、Cpd.WLX胶囊中剂量组(0.9g·kg-1)、Cpd.WLX胶囊低剂量组(0.45g·kg-1)、阳性对照组(泼尼松片0.03g·kg-1)及空白对照组。选用碳廓清实验、溶血素抗体实验、DNFB所致DTH实验模型,观察Cpd.WLX胶囊对小鼠免疫功效的影响。结果与空白对照组比较,Cpd.WLX胶囊大、中、小剂量组:碳廓清指数K及校正指数α均显著降低(P<0.05,P<0.01);上清液在540nm处的A值显著降低(P<0.001);对DNFB诱导小鼠耳廓肿胀度影响无显著性(P>0.05)。结论 Cpd.WLX胶囊在机体非特异性免疫和体液免疫作用方面具有较强的抑制作用。