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1.
改良线栓法大鼠大脑中动脉阻塞模型的建立   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的对大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型进行改良,通过比较再灌注24h时大鼠神经功能评分、梗死率、模型制作时间、成功率和死亡率等指标评价改良线栓法大鼠MCAO再灌注模型的有效性。方法12只SD大鼠随机分为对照和模型两组,对照组采用分离结扎翼腭动脉,从颈外动脉插入线栓至大脑中动脉。模型组采用不分离结扎翼腭动脉,从颈总动脉分叉处插入线栓至大脑中动脉。阻断大脑中动脉血供2h后将线栓拔出实现再灌注。于再灌注24h时观察脑组织组织病理学改变,计算比较两组大鼠神经功能评分、模型制作时间、模型成功率和死亡率以及鼠脑切片TTC染色测量脑梗死率。结果两组MCAO模型在再灌注24h后大鼠神经功能评分、梗死率、模型成功率和死亡率等方面没有显著差异;模型组的模型制作时间显著少于对照组(P〈0.05)。结论采用不分离结扎翼腭动脉,由颈总动脉插入线栓的改良线栓法是稳定和可靠的MCAO造模方法。  相似文献
2.
电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的采用电穿孔方法,介导质粒载体pEGFP-cl转入兔成体成纤维细胞,探讨建立电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的基本条件。方法电穿孔介导质粒载体pEGFP—cl转入7.10代兔耳成体成纤维细胞系GG,研究不同电压、电容、DNA剂量,孵育温度的条件下,观察细胞存活数,流式细胞仪测试GFP的含量。结果以PBS作为电击基础液、细胞浓度2×10^6个/ml,电压250V、电容700μF,DNA用量30μg时,兔耳成纤维细胞的转染率和存活率最佳。且电击前冰浴10min,电转染后37℃孵育10min有利于提高细胞的转染率和存活率。结论在合适电压、电容、DNA剂量条件下,电转染提供了外源基因转染兔耳成体成纤维细胞适用性;电转染前的一定时间冰浴和电转染后一定温度孵育可使电转染效率得到改善。  相似文献
3.
改良吸烟复合气道内注入LPS法COPD大鼠模型的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的对大鼠被动吸烟复合气道内注入脂多糖(lipopolysaccharide,LPs)法建立慢性阻塞性肺病(COPD)模型进行改良,通过比较模型大鼠肺功能、肺组织病理学改变、支气管肺泡灌洗液细胞分类计数及TNFα浓度、模型制作成功率和死亡率等指标评价改良烟熏复合气道内注入LPS法COPD大鼠模型的有效性。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和改良模型组三组,予正常组大鼠常规喂养,模型组采用第1及第15天气道内注入1g/ml LPS0.2ml(当天不行香烟熏染),第2-28天行每日3次(每次间歇2h),每次10支香烟熏染30min。改良模型组除调整第15天气道内注入LPS剂量为0.1ml,第2-7天每次香烟熏染剂量为5支外,其余同对照组。于第29天比较三组大鼠的肺功能、肺组织病理学改变及支气管肺泡灌洗液TNFα浓度、模型制作成功率。结果与正常组比较,模型组、改良模型组COPD模型大鼠气道阻力、支气管肺泡灌洗液TNF仪浓度明显高于正常组,两者肺顺应性明显低于正常组,结果有显著统计学差异(P〈0.05)。结论改良大鼠被动吸烟复合气道内注入LPS法是更为经济、稳定和可靠的大鼠COPD造模方法。  相似文献
4.
重组溶葡萄球菌酶的刺激性和皮肤变态反应试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 了解重组溶葡萄球菌酶的皮肤刺激性、阴道黏膜刺激性和产生皮肤变态反应的可能性及其强度.方法 参照相关技术规范中的皮肤刺激试验、阴道黏膜刺激试验和皮肤变态反应试验方法进行.结果 皮肤刺激试验受试皮肤的最高皮肤刺激指数为0;阴道黏膜刺激试验染毒组和对照组的阴道黏膜未见明显白细胞浸润、充血和水肿,阴道黏膜刺激指数为0.25;皮肤变态反应试验组动物皮肤未见红斑与水肿,各时间的皮肤刺激反应积分为零.结论 重组溶葡萄球菌酶对兔皮肤刺激强度为无刺激性,对大鼠、兔一次阴道黏膜刺激强度为无刺激性,致敏强度为未见皮肤变态反应.  相似文献
5.
目的了解60Co伽马射线照射引发的猕猴白细胞和血小板变化情况。方法用60Co伽马射线机对12只猕猴(雌雄各半)分别进行全身中心位440 CGy、40 CGy/min辐照,正面和背面各一半剂量。辐照后观察40 d,并测定第2、5、8天、第10~27天、以及第30、33、36、40天的白细胞、白细胞分类值与血小板的数据。结果辐照后第2天白细胞数反弹性增高以后急剧下降,在第5~24天,白细胞数都维持在较低水平(P<0.01),25 d后恢复至基础水平;血小板计数在第10天出现反弹性的增高,而第11~24天,猕猴的血小板数低于辐照前基础水平值(P<0.01),第25天以后逐渐恢复至辐照前基础水平值。结论60Co伽马射线照射猕猴可制作在短时间内白细胞数量急剧减少的动物模型。  相似文献
6.
目的 探索常温条件下附睾尾运输的最佳条件,并消除培养液对常温运输可能存在的影响.方法 对附睾尾的运输方法进行了改良,同时比较了常温或4~8℃条件下,在20μ1或0 μ1培养液M2中,运输后精子的活力、受精能力及其胚胎发育能力.结果 结果表明,常温运输不加培养液的条件下,运输的附睾尾精子活动率和活力,均优于20 μl培养液中运输的附睾尾,但是稍差于4~8℃条件下20μ1M2培养液中运输的附睾尾.结论 无液体运输的方式更加适合于附睾尾的常温运输,同时该方法还可消除培养液对附睾精子可能存在的不良影响;常温附睾尾的运输对于小鼠资源库或者研究机构间珍贵小鼠品系的运输具有重要的应用价值.  相似文献
7.
通过卵胞质内单精子注射(ICSI)已经成为治疗人类不育症和小鼠生殖生物学研究的一种有效手段.而且ICSI介导的转基因作为一种动物转基因技术,仍然不够完善.但是相比传统的原核注射技术,该技术最大的优势是可以导入较大片段的外源基因(比如人工酵母染色体YAC).最近研究者们又发展了一种ICSI与转座子结合的转基因技术,能够高效地生产转基因后代,其效率几乎可以与慢病毒载体法相媲美,值得在转基因动物研究中加以推广和应用.  相似文献
8.
目的 采用剖宫取胎和体外受精对微生物级别达不到SPF级的小鼠进行生物净化.方法 对于具有正常繁殖能力的小鼠品系,通过对阴道栓的检查和触诊确定剖宫产取胎时间,采用子宫摘除手术对小鼠进行剖宫产,取出仔鼠用SPF级受体母鼠代乳,观察代乳情况及代乳仔鼠成活率;对于繁殖力较差或者丧失繁殖能力的品系,采取辅助生殖的方式,采集小鼠精子和卵子,在HTF液中受精,培养3.5 d后的胚胎移植到SPF级受体母鼠子宫内,待产仔.结果 两种方式净化的小鼠断奶后进行微生物检测,均达到SPF级.结论 对微生物级别达不到SPF级但不含垂直传播病原体的小鼠,采用两种方式可有效提高小鼠的微生物等级.  相似文献
9.
目的 建立一种微创、可控性强的兔局灶性脑缺血再灌注模型.方法 健康成年新西兰家兔66只,随机分为模型组(n=34)和假手术组(n=32),采用血管内介入技术将微导丝由股动脉送入栓塞右侧大脑中动脉,2h后拔除微导丝建立模型,而假手术组微导丝进入右侧大脑中动脉后即退出.临床神经功能检查家兔左侧肢体对疼痛刺激的反应、蹲立时的姿势和行走时的步态;分别于术后6h、12h和2 周处死模型组和假手术组各24只家兔,取脑组织并行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,观察梗死灶情况;术后2周处死剩余家兔,取脑组织并行苏木精-伊红(HE)染色,观察脑组织病理学变化.结果 在模型组,临床神经功能检查显示家兔出现不同程度的偏瘫症状,建模成功率为94.12%;TTC染色证实术后6h存在脑梗死灶,12h后脑梗死灶趋于稳定;术后2周脑组织HE染色显示右侧额顶叶脑组织缺血性改变.假手术组家兔末出现上述症状及病变.结论 采用血管内介入技术制作兔局灶性脑缺血再灌注模型,该方法微创、可控性强,模型稳定可靠,是用于研究局灶性脑缺血较为理想的动物模型.  相似文献
10.
目的 利用活体保种、精子冷冻技术及辅助生殖技术建立一套安全的综合性保种体系.方法 以单侧睾丸摘除方法获得ICR、BDF1、C57BL/6J和GFP四种小鼠的附睾精子进行冷冻保存实验,术后恢复的公鼠继续用于自然繁育.如果无法自然繁育,则将冻融精子用于体外受精(IVF).如果冻融精子仍无法受精获得后代,则需要借助卵胞质内单精子注射技术(ICSI)进行胚胎构建,胚胎移植,直至获得后代.结果 单侧睾摘除的BDF1、C57BL/6J的公鼠可以继续繁育;不育的ICR和GFP小鼠的冻融精子IVF后,只有ICR小鼠可以得到正常的胚胎和子鼠;而以C57BL/6J 为遗传背景的GFP小鼠,其冻融精子只有采用ICSI技术,才可以得到子代.结论 精子冻融小鼠的遗传背景是影响IVF成功与否的关键性因素,同时还建立了一种以小鼠精子为主导的综合性保种体系,既可以达到品系保存的目的,同时又可以最大限度地利用小鼠品系.  相似文献
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