应用噬菌体随机肽库技术筛选幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的抗原表位

目的 筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutrophil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为Hp疫苗的研制提供基础.方法 以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附-洗脱-扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.以制备的阳性噬菌体克隆短肽液免疫小鼠,免疫血清与NAP经Western blot分析,以验证NAP的模拟表位.结果 经3轮免疫筛选后挑选到45个阳性克隆,经ELISA鉴定有12个阳性克隆,测序结果显示5种表位,其中P17噬菌体展示肽FAHLATQ与NAP氨基酸序列(137～143)高度同源,位于NAP高抗原区域(118～140),免疫血清可识别NAP.结论 用噬菌体随机7肽库成功筛选到了NAP的模拟表位,为基于NAP的诊断和疫苗的研制提供了基础.     

新型冠状病毒肺炎患者出院后核酸检测阳性临床特征及原因综述

从新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019, COVID-19)暴发以来,研究发现COVID-19康复患者在出院后在14 d隔离管理或健康监测期间有样本采集核酸检测再次出现新型冠状病毒阳性(复阳)的情况,国内外相关研究报道越来越多。本研究采用文献查阅综述的方法,旨在综合描述COVID-19复阳者临床人口学特征、可能影响因素以及传播风险,为COVID-19患者出院管理、医疗资源救治分配和传播风险控制提供综合科学的建议。     

甲状腺乳头状癌核内包涵体及核的形态结构定量分析

目的:定量揭示甲状腺乳头状癌核内包涵体及核的几何形态结构特点,为甲状腺乳头状癌的病理诊断提供定量诊断参数。方法:取甲状腺乳头状癌100例,常规切片、HE染色,在40倍物镜下采集核内包涵体及核的图像,用Image-Pro Plus测试包涵体及核的面积、周长、长轴、短轴、形状因子PE（Form PE）、形状因子AR（Form AR）、规化形状因子（RFF）、轴比、核内包涵体的面积密度以及包涵体与核质的面积比。结果:（1）甲状腺乳头状癌核内包涵体的面积约为（13.575±9.045） μm2（95%CI 13.339~13.810）,其在核内的面积密度约为25.761%±10.683%（95%CI 25.483~26.039）;其周长约为（12.720±4.275） μm（95%CI 12.609~12.831）,长轴（4.547±1.466） μm（95%CI 4.509~4.585）,短轴（3.482±1.178） μm （95%CI 3.451~3.512）;其轴比约为0.772±0.121（95%CI 0.769~0.775）,Form PE、Form AR和RFF约等于1;其与核质的面积比约为0.380±0.237（95%CI 0.374~0.386）,其面积、周长、长轴和短轴的变异系数为66.6%、33.6%、32.2%、33.8%。（2）具有核内包涵体的癌细胞,其核的面积、周长、长轴和短轴及其相应变异系数显著大于没有核内包涵体的细胞核（P<0.05）。（3）核内包涵体、含有核内包涵体的核及没有核内包涵体的核,其面积、周长、长轴和短轴的频数分布均呈正偏态分布。结论:（1）甲状腺乳头状癌核内包涵体形状大致呈圆形;约为核面积的1/4,核周长、长轴和短轴的1/2;其面积、周长、长轴和短轴的变异程度均较大。（2）具有包涵体的癌细胞,其核的异型性明显,诊断阅片时应重点观察。（3）包涵体及核的上述尺寸参数的频数分布均呈正偏态分布。     

间歇性断食对老年前期肥胖大鼠肠道菌群及代谢的影响

目的 研究间歇性断食对老年前期肥胖大鼠代谢和肠道菌群的影响.方法 雌性Wistar大鼠经42周高脂高糖饲料饲养造模,根据体质量选取模型鼠进行间歇性断食干预.干预方法为每2周断食72 h,总干预时间18周.干预后进行口服葡萄糖耐量试验、血脂4项检测.收集粪便,通过Illumina高通量测序检测16S rRNA基因V4可变区,运用QIIME及LEfSe分析肠道菌群.结果 间歇性断食组体质量相对于模型对照组显著下降(P<0.01);高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均显著下降(P<0.05);空腹血糖显著上升(P<0.01);葡萄糖耐量测试曲线下面积显著高于模型对照组,糖耐量减退(P<0.05);HE染色显示间歇性断食轻度减少肝脏脂肪变性.肠道菌群结果显示,断食组肠道菌群得到显著改善,具体表现为YS2、RF32、Helicobacteraceae(螺杆菌科)增加,Lactobacillus(乳杆菌属)、Roseburia(罗氏菌属)、Erysipelotrichaceae(韦荣球菌科)、Ralstonia(青枯菌属)、Bradyrhizobiaceae(慢生根瘤菌科)和RF39减少.Spearman相关性分析发现Bradyrhizobiaceae与总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇呈正相关;大鼠体质量与RF39呈负相关.结论 间歇性断食能改善肠道菌群,降低老年前期肥胖大鼠体质量和血脂水平,但对糖代谢有不良影响.     

Compound K 对小鼠CT26结肠肿瘤模型中髓系抑制细胞的抑制作用

目的探讨人参皂苷Compound K（C-K）对髓系抑制性细胞（myeloid derived suppressor cell, MDSC）凋亡、免疫抑制及促
炎症细胞因子分泌的影响。方法流式细胞术分选得到CT26 肿瘤小鼠骨髓MDSCs,分别用C-K或PBS处理后,Annexin V/
7-AAD检测细胞凋亡;qRT-PCR检测Cox-2 和Arg-1 的mRNA表达水平;ELISA技术检测细胞培养上清中IL-1β、IL-6和IL-17
的水平。体内实验中,C-K 或对照PBS处理的MDSCs和结肠癌细胞系CT26共同皮下免疫Balb/c小鼠,21 d后,对两组小鼠肿
瘤的大小以及组织形态学进行鉴定。结果C-K促进了体外培养的MDSC的凋亡,表现为早期细胞凋亡率及晚期凋亡细胞或
坏死率均增加（P<0.01,P<0.05）;并显著下调了MDSC中免疫抑制作用相关基因Cox-2及Arg-1的表达（P<0.05,P<0.01）;同时
抑制了MDSC中促炎症细胞因子IL-1β、IL-6和IL-17的分泌（P<0.05,P<0.001,P<0.05）。与对照组比较,C-K 处理后的MDSCs
在体内促进肿瘤细胞的增殖作用明显减弱（P<0.01）。结论C-K 能促进体外培养的MDSC细胞凋亡并拮抗其免疫抑制功能,
从而抑制肿瘤细胞的生长与增殖。
     

气郁质与失眠相关性的病例对照研究

目的：通过对睡眠质量以及中医体质的调查探索失眠与气郁质之间的关系。 方法：对168名16~80岁的志愿者用中医体质量表、匹兹堡睡眠质量量表（Pittsburgh Sleep Quality Index, PSQI）、爱波沃斯嗜睡量表（Epworth Sleepiness Scale, ESS）以及深睡眠量表（Deep Sleep Scale, DSS）进行问卷调查。采用病例对照的方法分析气郁质和其他体质的睡眠质量和主要失眠症状。 结果：分析结果显示气郁质患者睡眠障碍的症状主要表现为入睡困难（PSQI： OR=3.012, 95% CI=1.310~6.923; DSS： OR=3.016, 95% CI=1.358~6.709）以及早醒（PSQI： OR=3.545, 95% CI=1.229~10.232; DSS： OR=2.742, 95% CI=1.072~7.014）;而其他体质的人群主要表现为多梦（PSQI： OR=2.419, 95% CI=1.154~5.072; DSS： OR=2.561, 95% CI=1.116~5.880）。失眠症状与气郁质的程度之间存在相关关系,分析结果显示气郁质越严重,其发生入睡困难、早醒的危险系数越高。 结论：本研究结果显示气郁质与失眠之间存在显著的相关性,对失眠的治疗与康复可以从调节中医体质的角度做进一步的研究。     

国内外新冠抗原检测试剂应用现况

随着“抗原筛查、核酸诊断”监测模式的推进,国内开始应用抗原快速检测试剂。本研究就美国、新加坡、中国香港地区及中国内地自我检测和专业使用抗原检测的应用现状和灵敏度、特异度等性能进行分析,旨在为国内抗原检测推广使用提供参考。     

含有缺失机制的多元纵向数据分析

目的本文旨在对含有不可忽略缺失机制的多元纵向数据建立一个适当的统计模型。方法对纵向数据建立含有潜在变量的线性混合模型;由于潜在变量在本文中代表治疗效果,而且随着时间变化在不断改进,所以本文用一阶的马氏链来反应潜在变量之间的这种联系;引入logistic回归模型来描述数据的缺失机制。最后利用EM算法对参数进行估计,并且给出了数据的模拟结果。结果从模拟的结果可以看出,参数的96%置信区间包含了待估计参数的真值。结论本文所提出的方法对于估计类似数据的参数具有一定的有效性,相对于传统方法,适用性更广泛,且大大简化了计算的工作量。     

鼠李糖乳杆菌培养上清液通过抑制NF-κB通路预防大肠杆菌性脑膜炎

目的：体外探讨鼠李糖乳杆菌上清液(LGG-CM)能否通过抑制NF-κB通路来阻断大肠杆菌K1（E. coli K1）株引起的细菌性脑膜炎。方法用人脑微血管内皮细胞（HBMEC）构建体外血脑屏障模型;采用免疫印迹研究LGG-CM能否抑制E. coli K1激活NF-κB通路;通过侵袭实验和中性粒细胞迁移实验,研究LGG-CM能否抑制细菌侵袭和中性粒细胞迁移;通过免疫印迹研究黏附分子CD44和紧密连接蛋白ZO-1的表达;免疫荧光检测ZO-1蛋白的细胞内分布;用Transwell建立体外血脑屏障模型,通过跨细胞内皮电阻（TEER）值和细菌迁移实验评价LGG-CM对细胞屏障完整性的保护作用。结果免疫印迹结果表明LGG-CM能抑制E. coli K1激活NF-κB通路,藉此抑制E. coli K1的侵袭和中性粒细胞迁移。同时,LGG-CM可抑制E. coli K1上调CD44蛋白和下调紧密连接蛋白ZO-1。此外,LGG-CM能够明显减缓TEER值的降低和抑制E. coli K1穿越体外血脑屏障。结论体外实验表明,LGG-CM能够通过抑制NF-κB通路激活、阻断E. coli K1侵袭和中性粒细胞迁移及维护血脑屏障完整性来预防E. coli K1引起的细菌性脑炎。     

医学专科生睡眠意识、行为与睡眠质量的关系

目的 探讨睡眠卫生意识和习惯与睡眠质量的关系.方法 对福建省4所高校1602名医学专科生进行睡眠卫生意识和习惯量表(SHAP)和匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)测查.结果 学生的睡眠卫生意识得分[(7.69±2.37)分]较低,具有不良睡眠卫生习惯的比例较高.Logistic回归显示睡眠质量与睡前或白天担心晚上睡觉的能力、喝酒帮助睡觉、光线干扰、噪声干扰和舍友干扰等不良睡眠卫生习惯有关.结论 睡眠卫生意识低和不良睡眠卫生习惯对睡眠质量影响较大.