丹参酮ⅡA-甘草酸自组装纳米胶束的制备及体外抗脑胶质瘤评价

  目的  将丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA, Tan ⅡA)封装于甘草酸(Glycyrrhizic acid, GL)中自组装得到胶束, 考察其制备工艺并对产物进行表征, 同时进行体外抗胶质瘤细胞活性评价。  方法  采用薄膜分散法制备载丹参酮ⅡA-甘草酸自组装胶束(Tan ⅡA-GL/Micelle, TGM)。测定TGM的粒径、多分散系数以及Zeta电位；透射电子显微镜观察TGM的形态特征；高效液相色谱法测定TGM的包封率；透析袋法考察TGM的药物释放情况。倒置荧光显微镜考察TGM体外跨血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)的能力; 定量考察细胞摄取的具体机制; MTT法考察游离Tan ⅡA、游离GL和TGM分别对鼠源性脑胶质瘤细胞GL261的细胞毒性; 流式细胞仪检测游离Tan ⅡA、游离GL及TGM对GL261的细胞凋亡作用。  结果  薄膜分散法是制备载丹参酮ⅡA-甘草酸自组装胶束的最佳工艺方法; TGM粒径约为(121.87±5.85)nm, Tan ⅡA包封率为(88.54±14.27)%, 呈类球形形态, 制剂均一稳定; 可在5 h左右释放包载药物。TGM具有良好的跨BBB能力; 脑胶质瘤细胞摄取自组装胶束的机制为通过网格蛋白介导的胞吞来进行制剂的摄取; 对于脑胶质瘤细胞GL261具有良好的细胞毒性; 细胞凋亡实验结果表明, TGM相较于Free TanⅡA、Free GL组显著提高细胞凋亡水平, 促细胞凋亡率分别由12.28%、13.32%上升至31.16%。  结论  GL与Tan IIA通过自组装形成了纳米胶束，有效克服TanⅡA生物利用度低、水溶性差等缺点。TGM可有效跨越BBB，通过网格蛋白介导的胞吞途径被脑胶质瘤细胞摄取，具有良好的细胞毒性与促细胞凋亡能力。      

凉血通瘀方对急性脑出血伴有胃肠功能障碍患者神经功能及血清炎性指标的影响

目的:观察凉血通瘀方对急性脑出血伴有胃肠功能障碍患者神经功能及血清炎性指标TNF-α和IL-1β的影响,探讨凉血通瘀方治疗脑出血的可能机理。方法:选取急性脑出血伴有胃肠功能障碍的患者68例,采用随机数字表法分为2组。对照组33例,给予西医常规治疗,治疗组35例,在对照组基础上加用凉血通瘀方,疗程14 d。比较2组患者治疗前后中风病类诊断评分、胃肠症状积分、NIHSS评分、脑出血量及血清TNF-α及IL-1β水平的变化。结果:两组治疗后各观察指标均较治疗前明显改善(P<0.05)。治疗后,治疗组总有效率94.3%,略高于对照组的81.8%;治疗组中风病类诊断评分、胃肠症状积分、NIHSS评分均显著低于对照组,且脑出血量少于对照组(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,治疗组血清TNF-α及IL-1β水平明显降低(P<0.05)。结论:凉血通瘀方治疗急性脑出血伴有胃肠功能障碍患者,不仅可以减轻神经功能损伤,促进神经功能恢复,亦能够改善胃肠功能障碍症状,且可显著降低炎症因子表达,减轻炎症反应,其作用机理可能与改善胃肠功能障碍,从肠治脑有关。     

傣族药产地生态适宜性分析与产业发展策略

适宜性产区能够保障傣族药的品质,然而有关植物类傣族药适宜生态因子及适宜产区的研究目前较为匮乏。本研究利用中药材产地适宜性分析地理信息系统(GMPGIS)对植物类傣族药进行全国产地生态适宜性分析,首次提出了植物类傣族药主要分布区域的生态因子范围和主要土壤类型,如年均温8. 6～23. 7℃,年均降水量1 212～1 881 mm,年均日照149. 7～157. 4 W·m-2,主要土壤类型为强淋溶土、冲积土、高活性强酸土等。以179个采样点为基础,通过生态相似性分析得到植物类傣族药在全球范围内的最大生态相似度区域,主要包括中国、巴西、美国、缅甸、老挝等国家。在中国主要集中在云南的西部和南部,包括西双版纳傣族自治州、德宏傣族景颇族自治州普洱市、保山市、临沧市具有较大的适宜栽培区域。除此之外,本文通过分析傣族药人才匮乏、傣族药资源日益减少、文化传承具有局限性、科学研究薄弱等问题,并提出了通过傣族医药高素质人才培养、傣族药资源调研和保护工作、推进傣族药资料古籍的搜集整理、加强傣族药基础研究和应用研究等策略促进傣族医药发展。本研究为指导植物类傣族药生产基地合理布局、引种繁育等提供依据,为高品质傣族药的科学规范化生产奠定基础。     

滞针动法结合电针治疗糖尿病性动眼神经麻痹的临床研究

目的观察滞针动法结合电针治疗糖尿病性动眼神经麻痹的临床效果。方法将50例糖尿病性动眼神经麻痹患者随机分为2组,对照组25例给予常规西医对症治疗,观察组25例在西医治疗基础上联合滞针动法结合电针治疗,连续治疗4周。观察2组治疗后复视角度、睑裂高度、瞳孔直径及生活质量(SF-36评分)的改善状况,统计2组治疗后临床总有效率及治疗期间不良反应发生情况。结果 2组治疗后复视角度均显著缩小(P均0.05),瞳孔直径均显著缩短(P均0.05),睑裂高度均显著增加(P均0.05),且观察组改善程度均明显优于对照组(P均0.05);观察组总有效率为92.0%,显著高于对照组的68.0%(P0.05);2组治疗后SF-36评分均显著升高(P均0.05),且观察组治疗后SF-36评分显著高于对照组(P0.05);2组治疗期间均未发生严重不良反应(P0.05)。结论滞针动法配合电针能明显改善糖尿病性动眼神经麻痹患者的临床症状,增加患侧眼球睑裂高度,减小瞳孔直径,降低复视角度,改善患者生活质量。     

千金苇茎汤对香烟烟雾暴露模型大鼠肺组织Th17/Treg分化及其相关细胞因子表达的影响

目的:观察千金苇茎汤对香烟烟雾暴露模型大鼠肺组织辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化及其相关细胞因子表达的影响。方法:雄性大鼠60只,随机分为正常组,烟雾模型组,乙酰半胱氨酸组、千金苇茎汤高、中、低剂量组,共6组,每组10只。香烟烟雾造模30 d后,药物分别干预30 d,后处死各组大鼠并取组织;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt),叉头状/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织白细胞介素-17(IL~(-1)7),IL-6,IL~(-1)0,转化生长因子-β_1(TGF-β_1)含量,苏木素-伊红(HE)染色切片观察肺组织病理,流式细胞术检测Treg(Foxp3~+CD25~+)比例,Th17(CD4~+IL~(-1)7~+)比例,Treg/Th17。结果:与正常组比较,模型组ROR-γt mRNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,千金苇茎汤高、中、低剂量组干预后都能够降低其表达(P0.05,P0.01);与正常组比较,模型组Foxp3 mRNA表达明显降低(P0.05),与模型组比较,千金苇茎汤中低剂量组干预后表达明显升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL~(-1)7,IL-6含量明显升高,IL~(-1)0,TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,千金苇茎汤高、中、低剂量组干预后能够降低肺组织IL~(-1)7,IL-6含量,同时升高IL~(-1)0的含量(P0.05),与Real-time PCR检测的结果趋势一致。流式细胞术检测显示,千金苇茎汤中、低剂量组干预后Th17(CD4~+IL~(-1)7~+)比例降低,Treg/Th17增加(P0.05,P0.01)。结论:千金苇茎汤能调节Treg/Th17,使Th17/Treg达到平衡状态。     

基于网络药理学和分子对接研究淫羊藿治疗抑郁症的抗炎作用机制

目的:采用网络药理学方法预测淫羊藿治疗抑郁症的抗炎靶点及相关信号通路,探讨其抗抑郁作用的潜在机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库搜集和筛选淫羊藿的活性成分;利用PharmMapper服务器,TCMSP数据库对蛋白靶点进行预测和筛选;利用OMIM数据库,CTD数据库和GeneCards数据库筛选抑郁症的相关靶点以及抗炎靶点;通过DAVID数据库对关键抗炎靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用Cytoscape 3.6.0软件构建淫羊藿"活性成分-作用靶点-信号通路"网络图,并对网络拓扑结构分析;采用GOLD分子对接软件对活性成分与关键抗炎靶点进行结果验证。结果:筛选得到淫羊藿与抑郁症相关的12个活性成分,30个作用靶点,5个关键抗炎靶点;GO功能富集得到生物过程65个,细胞组成4个,分子功能1个,KEGG通路富集分析得到41条,其中与炎症相关的信号通路9个;分子对接验证淫羊藿苷与关键抗炎靶点能够形成最佳复合体。结论:揭示了淫羊藿通过抗炎靶点及其相关信号通路网络作用于抑郁症的分子机制,为进一步研究淫羊藿抗抑郁作用提供了基础。     

活血利水法在骨伤科疾病中的应用

基于骨伤疾病瘀血内阻的重要病机和现代医家"治血重治水"的学术观点,探索概括了活血利水法在骨伤疾病中的应用现状,结合现代医学的认识,全方位分析了活血利水法的优势和缺点。活血利水法可应用于骨折、筋伤等骨伤科大部分疾病及骨伤科疾病的围手术期,能改善肢体肿胀,促进伤口愈合,便于患者早期功能康复,但目前的临床应用尚缺乏统一的规范和标准,且处方不良反应尚未完全阐明。     

持续性疼痛中“应对反应”行为相关通路的确定

动物和人类对伤害刺激表现出两种类型的反应,一种是"反射性防御反应(reflexive defensive responses)",另一种是"应对反应(coping responses)";然而,产生这两种行为的神经通路却仍然不清楚。在该研究中,研究人员通过基因消融、电生理、逆行标记、免疫染色、行为学测试等手段对小鼠两种行为反应神经通路进行了研究。结果表明:TAC1~(Cre)和LBX1~(Flpo)在脊髓共表达的神经元是疼痛相关反应所必需的,此类神经元的消融会导致引起持续性疼痛刺激(包括皮肤捏伤和烧伤)所诱发的"应对反应"行为丧失,但不影响任何"反射性防御反应"。该研究揭示了皮肤体感系统中与"应对反应"相关的一个基本通路,并首次尝试使用"反射防御反应"来测量持续性疼痛的有效性,为疼痛医学的创新发展提供了新的依据和思路。     

从中医“痰、虚、瘀”角度探讨中药调控脑白质变性相关认知障碍的临床思路

随着影像技术及研究的深入,脑白质变性对认知功能的影响越来越受到重视,但关于脑白质变性的病因及发病机制却没有统一的定论,因此在治疗上也没有行之有效的方法。文章在中医基础理论的指导下,通过其危险因素及病理生理的总结,探讨中医"虚、瘀、痰"等病理因素在认知障碍的发病中所发挥的作用及其与脑白质变性的联系,提出"补肾益气、活血化瘀、化痰泄浊"治法,为脑白质变性的中医预防及治疗提供新的思路。     

抗病毒颗粒HPLC指纹图谱建立及9种成分同时测定

目的建立抗病毒颗粒(金银花、连翘、蒲公英等)HPLC指纹图谱,并同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸B、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷的含有量。方法该药物水提液的分析采用ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min;检测波长320 nm;柱温30℃。结果 12批样品指纹图谱中有17个共有峰,并指认出其中10个,相似度大于0.97,无明显分类。9种成分在各自范围内线性关系良好(R~2>0.999 0),平均加样回收率97.34%～102.69%,RSD 0.79%～2.20%。结论该方法准确、重复性好,可用于抗病毒颗粒的质量控制。