基于网络药理学和分子对接研究淫羊藿治疗抑郁症的抗炎作用机制

目的:采用网络药理学方法预测淫羊藿治疗抑郁症的抗炎靶点及相关信号通路,探讨其抗抑郁作用的潜在机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库搜集和筛选淫羊藿的活性成分;利用PharmMapper服务器,TCMSP数据库对蛋白靶点进行预测和筛选;利用OMIM数据库,CTD数据库和GeneCards数据库筛选抑郁症的相关靶点以及抗炎靶点;通过DAVID数据库对关键抗炎靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用Cytoscape 3.6.0软件构建淫羊藿"活性成分-作用靶点-信号通路"网络图,并对网络拓扑结构分析;采用GOLD分子对接软件对活性成分与关键抗炎靶点进行结果验证。结果:筛选得到淫羊藿与抑郁症相关的12个活性成分,30个作用靶点,5个关键抗炎靶点;GO功能富集得到生物过程65个,细胞组成4个,分子功能1个,KEGG通路富集分析得到41条,其中与炎症相关的信号通路9个;分子对接验证淫羊藿苷与关键抗炎靶点能够形成最佳复合体。结论:揭示了淫羊藿通过抗炎靶点及其相关信号通路网络作用于抑郁症的分子机制,为进一步研究淫羊藿抗抑郁作用提供了基础。     

NK细胞抗肿瘤机制及相关免疫疗法的研究进展

自然杀伤(natural killer,NK)细胞作为机体固有免疫的重要成员,是抗肿瘤免疫的先行者,在肿瘤免疫方面发挥着至关重要的作用。因此,基于NK细胞的抗肿瘤免疫疗法正日益成为科学研究的新兴领域。NK细胞对多种类型肿瘤均具有细胞毒性作用,并且早期旨在增强T细胞毒性的临床手段也可同时激活NK细胞而发挥双重抗肿瘤作用。该文对NK细胞发挥抗肿瘤免疫的功能及其相关机制加以综述,总结靶向NK细胞的单克隆抗体、细胞因子疗法和过继性疗法,阐明NK细胞免疫治疗的现状及趋势,为临床研究提供思路和借鉴。     

HPLC-DAD法测定降脂合剂中5-羟甲基糠醛、苍术素、丹酚酸B的含量

目的:建立降脂合剂中5-羟甲基糠醛(5-HMF)、苍术素(atractydin)、丹酚酸B(salvianolic acid B)的高效液相含量测定方法。方法:采用Hibar ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为300 nm,柱温为35℃,进样量10μL。结果:5-羟基甲基糠醛在7.812~250.0μg·m L-1范围内线性关系良好(R2=0.999 3),回收率为100.03%(RSD=1.76%,n=5),苍术素在7.812~250.0μg·m L-1范围内线性关系良好(R2=0.999 8),回收率为100.41%(RSD=1.42%,n=5),丹酚酸B在7.812~250.0μg·m L-1范围内线性关系良好(R2=0.999 2),回收率为100.77%(RSD=2.15%,n=5),其精密度、稳定性和平均加样回收率均符合含量测定要求。结论:本法简单易行,结果准确可靠,可有效地用于降脂合剂的质量控制。     

正交试验优选定痛宁颗粒中挥发油的提取和包合工艺

目的:优选定痛宁颗粒中川芎与细辛挥发油的提取和包合工艺。方法:采用L9(3~4)正交试验法,以挥发油提取量为指标,优选挥发油的提取工艺;以包合物收得率和挥发油包合率为指标,优选β-环糊精(β-CD)的包合工艺。结果:挥发油提取最佳工艺为:加8倍量水,浸泡1h,提取6h;包合最佳工艺为:挥发油∶采用饱和水溶液法,β-CD为1∶8,在50℃包合1.5h,包合温度为。结论:优选的挥发油提取及包合工艺稳定可行。     

NOXs在肝纤维化中的作用机制研究

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NOXs)在肝纤维化中,有助于活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的产生,进而介导内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的发生及IRE1α-XBP1(inositol-requiring enzyme 1 alpha,IRE1α;X-box binding protein 1,XBP1)信号通路的激活。ROS是指分子氧(O_2)单电子还原后生成的化学性质更为活跃的一类氧代谢产物及其衍生物,包括超氧阴离子(O_2~-)、羟自由基(·OH)、过氧化氢(H_2O_2)以及次氯酸根离子(OCl~-)等。它们可以与生物体内大量分子,包括无机分子、蛋白、脂质、碳水化合物和核酸广泛互作,介导氧化还原修饰,引起脂质过氧化,进而引起肝细胞损伤。另可作为第二信使影响包括肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)在内的各种细胞的信号转导,导致HSC的异常活化和增殖,分泌大量胞外基质(extracellular matrix,ECM),进而促使肝细胞凋亡并诱发肝纤维化。该文将对近年来NOXs在肝纤维化中的作用机制研究作一综述,旨在为抗肝纤维化的研究提供新的视角和治疗靶标。     

基于实时荧光定量PCR技术的当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌含量测定方法的开发及比较

目的:对当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌的变化情况进行定量分析。方法:建立了实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR),对不同产地、不同收集企业、不同储藏时间当归饮片中金黄色葡萄球菌进行定量分析。荧光定量反应体系为SYBR Premix Ex Taq Ⅱ10μL,正向引物、反向引物(10μmol·L~(-1))各0.8μL,模板/基因组DNA 1μL,双蒸水7.4μL。荧光定量反应条件为①扩增曲线:94℃预变性30 s,94℃变性10 s,60℃退火12 s,72℃延伸30 s,循环45次,72℃单点检测信号;②熔解曲线:72℃开始检测,以0.5℃为台阶温度停留15 s采集荧光。根据Real-time PCR的测定结果,分别从生当归、酒当归和土炒当归中选择具有代表性的样品进行平板计数法测定,并与Real-time PCR检测结果进行比较。结果:不同炮制品中金黄色葡萄球菌含量排序为生当归土炒当归酒当归;在不同产地的当归饮片中均以甘肃渭源地区样品所含的金黄色葡萄球菌含量为最低;与零售企业相比,生产销售企业的生当归和酒当归中金黄色葡萄球菌含量较低;不同储藏时间对生当归和酒当归中金黄色葡萄球菌含量有一定的影响,随储藏时间的增加,金黄色葡萄球菌的含量增加。对部分代表性样品进行检测时发现,平板计数法检测结果数量级较Real-time PCR低3～4个数量级。结论:建立的Real-time PCR的特异性、灵敏度、准确性以及报告周期均优于平板计数法,可为当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌的快速、准确定量检测提供有效技术手段。     

锌指蛋白A20在过敏性哮喘中的研究进展

锌指蛋白A20(也称TNFAIP3)是一种可在多种炎症条件,如LPS、IL-1、TNF-α等刺激下,被激活的具有去泛素化和泛素化双重功能的胞质蛋白。目前,A20被认为是NF-κB的负调控因子,具有免疫调节作用。最新研究表明,A20参与了过敏性哮喘的发生和发展。因此,该文对A20的起源、结构、生物学功能及其在过敏性哮喘中的作用进行综述,以期为过敏性哮喘的治疗和预防提供新的方法和思路。     

大麻素受体在肝纤维化及肝硬化中的作用及研究进展

肝纤维化的发生与发展是一个复杂的病理和细胞生化过程,受到多种细胞因子及细胞内多种信号转导通路网络的调控。在这个复杂的调控网络中涉及到很多作用靶标,但很多靶点在肝纤维化中的作用尚没有完全定论。发生肝纤维化后,如无有效的治疗措施,最终将恶化为肝硬化。肝硬化患者的肝脏结构发生改变,导致肝脏解毒功能下降,从而使循环血液中内毒素增加,导致肝硬化失代偿期出现门脉高压、内毒血症、高动力循环综合征、肝性脑病等并发症。近年来研究发现大麻素受体参与急、慢性肝病及其并发症的改善与恢复过程,被认为是抗肝纤维化的潜在治疗靶点。该文从大麻素系统概述、大麻素受体与肝纤维化、大麻素受体防治肝纤维化的信号通路、大麻素及其受体在肝硬化并发症中的作用等方面综述了大麻素受体在肝纤维化及肝硬化中的作用及研究进展。     

专项整治后我院住院患者抗菌药物使用量与大肠埃希菌耐药率的变化及其相关性分析

目的:为指导临床抗菌药物合理应用提供参考。方法:从全国抗菌药物临床应用监测网提取我院2012年1月-2016年12月(抗菌药物专项整治后)住院患者的抗菌药物使用相关数据,统计各类抗菌药物及抗大肠埃希菌(E.coli)药物的用药频度(DDDs);统计同期E.coli的检出、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及耐药情况;采用Pearson检验考察抗菌药物DDDs与E.coli耐药率的相关性。结果:2012-2016年,我院住院患者使用DDDs最高的抗菌药物类别为头孢菌素类,其次为头霉素类和大环内酯类。抗菌药物的总DDDs基本呈下降趋势,但2016年略有反弹。2013年以后,大部分类别抗菌药物的DDDs与总DDDs的变化趋势基本一致;而青霉素类与β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂、头霉素类、碳青霉烯类、糖肽类药物的DDDs基本呈上升趋势。2012年,第二代头孢菌素是头孢菌素类药物中DDDs最高的一类;而从2013年起,第一代头孢菌素成为该类药物中DDDs最高的一类。抗E.coli药物包括哌拉西林钠他唑巴坦钠、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、氨曲南、美罗培南、庆大霉素、左氧氟沙星;2012年DDDs最高的是头孢曲松,而2016年则是头孢西丁;氨曲南的使用量减少最明显。2012-2016年,分别检出E.coli 110、132、104、131、243株;细菌产ESBLs率有所下降,分别为56.6%、57.0%、50.6%、48.4%、45.0%。E.coli对氨苄西林、头孢唑林、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑的耐药率较高,对哌拉西林钠他唑巴坦钠、头孢西丁、亚胺培南、阿米卡星的耐药率较低;对哌拉西林钠他唑巴坦钠的耐药率与头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢菌素类(第一、三代头孢菌素)、四环素类、喹诺酮类药物的DDDs和总DDDs呈正相关(r为0.880~0.929,P<0.05);对头孢他啶的耐药率与头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢菌素类(第一、二、三代头孢菌素)、四环素类、喹诺酮类药物的DDDs和总DDDs呈正相关(r为0.888~0.991,P<0.05);对头孢吡肟的耐药率与氨基糖苷类药物的DDDs呈正相关(r=0.901,P<0.05);对庆大霉素的耐药率与青霉素类与β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂、头孢吡肟的DDDs呈负相关(r分别为-0.914、-0.921,P<0.05);对亚胺培南的耐药率与头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢菌素类(第一、二、三代头孢菌素)、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类药物的DDDs和总DDDs呈负相关(r为-0.994~-0.878,P<0.05);对所有抗E.coli药物的耐药率均与其各自的DDDs无关(P>0.05)。E.coli产酶率与对庆大霉素的耐药率呈正相关(r=0.955,P<0.05),而均与对其他药物的耐药率或DDDs无关(P>0.05)。结论:经抗菌药物专项整治后,我院住院患者抗菌药物的总使用量基本呈下降趋势,结构亦有较大变化;耐药情况虽较为严峻,但细菌产酶率有所下降。临床仍应结合细菌耐药情况监测数据、药敏试验结果、抗菌药物使用量与耐药率的相关性等因素,慎重选择敏感的抗菌药物,以减少细菌耐药的发生。     

上皮间质转化与哮喘气道重塑的研究进展

支气管哮喘是一类以气道重塑为病理基础的呼吸道疾病,反复的炎性浸润与组织损伤修复可导致气道重塑,目前有关气道重塑形成的机制尚不全面。研究表明,上皮间质转化在气道重塑的发生和发展过程中发挥重要作用。气道上皮可通过分泌多种因子及信号通路诱发间质转化,进而导致哮喘气道重塑。该文对上皮间质转化与哮喘气道重塑之间的研究进行综述,为临床后续哮喘治疗和研究提供参考。