“双一流”建设背景下地方高校研究生培养模式探索

一流的研究生教育是“双一流”建设的重要基础。从健全导师责权机制、深化课程体系改革、强化共享平台建设、完善培养质量评价机制等方面，探讨我校在“双一流”建设中研究生教育改革与创新的具体举措，展示了研究生培养模式改革的初步成效，为地方高校推进“双一流”建设提供有益借鉴。     

α-干扰素和COX-2抑制剂对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的抑制作用研究

目的研究α-干扰素和环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用。方法采用MTT比色法观察不同浓度的塞来昔布和α-干扰素处理对肝癌细胞增殖的影响;通过荧光显微镜检测细胞凋亡。结果实验组与对照组相比,能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,两种药物高浓度联合作用48 h后,对肝癌细胞的生长抑制率可达92.44%±0.98%。α-干扰素和塞来昔布对肝癌细胞的增殖抑制具有协同作用。荧光显微镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡形态学改变。结论 COX-2抑制剂塞来昔布和α-干扰素对人肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖有协同抑制作用,同时能诱导其凋亡,并且呈剂量和时间依赖性,这提示α-干扰素和COX-2抑制剂塞来昔布对HCC的预防和治疗可能有积极意义。     

HPV16E6与E-钙黏蛋白在不同宫颈病变组织中的表达与临床病理特征的相关性

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV) 16E6与E-钙黏蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样变(CIN)、宫颈鳞癌中的表达意义.方法 采用免疫组化方法检测30例正常宫颈、34例CIN、60例宫颈鳞癌组织中HPV16E6与E-钙黏蛋白的表达,比较其表达差异,与临床病理特征的相关性.结果 HPV16E6在正常宫颈组织、CIN Ⅰ级、CINⅡ-Ⅲ级、宫颈鳞癌中的阳性表达率逐渐增加,差异有统计学意义(x2 =40.166,P=0.000);各组间两两比较除外正常组与CIN Ⅰ组、CIN Ⅰ组与CINⅡ-Ⅲ组(P=0.315,0.483),其余各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).E-钙黏蛋白在正常宫颈、CIN Ⅰ级、CINⅡ-Ⅲ级、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率逐渐减少,差异有统计学意义(x2=31.295,P=0.000),各组间两两比较除外正常组与CIN Ⅰ组、CIN Ⅰ组与CINⅡ-Ⅲ组(P=0.056,0.627),其余各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).HPV16E6与E-钙黏蛋白阳性表达率与宫颈癌临床病理分期、肿瘤直径、组织病理学分级、肌层浸润都有关(P＜0.05),但两者的表达与年龄无关(P＞0.05).宫颈鳞癌组和CIN组中HPV16E6与E-钙黏蛋白的表达呈负相关(rs=-0.647,P=0.000).结论 宫颈病变级别增加与HPV16E6和E-钙黏蛋白阳性表达密切相关,提示宫颈癌预后不良;两种蛋白表达可能存在相互作用,且参与了宫颈癌的发生发展.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌感染分布及危险因素分析

目的分析近两年来深圳市第三人民医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)-大肠埃希菌(ECO)的来源标本类型、病区分布,以及危险因素,为医院感控和临床抗感染治疗提供细菌学依据。方法收集该院住院患者检出的非重复ECO 443株,采用phoenix100系统进行菌种鉴定和药敏实验,并对产ESBLs-ECO进行双纸片协同试验确证,对产ESBLs-ECO感染的危险因素进行统计分析。结果 443株ECO中产ESBLs-ECO为115株,占26.0%;产ESBLs-ECO菌株主要分离自痰液、尿液和血液标本,病区分布以结核病区、儿科、肝病区和感染科为主,分别占20.9%、13.9%、12.2%和8.7%。男性、外科手术和第三代头孢菌素用药史是产ESBLs-ECO感染的独立危险因素。结论该院产ESBLs-ECO检出率较高,医院应根据危险因素制订干预措施,特别应重点关注男性患者,规范外科手术操作及消毒,限制使用第三代头孢菌素,减少院内产ESBLs-ECO的发生和传播。     

慢性阻塞性肺疾病中转录因子ATF3/ATF4与Nrf2的表达及相互作用

目的: 研究活化转录因子3(ATF3)、活化转录因子4(ATF4)和红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者体内的表达变化,探讨ATF3、ATF4与Nrf2蛋白之间的相互作用。方法: 肺组织标本取自40例肺肿瘤行肺叶切除者,于远离病灶处取材,诊断符合COPD者入选COPD组(20例),不符合者入选对照组(20例)。取两组患者的肺组织,原位杂交和免疫组化检测ATF3、ATF4和Nrf2 mRNA及蛋白表达水平。复制COPD大鼠模型,应用免疫共沉淀法(Co-IP)研究ATF3、ATF4与Nrf2蛋白之间的相互关系。结果: (1) COPD组患者第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV₁/FVC)和第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV₁%预计值)明显低于对照组(均P<0.01)。(2)COPD大鼠肺功能 (FEV_0.3、FEV_0.3/FVC和PEF)较对照组显著恶化(均 P<0.01)。(3)免疫组化显示COPD组ATF3、ATF4和Nrf2蛋白水平较对照组升高(均 P<0.01)。(4)原位杂交结果显示ATF3和ATF4 mRNA表达水平在COPD组显著高于对照组(均P<0.01),而Nrf2 mRNA在两组表达无明显差异(P>0.05)。(5) Co-IP结果显示在Nrf2抗体捕获的免疫沉淀中,ATF3和ATF4抗体均可杂交出明显的蛋白条带(P<0.05)。 结论: 氧化应激状况下ATF3和ATF4表达明显上调,通过与Nrf2之间的相互作用,可能转录调控Nrf2靶基因的表达,在COPD的氧化／抗氧化失衡中发挥生物学作用。     

慢性心力衰竭的诊断与治疗进展

慢性心力衰竭(CHF)是各种心血管疾病的终末阶段,发病率逐年增高,亟待提高诊治水平。近年来,CHF的诊断、分期有了新的观点;以血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)、β受体阻滞剂和醛固酮受体拮抗剂为基础的多药物联合应用,大大降低了CFH的死亡率和再住院率;在此基础上进行的心脏同步化治疗、植入型心律转复除颤器、机械循环支持等非药物治疗,进一步改善了患者的预后;干细胞移植等为CHF治疗提供了新的希望。本文对CHF的诊断、药物治疗及非药物治疗最新的发展及国内外最新指南进行综述。     

P53蛋白精氨酸甲基化

P53的大多数生理功能可归因于其作为一种转录因子和DNA损害的反应因子[1].P53靶基因有两种选择性的下游区作用:一是中止细胞周期,允许DNA被修复;二是如果修复不成功的话他们就过度地被刺激从而导致凋亡,也就是程序性的细胞死亡.P53选择不同的结果在肿瘤领域是个重要的问题[2].在正常细胞中,DNA损伤开始于涉及一些酶的信号网络,像靶基因的转录后修饰,如等的多位点修饰[3].普遍认为转录后翻译影响和操纵P53的活性,从而显现P53应答的生理功能.最近研究发现,蛋白质精氨酸甲基转移酶(protein arginine methyhransferase,PRMTs)中的PRMT5可使P53蛋白精氨酸残基发生甲基化,从而重新调控P53蛋白的功能[4].     

屋尘螨抗原致敏大鼠支气管上皮细胞白介素6、白介素8和转化生长因子β1的表达

目的 探讨屋尘螨抗原(Derp1)对大鼠原代支气管上皮细胞白介素6(IL-6)、IL-8和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将实验随机分成正常对照组和实验组,实验组中细胞分别暴露于3个不同的Derp1浓度(1、5、10 mg/L)及3个不同的培养时间点(4、8和24 h).然后用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测细胞及细胞上清液中IL-6、IL-8和TGF-β1的表达及含量.结果 与对照组相比,实验组各指标有明显变化.Derp1刺激4h,IL-6和IL-8表达开始升高,直至8～24 h呈高水平.而在Derp1浓度≥5 mg/L条件下,IL-6和IL-8表达最明显,与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).而TGF-β1 则随着时间和浓度的增加.其表达水半呈逐渐上升趋势,各时间点的表达差异均有统计学意义(P＜0.05).各炎症指标(IL-6,IL-8,TGFβ1)ELISA结果与PCR趋势基本一致.结论 Derp1刺激气道上皮细胞,引起支气管上皮细胞免疫反应,释放一系列炎症因子如IL-6、IL-8和TGF-β1.从而参与哮喘气道炎症反应及哮喘的气道重塑.     

PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠COPD的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和红系衍生的核因子相关因子2（Nrf2）对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）表达的调控及其在COPD中的作用和意义。方法24只大鼠随机分为COPD组和对照组。COPD组用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖（LPS）的方法制作COPD模型。观察大鼠的肺组织病理学改变,检测肺功能指标;应用免疫组化、Westernblot、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应检测肺组织中PGC-1α、Nrf2和γ-GCS的蛋白及mRNA表达情况。结果COPD组的肺功能指标（FEV0.3、FEV0.3／FVC、PEF）和光镜下COPD组肺组织病理变化符合COPD的特征性改变。PGC-1α、Nrf2mRNA在两组大鼠肺组织中均有表达,且与γ-GCSmRNA的表达部位基本一致;PGC-1α、γ-GCS蛋白及mRNA表达在COPD组均显著高于对照组（P均〈0．05）;Nrf2蛋白表达在COPD组较对照组显著增高（P〈0．01）,而Nrf2mRNA在两组表达无明显差异（P〈0．05）。相关性分析显示PGC-1α蛋白与Nrf2蛋白及mRNA表达均呈正相关（r值分别为0．775和0．515,P均〈0．01）,PGC-1α、Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白（r值分别为0．531和0．575,P均〈0．01）及mRNA表达（r值分别为0．616和0．634,P〈均0．01）均呈正相关。结论PGC-1α可能作为Nrf2的辅激活因子,通过辅助激活Nrf2,上调γ-GCS的基因表达;PGC-1α和Nrf2可能通过一个共同通路协同上调γ-GCS的基因表达,从而改善COPD的氧化／抗氧化失衡。     

HIF-1α结合活性及蛋白含量的表达变化在缺氧性肺动脉高压大鼠中的作用和意义

目的 研究HIF-1α结合活性及蛋白含量的表达变化在缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠中的作用和意义.方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)和缺氧3、7、14天和21天组(H3、H7、H14和H21组),每组8只,常压缺氧复制HPH大鼠模型.测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;EMSA法检测HIF-1α结合活性的变化,免疫组化、Western blot检测HIF-1α蛋白质表达.结果 (1)缺氧7天后,mPAP开始上升,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).缺氧14天达高水平并维持于此水平.缺氧14天后出现肺血管重塑,RVHI改变.(2)EMSA发现对照组HIF-1α结合活性水平较低,3天组迅速升高,14天组达到高峰.(3)Westem blot发现,HIF-1α蛋白在对照组有一定的表达,缺氧3天组蛋白质明显升高,缺氧7天达高峰,此后保持高水平;免疫组化示HIF-1α蛋白在肺小血管表达不明显,缺氧3天明显升高(0.194±0.017,P＜0.05),7天达到高峰,随后缺氧14天和21天组水平下降.结论 HIF-1a的结合活性及蛋白含量在HPH大鼠均可见明显增高,HIF-1α在大鼠HPH的发病机制中发挥作用.