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1.
目的:观察单克隆抗体NJ001杀伤肺腺癌细胞的活性,并探索其分子机制?方法:选择肺腺癌细胞株SPC-A1作为研究对象,流式细胞仪检测细胞凋亡率;相差显微镜观察凋亡细胞形态学改变;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白caspase-8?caspase-9?caspase-3?PARP和Bcl-2?Bax表达的变化?结果:单克隆抗体NJ001可以导致SPC-A1细胞发生凋亡,且凋亡率呈剂量依赖性?显微镜下观察到SPC-A1细胞皱缩变圆,甚至脱落,呈现典型的凋亡改变;Western blot检测结果显示,在单抗NJ001作用下,PARP蛋白被剪切,caspase-3的表达量因被剪切而降低,caspase-8和caspase-9蛋白均表现活化,表现为cleaved caspase-8和cleaved caspase-9蛋白的表达上调?另外促凋亡蛋白Bax表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下调?结论:单克隆抗体NJ001能通过诱导细胞凋亡发挥其杀伤肺腺癌细胞的活性,且其凋亡机制与caspase活化和Bcl-2家族蛋白的调节有关?  相似文献
2.
目的 :观察TLR1(Toll-like receptors 1)、TLR2和TLR6在卵巢癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)亚群中的表达水平,初步探索TLR1、TLR2和TLR6在卵巢癌发生发展中的作用机制。方法 :收集13例卵巢癌患者、13例女性妇科良性疾病患者及13例同期健康体检女性EDTA抗凝外周全血,采用流式细胞仪分别检测3组单核细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、B淋巴细胞中TLR1、TLR2和TLR6表达水平;TLR1、TLR2和TLR6相应配体(Pam3CSK4、HKLM、FSL-1)分别刺激3组PBMC,采用real-time PCR检测PBMC中前炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αm RNA水平。结果:3组细胞亚群中TLR1、TLR2和TLR6均有表达,且主要表达于单核细胞;卵巢癌组单核细胞中TLR1、TLR2、TLR6的表达率分别为69.13%、59.43%、52.99%,显著高于良性疾病组(34.34%、25.32%、15.21%)和健康对照组(36.31%、26.63%、16.43%),差异具有统计学意义(P<0.05);良性疾病组与健康对照组间无显著性差异;3组间CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞及B淋巴细胞中TLR1、TLR2、TLR6的表达率无显著性差异;3组经TLR2的配体HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-1βm RNA表达水平显著高于良性疾病组和健康对照组(F=2.05,P<0.05;F=2.19,P<0.05),良性疾病组与健康对照组无显著差异;卵巢癌组IL-6m RNA表达水平显著高于良性疾病组和健康对照组(F=1.40,P<0.05;F=1.99,P<0.05),良性疾病组与健康对照组无显著差异;3组间IL-8及TNF-αm RNA表达水平无显著性差异。3组经TLR6配体FSL-1刺激24 h后,卵巢癌组IL-6 m RNA表达水平显著高于良性疾病组和健康对照组(F=1.30,P<0.05;F=1.69,P<0.05),良性疾病组与健康对照组间无显著性差异;3组间IL-1β、IL-8及TNF-αm RNA表达水平无显著性差异。TLR1配体Pam3CSK4刺激24 h后,3组间IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-αm RNA表达水平无显著差异。结论:卵巢癌患者单核细胞中高表达的TLR1、TLR2、TLR6介导的前炎症细胞因子的上调,在卵巢癌炎症微环境的形成和维持中发挥重要作用。  相似文献
3.
目的:探讨miR-638在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌细胞凋亡的关系?方法:应用real-time RT-PCR的方法检测了miR-638在肺腺癌细胞株SPC-A1中的表达情况,并采用脂质体法将miR-638 模拟物瞬时转染入SPC-A1?实验设置空白对照组?无关miRNA阴性对照组和miR-638转染组,转染后在荧光显微镜下观察转染效率,实时荧光定量RT-PCR检测miR-638的表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡率?结果:与正常细胞相比,miR-638在肺腺癌细胞中低表达?SPC-A1细胞转染miR-638模拟物后,细胞凋亡率相对于空白组和阴性对照组显著升高(P < 0.05)?结论:miR-638在肺腺癌中低表达,且能够促进肺腺癌细胞凋亡,可作为后续肺癌生物治疗的新分子靶标?  相似文献
4.
目的:观察Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)在卵巢癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的表达及其诱导IL-10的表达水平,初步探索TLR2在卵巢癌发生发展中的作用机制?方法:收集20例卵巢癌患者?20例妇科良性疾病患者及20例同期健康体检女性EDTA抗凝外周全血,采用荧光定量PCR技术检测3组PBMC中TLR2的表达水平,并比较3组表达差异情况?TLR1?TLR2和TLR6相应配体刺激PBMC,细胞中细胞因子IL-10表达水平采用荧光定量PCR技术进行检测;流式细胞技术(FACS)检测各组IL-10分泌水平?结果:各组PBMC中TLR2均有表达;卵巢癌组PBMC 中TLR2表达量显著高于良性疾病组和健康对照组(P < 0.05),良性疾病组TLR2表达水平与健康对照组间无显著性差异;各组PBMC经TLR2的配体HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-10 mRNA表达明显增强,分别为良性疾病组和健康对照组的2.25?2.33倍,妇科良性疾病组IL-10 mRNA表达水平与健康对照组间无显著差异;TLR6配体FSL-1刺激后,卵巢癌组IL-10 mRNA表达水平分别为良性疾病组和健康对照组的1.95?2.16倍,差异具有统计学意义(P < 0.05),而良性疾病组与健康对照组间无显著差异?FACS结果显示各组PBMC经TLR1的配体Pam3CSK4刺激24 h后,卵巢癌组?良性疾病组及健康对照组IL-10分泌水平中位值(M)分别为46.70?61.53?31.11 pg/ml,差异无统计学意义;经TLR2配体HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-10分泌水平(M = 150.46 pg/ml)显著高于良性疾病组(M = 38.86 pg/ml)及健康对照组(M = 44.93 pg/ml),差异有统计学意义(P < 0.05),良性疾病组与健康对照组间无显著性改变;TLR6配体FSL-1刺激24 h后,卵巢癌组?良性疾病组及健康对照组IL-10分泌水平中位值分别为20.20?31.12?35.48 pg/ml,3组间无显著差异?结论:卵巢癌患者PBMC中TLR2表达水平显著增高,经其介导的细胞因子IL-10表达水平的改变可能与卵巢癌的免疫抑制相关,在卵巢癌的肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用?  相似文献
5.
目的:了解多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)的同源性与流行病例,为控制医院感染及临床合理用药提供依据?方法:收集2012年6~12月临床分离的31株MDRAB,采用K-B纸片法检测12种抗菌药物敏感性,应用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分析菌株的同源性?回顾性分析MDRAB样本病例?结果:药敏结果显示,31株MDRAB对9种抗菌药物100%耐药率,包括4类抗菌药物?PFGE结果表明,31株菌分为5个克隆,20株属于B克隆,占64.52%,为主要流行菌株型,分布于8个病区,主要集中在重症监护病房?胸心外科?老年重症监护病房等重症病区?患者平均年龄64岁,侵入性操作占97%?结论:MDRAB对临床常用抗菌药物耐药比较严重?可能与院内存在克隆传播及患者年龄大?侵入性诊疗操作?合并多种基础疾病等多种因素有关?  相似文献
6.
目的:观察卵巢癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs) mRNA的表达水平,研究高表达TLRs在卵巢癌发病中的可能机制?方法:研究对象包括卵巢癌24例?妇科良性疾病22例及同期健康体检女性22例?采用密度梯度离心法分离PBMC后,提取总RNA,并逆转录为cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法检测TLR1~TLR9 mRNA的表达水平;选择mRNA高表达的TLRs的相应激动剂刺激PBMC,采用Real-time PCR检测PBMC中前炎症细胞因子白细胞介素(IL)-1β?IL-6?IL-12P40的mRNA表达水平?结果:各组PBMC中TLR1~TLR9均有表达;卵巢癌组PBMC 中TLR2?TLR6表达量显著高于健康对照组(TLR2:F = 3.27,P < 0.05;TLR6:F = 2.21,P < 0.05);卵巢癌组TLR2的表达量明显高于妇科良性疾病组(F = 3.24,P < 0.05);良性疾病组TLRs表达水平与健康对照组间无显著性差异;各组PBMC经TLR2的激动剂HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-1β?IL-6?IL-12P40 mRNA表达明显增强,分别为健康对照组的2.24?2.94?2.35倍(P < 0.05),为良性疾病组的2.02?2.50?2.85倍 (P < 0.05);良性疾病组与健康对照组比较无显著改变(F = 1.11,F = 1.18,F = 0.82,P > 0.05)?结论:卵巢癌患者PBMC中TLR2?TLR6表达水平显著增高,经其介导的炎症因子IL-1β?IL-6?IL-12P40 mRNA表达水平的改变可能在卵巢癌的发生发展中发挥作用?  相似文献
7.
目的:观察病毒白细胞介素6(viral interleukin-6,vIL-6)对甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)表达的影响?方法:vIL-6真核表达质粒转染293T细胞,荧光定量RT-PCR和Western blot法检测DNMT1表达的变化,比色法检测DNMT1的活性?结果:荧光定量RT-PCR和Western blot均表明vIL-6可显著促进DNMT1的表达,且vIL-6能上调DNMT1的活性?结论:vIL-6能诱导DNMT1的表达,可能是卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)致DNA甲基化异常,促进肿瘤发生发展的分子机制之一?  相似文献
8.
目的:分析南京医科大学第一附属医院2011年血培养阳性菌的分布及其耐药性?方法:用BACTEC 9240 全自动血培养仪,细菌及真菌鉴定使用API系统及VITEK2自动鉴定仪,细菌药物敏感试验采用纸片扩散法(K-B法),根据CLSI 2010版判断结果,WHONET5.4软件进行统计分析?结果:4 051例血培养标本共检出602株病原菌,其中革兰阴性菌占47.5%,革兰阳性菌占45.0%,真菌占7.0%,厌氧菌占0.5%?革兰阳性菌中葡萄球菌属占62.0%,肠球菌属占18.1%,链球菌属占14.0%?未发现对利奈唑胺?万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌,检出替考拉宁中介菌株9株?肠球菌属对利奈唑胺敏感率100.0%,但检出对万古霉素和替考拉宁耐药的屎肠球菌2株?检出率较高的革兰阴性菌依次为大肠埃希菌?肺炎克雷伯菌?鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌?肠杆菌科细菌对亚胺培南?美罗培南的敏感率分别为86.8%和85.8%,鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物的耐药率较高,在50.0%以上?结论:血培养阳性病原菌种类多,并且对抗菌药物的耐药率呈上升趋势,加强耐药监测刻不容缓?  相似文献
9.
目的:分析2009~2011年南京医科大学第一附属医院分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌(CRKP)的流行状况及其携带的整合子的特征?基因盒的种类?方法:细菌鉴定用VITEK2compact全自动鉴定系统或API细菌鉴定系统;细菌药敏试验采用纸片扩散法(K-B法);根据CLSI2012 M100-S22判读结果;聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ?Ⅱ和Ⅲ类整合酶基因及Ⅰ类整合子可变区基因盒?结果:2009~2011年本院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的分离率显著增高,从1.6%增至11.2%;分离的菌株中对β-内酰胺类药物耐药率均高于95.0%;整合子阳性率为92.6%,均为Ⅰ类整合子,整合子可变区阳性率为78.7%,检测到的基因盒以aadA2最为常见,其次为aacA4-catB8-aadA1 及aadA2 + dfrA25?结论:本院CRKP的分离率增长迅速,Ⅰ类整合子在CRKP中普遍存在,有较强的从外周捕获耐药基因的能力;建议采取有效措施控制CRKP的传播?  相似文献
10.
目的:对南京医科大学第一附属医院2008~2011年鲍曼不动杆菌的分布情况及耐药性进行分析,指导临床合理用药?方法:采用VITEK2全自动微生物鉴定系统或API细菌鉴定板条进行菌种鉴定?用纸片琼脂扩散法(Kirby-Bauer法)进行药敏试验?Whonet 5.6 软件进行数据分析?结果:鲍曼不动杆菌在痰标本中所占比例最高,达到80.0%?该菌检出率较高的科室是老年医学科?重症监护病房?急诊科?呼吸科和脑外科?2008年鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦?亚胺培南?美洛培南的耐药率分别为12.0%?14.8%?23.3%;而2011年的耐药率分别上升至67.4%?90.8%?91.1%?结论:鲍曼不动杆菌对临床常用药物的耐药性呈上升趋势,应加强耐药监控,控制其传播?  相似文献
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