基于MAPKs和NF-κB信号通路的麻黄-桂枝药对抗炎作用机制研究

目的:考察麻黄-桂枝药对对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法:体外培养RAW264.7细胞,CCK8法确定麻黄-桂枝作用的最适浓度,设定正常对照组、模型对照组(LPS组)、实验组(25、50、100、200μg/mL的麻黄-桂枝+LPS组),实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA的表达,Western blot法检测MAPKs和NF-κB通路中关键蛋白的表达水平。结果:麻黄-桂枝作用的最适浓度为25μg/mL～200μg/mL。与正常对照组比较,模型对照组NO、PGE_2、TNF-α、IL-6含量显著升高,iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝100μg/mL～200μg/mL组iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。LPS致炎后,与正常对照组比较,模型对照组30 min P-p65、P-IκB-α、P-p38、P-ERK、P-JNK蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝各组30 min P-p65、P-IκB-α、P-JNK蛋白表达显著降低、P-ERK显著升高(P<0.01)、P-p38无显著差异,12 h后P-p38和P-ERK表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:麻黄-桂枝可能通过对炎症细胞因子和促炎介质的调控来减轻炎症反应;并通过调控NF-κB信号通路中p65、IκB-α以及MAPKs信号通路中p38、ERK、JNK蛋白的磷酸化来发挥抗炎作用。     

川芎嗪对免疫介导骨髓衰竭小鼠肾脏氧化应激的影响

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对免疫介导的骨髓衰竭(BMF)小鼠肾脏氧化应激的影响。方法将C57小鼠随机分成正常对照组、单纯辐照组(TBI)、模型组、TMP低剂量组(5 g·L~(-1))、TMP中剂量组(10 g·L~(-1))、TMP高剂量组(20 g·L~(-1))。C57小鼠经5.0 Gy X射线全身辐照和淋巴细胞输注,建立BMF模型。观察14 d后小鼠外周血三系细胞、骨髓有核细胞、骨髓病理学、肾脏病理学及氧化应激等指标。结果模型组骨髓病理显示有核细胞减少,外周血三系明显降低,说明成功建立免疫介导BMF模型;模型组肾脏病理显示肾小管水肿,氧化应激指标MDA升高,抗氧化应激指标GSH、SOD、GSH-Px下降,提示BMF小鼠肾脏存在氧化应激损伤。经TMP治疗后,肾脏病理未见明显异常,肾脏中MDA下降及GSH、SOD上升,免疫组化结果显示,HIF-1α表达下降,并出现VEGF表达。结论 TMP可减轻免疫介导的BMF小鼠肾脏氧化应激损伤,可能与调节HIF-1α/VEGF表达有关。     

鼻咽癌初诊患者中医证候与TGF-β1相关研究

[主要目的]分析鼻咽癌初诊患者中医不同证候与TGF-β1相关性。[资料来源]在广州中医药大学附属顺德中医院肿瘤科选择2012年9月至2014年6月鼻咽癌初诊住院患者。[选择文献量及依据]纳入1年龄23~71岁。2病理确诊为鼻咽癌。3未进行放化疗。4拟行首次放疗和(或)化疗。5知情同意,签署知情同意书。排除精神病;调查研究不配合;肝肾功能障碍。共209例住院患者。[数据提炼规则及应用方法]两名副主任中医师按照《肿瘤中医诊疗指南》辨证分型。受检者采血前禁食>12h,次晨抽取静脉血。血清收集方法--用干净试管收集血液,室温凝固30min,离心1000×g 10min。分装后-70℃冷冻保存,待测。血清中TGF-β1均采用人转化生长因子beta1 ELISA试剂盒进行检测。SPSS11.5统计软件行描述性分析,正态分布数据经方差齐性检验后独立样本t检验,相关性分析采用Sperman检验。[数据综合得出结果与结论]肝郁痰阻101例,血瘀阻络55例,热邪犯肺33例,气阴两虚20例。血瘀阻络>肝郁痰阻>气阴两虚>热邪犯肺。血瘀阻络鼻咽癌初诊患者较其他证型鼻咽癌初诊患者远期预后差可能与血清TGF-β1高水平表达有一定关系;热邪犯肺鼻咽癌初诊患者较其他证型远期预后好可能与血清TGF-β1低水平表达相关。[未来展望]本研究收集标本有限,今后研究会进一步收集更多标本,期待鼻咽癌的中医证候规范化研究更加深入。     

红芪多糖3促进小鼠脾淋巴细胞增殖的差异蛋白质点分析

目的:分析红芪多糖3(HPS-3)作用于小鼠脾淋巴细胞后的差异蛋白质点,探讨红芪多糖3调节免疫的分子生物学机制。方法:提取正常小鼠脾淋巴细胞进行体外培养,用MTT法检测红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激增殖作用,ELISA试剂盒测定培养上清中的IL-2含量,并运用双向电泳技术对脾淋巴细胞总蛋白进行分离,银染显色,PDQuest软件对凝胶图谱进行差异点分析,找出差异明显的蛋白质点。结果:HPS-3能够提高T淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌,实验所得2-DE凝胶图谱经PDQuest软件分析得出以下结果:HPS-3组中共有16个蛋白点发生明显改变,其中11个蛋白质点高表达,4个蛋白质点消失,1个蛋白质点低表达。结论:HPS-3能促进脾淋巴细胞增殖,显著影响小鼠脾淋巴细胞蛋白质表达。     

跟骨骨刺的解剖学观测及其临床意义

目的探讨跟骨骨刺的解剖学形态特点,为跟痛症的诊疗提供解剖学依据。方法在589例成人干燥的跟骨骨性标本上,仔细观察跟骨骨刺的形态结构,观测跟骨骨刺的长度和宽度。结果①跟骨骨刺生长在趾短屈肌起点,并非趾筋膜止点处;②趾筋膜止点是一个区域,并非一个点或线;③骨刺除位于内侧突外,还位于内外侧突之间、足底长韧带起点处。结论骨刺并非只位于趾筋膜的起止点,趾筋膜起止点处劳损时的压痛点不能等同于骨刺尖部。     

基于经络检测指导针刺循经取穴治疗单纯性肥胖的临床研究

目的:验证经络检测可作为疾病循经取穴依据的有效性,以期为单纯性肥胖提供新的治疗方法。方法:将招募到的单纯性肥胖患者随机分为试验组和对照组,试验组根据经络检测结果的单经分析报告进行循经取穴治疗;对照组采用传统辨证论治的方法进行治疗,10次为1个疗程,2个疗程后,观察比较两组有效率的差异及治疗前后体重、体质指数(BMI)、肥胖度、脂肪百分率的变化。结果:试验组临床痊愈1例(3.45%),显效12例(41.38%),有效11例(37.93%),无效5例(17.24%),总有效率82.76%;对照组显效4例(14.29%),有效13例(46.43%),无效11例(39.28%),总有效率60.72%。两组各项指标治疗前后比较,均有统计学意义(P<0.01),与对照组相比,试验组脂肪百分率差值具有明显差异(P<0.01)。结论:经络检测指导针刺循经取穴治疗单纯性肥胖的疗效优于传统辨证取穴法,经络检测可作为疾病循经取穴的依据。     

提拉旋转斜扳法操作时腰椎椎间盘应力及应变的有限元研究

目的　通过有限元分析方法,观察提拉旋转斜扳法操作时椎间盘应力及应变发生的变化规律,探寻手法治疗腰椎疾患的科学性和安全性。 方法　在构建的L4~5节段腰椎模型上模拟加载提拉旋转斜扳手法,观察手法作用过程中椎间盘应力的分布及变化,髓核及纤维环的位移及应变。 结果　椎间盘应力变化从右后方开始出现,以弧形向周围传递扩散,应力的变化呈递减分布。椎间盘应变最小的位置在髓核偏后,以此为中心呈圆弧状向周围递增。应变最大的位置主要发生于纤维环,特别是椎间盘右侧外缘。 结论　手法操作中应力主要集中于后侧关节突关节,椎间盘的应力变化相对较小,提示手法治疗是安全的。纤维环后外侧在操作中有较明显的应变,局部的位移变化可能是手法疗效的机制之一。     

穴位埋线治疗慢性、顽固性疾病临床观察

目的观察穴位埋线治疗慢性、顽固性疾病的临床疗效。方法收集各种慢性、顽固性疾病170例,在辨证论治指导下给予穴位埋线治疗,每隔20 d治疗1次,5次为1个疗程。记录临床疗效、治疗次数,进行统计学分析。结果治疗170例慢性、顽固性疾病患者,总有效率97.65%。其中妇科疾病31例,总有效率96.77%;消化科疾病32例,总有效率100%;五官科疾病30例,总有效率96.66%;外科疾病25例,总有效率100%;神经内科疾病27例,总有效率96.29%;其他疾病25例,总有效率96.00%。按照疾病类型统计,各科疾病比较疗效均无统计学意义(P0.05),说明穴位埋线适应证较为广泛,均能取得较好疗效。结论穴位埋线治疗慢性、顽固性疾病疗效稳定确切,值得临床推广。     

冰消散外敷辅助治疗复杂性胫骨平台骨折临床研究

目的：观察冰消散外敷辅助治疗复杂性胫骨平台骨折的临床疗效及对患者术后肿胀程度、凝血指标的影响。方法：选取85 例复杂性胫骨平台骨折患者,随机分为研究组43 例和对照组42 例。对照组给予常规术后治疗及康复指导,研究组在对照组的基础上加用冰消散外敷治疗。2 组均连续治疗7 d,治疗结束后比较2 组临床疗效,对2 组膝关节肿胀度、凝血功能、膝关节功能进行比较分析,并观察记录治疗期间并发症发生情况。结果：研究组临床总有效率为93.02%,对照组为83.33%,2 组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗前,2 组膝关节肿胀度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;治疗后,2 组膝关节肿胀度均较治疗前减小（P＜0.05）,且研究组肿胀度小于对照组（P＜0.05）。治疗后,研究组凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT） 短于对照组,纤维蛋白原（Fib） 水平低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,研究组疼痛、僵硬、膝关节功能障碍评分及总分均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗过程中,2 组切口感染、关节僵硬、创伤性关节炎等并发症发生率比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：冰消散外敷辅助治疗复杂性胫骨平台骨折疗效显著,可减轻患者膝关节肿胀程度,改善膝关节功能及凝血功能。     

HPLC-ELSD法同时测定天泰1号片中8种成分

目的建立HPLC-ELSD法同时测定天泰1号片(人参、天麻、肉苁蓉等)中天麻素、巴利森苷A、巴利森苷B、人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rd的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 m L/min。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r0.999 0),平均加样回收率96.94%~97.93%,RSD 1.06%~2.48%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于天泰1号片的质量控制。