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目的:探究应用Plasmocin消除人多能干细胞支原体感染时的最佳浓度和所需天数,检测消除支原体感染后的人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)向神经元的定向分化?方法:应用25.0?12.5?8.5?5.0 μg/mL 4种不同浓度的Plasmocin进行支原体感染的消除,用PCR比较消除结果;对已消除支原体的hPSC进行维持培养以及定向分化?结果:应用4种浓度的Plasmocin均能消除支原体的感染,但其中高浓度组(25.0 μg/mL)出现细胞毒性反应,消除支原体后存活下来细胞较少,而低浓度组(5.0 μg/mL)消除支原体所需给药时间较长,12.5 μg/mL浓度组对细胞生长有不利影响,而8.5 μg/mL浓度组对细胞生长影响较小?hPSC在消除支原体感染后可高效分化至前脑神经元,并且9个月后未检测出支原体?结论:应用8.5 μg/mL的Plasmocin加药1周即可彻底消除hPSC中支原体的感染,并且不会对其定向分化能力造成影响?  相似文献
2.
目的:探讨miRNA-181a对l-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神经元损伤的影响及其相关机制。方法:采用胎龄12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中脑进行多巴胺能神经元原代培养,依据不同处理方法分为4组:①空白对照(Control)组;②PD模型(MPP+)组;③阴性对照(miRNA-NC+MPP+)组;④miRNA-181a+MPP+组。酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以选择性标记多巴胺能神经元,因此采用荧光显微镜对各组TH染色阳性神经元数目、初级突触分枝及最长突触长度进行观察,分析各组之间的差异。结果:Control组多巴胺能神经元细胞体积较大,呈圆形或三角形,胞体发出1个、2个或多个长的分枝以及轴突发出的次级突起,胞体和轴突表面光滑,形态完整,神经元分枝之间相互交织呈网络,联系密切。miRNA-NC+MPP+组经MPP+作用后多巴胺能神经元的数量减少,绝大多数表现为胞体存在,分枝数目及最长突触长度明显减少,网状交织稀少,表面不光滑,有的呈串珠样肿胀或轴突中断、丢失,仅存胞体,少数也表现为胞体空虚、丢失,仅存突起。miRNA-181a+MPP+组较miRNA-NC+MPP+组多巴胺能神经元数目有所增加,胞体形态较好,分枝数目与最长突触长度较miRNA-NC+MPP+组有所改善,且表面较光滑,神经元死亡程度较低。结论:miRNA-181a对MPP+所致多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用。  相似文献
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