健脾化痰方对裸鼠前胃癌肝转移作用及其机制的研究

目的 探讨健脾化痰方对裸鼠前胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)肝转移的影响及其作用机制.方法 将MFC细胞接种于裸鼠脾脏,建立裸鼠肝转移模型后用随机数字表法分为模型组、5-fu注射液组及健脾化痰方高、中、低剂量组,健脾化痰方高、中、低剂量组分别灌胃80、40、20g/kg的健脾化痰方煎剂,5-fu组腹腔注射60mg/kg 5-fu注射液,模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,共4周.实验结束时计算裸鼠体重、脾脏瘤重,评估肝脏转移情况,用RT-PCR法、免疫组织化学法分别检测P53、Bcl-2基因和相应蛋白表达的情况.结果 与模型组比较,健脾化痰方中剂量组、高剂量组裸鼠体重[(21.40±1.43)g、(21.70±1.02)g比(20.37±1.17)g]明显增加(P<0.05),脾脏瘤重[(0.26±0.13)g、(0.16±0.05)g比(0.63±0.17)g]明显减轻(P<0.05);健脾化痰方中、高剂量组裸鼠肝脏表面转移瘤数目较少(P<0.05);与模型组比较,健脾化痰方低、中、高剂量组P53 mRNA表达[(8.32±0.38)、(5.42±0.45)、(3.09±0.26)比(9.67±1.31)]、Bcl-2 mRNA表达[(4.65±0.61)、(3.22±0.21)、(2.49±0.19)比(5.32±0.42)]均降低(P<0.05);健脾化痰方低、中、高剂量组脾脏接种瘤组织中P53蛋白的阳性表达率[(76.11±5.23)、(45.20±3.77)、(23.11±3.14)比(81.63±5.01)]均低于模型组(P<0.05),Bcl-2蛋白[分别为(58.67±5.27)、(32.00±3.13)(19.00±2.54)比(63.00±4.10)]均低于模型组(P<0.05).结论 健脾化痰方可抑制裸鼠前胃癌移植瘤的生长及肝转移,下调P53、Bcl-2基因和相应蛋白的表达.     

参仙合剂联合化疗对晚期气阴两虚型肺癌患者淋巴细胞亚群及生活质量的影响

目的 探讨参仙合剂联合化疗对晚期气阴两虚型肺癌患者淋巴细胞亚群及生活质量的影响.方法 选取53例晚期气阴两虚型肺癌患者,按随机数字表法分为试验组27例和对照组26例.对照组仅进行化疗,试验组在对照组的基础上加用参仙合剂.观察两组患者治疗前及治疗2周期后淋巴细胞亚群及生活质量的变化.结果 治疗后,试验组患者CD4+、CD4+/CD8+、CD16+56+、情绪、总生活质量、疲乏、气促及肺癌相关症状评分等方面的改善程度优于对照组(均P<0.05).结论 参仙合剂联合化疗可提高晚期气阴两虚型肺癌患者免疫功能、改善患者生活质量.     

重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤组织生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路的影响

目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对荷人胃癌裸鼠移植瘤生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路相关的肿瘤血管生成因子的影响.方法 采用免疫细胞化学染色法筛选出生长激素受体阳性(GHR+)和阴性(GHR-)细胞株各1株,分别接种于裸鼠皮下,建立GHR不同表达状态胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组、低剂量rhGH组和高剂量rhGH组,连续给药14 d,观察并记录裸鼠体重及肿瘤体积的变化,RT-PCR、Western-bolt检测肿瘤血管生成因子mRNA及蛋白表达.结果 SGC-7901细胞株GHR强阳性表达,MKN-45不表达GHR.SCC-7901接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组肿瘤体积[(1.141±0.234)和(2.106±0.260)cm3]较对照组[(0.612±0.156)cm3]增大(P=0.034,P=0.001),高剂量rhGH促增长效应最为显著(P=0.043),各组问裸鼠体重差异无统计学意义;低剂量rhGH可促SGC-7901血管生成因子mRNA表达,GHR、Janus激酶2、信号转导与转录激活因子3、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的P值分别为:0.001、0.011、0.042、0.045、0.040、0.002和0.003,但高剂量组未增加;低剂量rhGH组血管生成因子的蛋白表达水平明显升高,磷酸化信号转导与转录激活因子3、信号转导与转录激活因子3、VEGF、HIF-1α和MMP-2的P值分别为:0.015、0.003、0.010、0.008和0.005,高剂量组VEGF、HIF-1α和MMP-2较低剂量组表达增加(P=0.012,P=0.025,P=0.046).MKN-45接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组裸鼠体重[(24.94±0.517)和(26.97±0.686)g]较对照组[(22.78±0.418)g]增加(P=0.040,P=0.012),肿瘤体积、血管生成因子mRNA及蛋白水平各组之间差异无统计学意义.结论 rhGH促GHR+的SGC-7901移植瘤生长,并促肿瘤血管生成因子的分泌,对GHR-的MKN-45则无此效应;GHR的表达情况是rhCH影响肿瘤生长及肿瘤血管生成因子表达的关键靶点之一,Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路是其可能途径.     

灵芝多糖对辐射损伤小鼠的防护作用

目的：辐射可引起多种组织器官的损伤。文中旨在探讨灵芝多糖对受60 Coγ射线损伤小鼠的辐射防护作用,为灵芝多糖的临床应用提供实验依据。方法采用大剂量60 Coγ射线全身照射雌性小鼠,制成放射损伤动物模型。小鼠按随机数字表法分为正常对照组、灌胃对照组、辐射对照组、灵芝多糖高剂量保护组、灵芝多糖低剂量保护组。灵芝多糖保护组小鼠在照射前3 d及照射后,以不同剂量的灵芝多糖连续灌胃14 d。观察受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的30 d存活率及生存时间长短。同时,检测用药后外周血指标、脾指数、血清超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase, SOD）活性的变化。结果实验结束时,灵芝多糖组小鼠的30 d生存期[（23．7±6．8）、（28．3±5．9）d]显著高于辐射对照组[（18．3±5．4）d],差异有统计学意义（P＜0．01）;灵芝多糖组小鼠的外周血WBC[（2．89±0．67）×109／L、（2．77±0．72）×109／L]显著高于辐射对照组[（2．54±0．63）×109／L],差异有统计学意义（P＜0．05）,且灵芝多糖组PLT 数[（487．20±165．77）×109／L、（716．36±223．44）×109／L]显著高于辐射对照组[（387．45±154．22）×109／L],差异有统计学意义（P＜0．05）;灵芝多糖高剂量组脾指数显著高于辐射对照组[（0．0054±0．0021） vs （0．0032±0．0007）, P ＜0．05）];灵芝多糖组小鼠的血清 SOD 含量[（401．27±35．26）、（369．02±29．70）U／mL]明显高于辐射对照组[（311．32±23．71）U／mL],差异有统计学意义（P＜0．05）结论灵芝多糖具有较强的抗辐射作用,能显著提高受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的存活率,降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用,并提高SOD活性,其具体作用机制有待进一步深入研究。     

肿瘤相关成纤维细胞的生物学特征及Transwell共培养对胃癌细胞生长和转移的影响

目的培养原代人胃癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),探究生物学特性及对胃癌细胞影响。方法 CAFs和NFs分离培养后,MTT法绘制生长曲线,免疫荧光法、Western blot、qRT-PCR检测α-SMA和Vimentin表达。MGC-803与CAFs、NFs进行Transwell共培养,Transwell法检测胃癌迁移和侵袭,MTT法比较细胞活力及AMD3100影响,pH计、乳酸酶法、DCFH-DA法测定共培养体系酸化、乳酸及活性氧(ROS)含量。结果 CAFs、NFs呈长梭形、多角形等,CAFs增殖和重叠生长现象均高于NFs。CAFs细胞α-SMA和Vimentin为阳性表达,而NFs为低表达或阴性。胃癌细胞活力低密度共培养组>中密度组>高密度组,CAFs共培养体系出现pH值降低,乳酸、ROS含量高现象,且只有CAFs-低密度共培养组促癌效果明显。结论胃癌细胞与CAFs、NFs共培养受比例影响较大,低密度共培养更能明显提高胃癌细胞的增殖和迁移能力,而高密度共培养可能会反过来抑制肿瘤细胞的增长和转移,可能与乳酸、ROS含量有关。     

黄芪桂枝五物汤对化疗致大鼠周围神经损伤的作用

目的 评价黄芪桂枝五物汤对化疗致大鼠周围神经损伤的保护作用.方法 将55只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、甲钴胺组、黄芪桂枝五物汤低、高剂量组,每组11只.除空白组,其余各组采用多次腹腔注射奥沙利铂的方式建立大鼠周围神经损伤模型,黄芪桂枝五物汤高、低剂量组分别采用黄芪桂枝五物汤19.40g/kg·d、4.85g/kg·d灌胃,连续50天;甲钴胺组腹腔注射甲钴胺注射液104μg/kg,每周2次;模型组给予黄芪桂枝五物汤低、高剂量组等体积的生理盐水灌胃,连续50天;空白组每周2次等体积腹腔注射5％葡萄糖及灌胃等体积生理盐水.分别于给药第1、10、13、20、27、34、42、48天进行大鼠机械性缩足阈值及大鼠尾部热痛觉潜伏期测试.给药结束后,处死大鼠,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测L4-6脊髓NR2B mRNA水平的影响,免疫组织化学法检测L5背根神经节(DRG)中pNF-H的表达. 结果 第13天后各时间点,模型组的大鼠机械性缩足阈值与空白组比较明显下降(P＜0.05);黄芪桂枝五物汤低、高剂量组、甲钴胺组与模型组比较明显增高(P＜0.05);第42、48天,黄芪桂枝五物汤低、高剂量组与甲钴胺组比较机械性缩足阈值差异有统计学意义(P＜0.05);各组大鼠不同时间点热辐射甩尾反应时间比较差异均无统计学意义(P＞0.05);与空白组比较,模型组NR2B mRNA水平升高(P＜0.01),黄芪桂枝五物汤低、高剂量组大鼠NR2B mRNA水平较模型组降低(P＜0.01);黄芪桂枝五物汤低、高剂量组pNF-H阳性细胞数量较多,胞体肥大,染色加深,呈多角形或圆形.结论 黄芪桂枝五物汤可改善化疗致大鼠周围神经毒性,其机制可能是通过下调大鼠L4-6脊髓中NR2B的表达以及上调DRG中pNF-H蛋白水平来介导.     

中西医治疗奥沙利铂神经毒性的研究进展

奥沙利铂是第三代铂类抗肿瘤药物,被广泛应用于多种恶性肿瘤。但奥沙利铂神经毒性限制了其在临床中的应用,因此如何预防和减轻奥沙利铂神经毒性已引起广泛关注,中西医治疗均有一定的作用,但疗效尚不满意。     

重组人生长激素体外激活人结肠癌细胞JAK2-STAT3通路

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对不同生长激素受体（GHR）表达状态的人结肠癌细胞生长及JAK2-STAT3通路的影响。方法采用流式细胞术根据GHR表达状态不同筛选结肠癌细胞株,选择LOVO细胞株和HCT-8细胞株进入实验,采用MTT法分析rhGH对人结肠癌细胞生长的作用,采用流式细胞术进行细胞增殖指数（PI）、细胞周期分析及凋亡检测,采用蛋白质印迹法分析JAK2-STAT3通路相关分子的蛋白水平变化。结果HCT-8细胞株GHR呈阳性表达（59．6％）,LOVO细胞株GHR呈阴性表达（3．5％）。rhGH显著促进HCT-8细胞生长,G2／M期比例明显高于未处理组（P=0．0073）,PI升高,凋亡率降低,且pJAK2、pSTAT3、VEGF、CyelinD1、Bcl-xL蛋白表达增加。经rhGH处理后,LOVO细胞的上述各项检测指标未出现明显变化。结论rhGH促进GHR表达较高的HCT-8细胞生长,上调JAK2-STAT3信号转导通路多个关键节点的基因表达;不促进GHR低表达的LOVO细胞生长及JAK2-STAT3通路因子表达变化。     

复方斑蝥胶囊合复方红豆杉方加减治疗三阴乳腺癌临床观察

目的：观察复方斑蝥胶囊合复方红豆杉方加减治疗三阴乳腺癌的临床效果。方法：42例三阴乳腺癌患者分为2组,治疗组加用复方斑蝥胶囊合复方红豆杉方加减治疗并定期复查,对照组单纯定期复查,连续观察5年,比较2组的复发转移情况。结果：治疗组总有效率为95.2%;对照组总有效率为71.4%。2组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：复方斑蝥胶囊合复方红豆杉方加减治疗三阴乳腺癌有一定疗效,能有效预防术后复发转移。