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1.
为了得到具有糖基转移酶活性的重组蛋白,从万古霉素产生菌总DNA中克隆万古霉素糖基转移酶基因gtfE,连入pET-37b构建表达质粒并转入大肠杆菌BL21(DE3)表达,体外测定纯化后的重组蛋白糖基转移酶活性,用HPLC和ESI-MS检测反应产物。结果表明,重组蛋白具有预期活性,可以催化尿苷二磷酸葡萄糖与万古霉素苷元的糖基化反应。本研究为获得糖基多样性的万古霉素奠定理论基础。  相似文献
2.
为了考察基因snogE中断对诺加霉素生物合成的影响,比对多种糖基转移酶的氨基酸序列,并克隆与已知蒽环类抗生素糖基转移酶序列同源性最高的snogE编码基因片段,构建基因中断质粒pSXW-2-62。利用接合转移的方法将其转入产诺加霉素的胡桃链霉菌中并发生同源重组,得到重组菌株mSXW-2-71,验证突变株基因型与发酵产物。结果表明,基因中断质粒以正确方式整合入基因组,中断了snogE基因;在突变株发酵产物中无法检测到诺加霉素产生。snogE基因编码的糖基转移酶在诺加霉素的生物合成途径中是必需的。  相似文献
3.
草胡椒属植物中木脂素类化合物主要包括断联木脂素、四氢呋喃型木脂素、二苄基丁内酯型木脂素、二苄基丁二醇型木脂素、双四氢呋喃型木脂素和环丁烷型木脂素,其生物活性包括抗肿瘤和细胞毒活性、雌激素样作用、抗炎作用、对植物源昆虫拒食活性的影响、抑制血管生成活性、抗艾滋病毒活性以及毒杀锥虫的活性等。综述了从草胡椒属植物中分离得到的木脂素类化合物及其生物活性,为该属植物的进一步开发提供参考。  相似文献
4.
目的 建立油菜花粉抗前列腺增生活性部位中亚麻酸酰胺、亚麻酸甘油酯、亚麻酸、棕榈酸4种脂肪酸类化合物的HPLC-ELSD分析测定方法。方法 采用YMC J’sphere ODS-H80(250 mm×4.6 mm,4 μm)色谱柱,乙腈-水梯度洗脱,体积流量为1.00 mL/min,ELSD漂移管温度85 ℃,气体为空气,气体体积流量为3.0 L/min,柱温为35 ℃。结果 亚麻酸酰胺、亚麻酸甘油酯、亚麻酸、棕榈酸的线性范围分别为57.88~347.28、33.04~198.24、159.40~956.40、83.68~502.08 μg/mL,平均回收率分别为100.4%、101.9%、101.1%、100.4%,RSD分别为3.68%、2.45%、1.56%、3.71%。结论 该方法同时测定油菜花粉抗前列腺增生活性部位中亚麻酸酰胺、亚麻酸甘油酯、亚麻酸、棕榈酸4种脂肪酸类化合物,具有结果准确、重现性好、操作简便等优点。  相似文献
5.
目的 将草胡椒素B(PB)制成固体分散体,改善PB的溶解度。方法 分别以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇4000(PEG 4000)和泊洛沙姆188(F68)为载体,采用溶剂法或溶剂-熔融法制备PB固体分散体,并进行饱和溶解度和体外溶出度试验;利用差热分析(DSC)、电镜扫描(SEM)和红外光谱(IR)研究固体分散体的性质。结果 以PVP为载体制备的PB固体分散体的溶解度和体外溶出度优于PEG 4000和F68,且以PB-PVP质量比1∶6为最佳。结论 以PVP为载体制备固体分散体能显著增加PB的溶解度,且以过饱和的固态溶液或无定型状态均匀分布在载体中。  相似文献
6.
目的:评价DPP- Ⅳ抑制剂类口服降糖药A化合物的线粒体毒性,从而探讨A化合物的可能毒性机制?方法:HepG2细胞培养基中分别加入曲格列酮50~300 μmol/L,培养24 h,或加入A化合物溶液100~300 μmol/L,培养24 h,CCK8细胞计数法测定细胞存活率?HepG2细胞培养基中分别加入曲格列酮100?200和225 μmol/L培养24 h,或加入A化合物溶液100?150和200 μmol/L培养24 h,化学发光法检测胞内ATP合成水平,荧光探针法检测胞内钙离子浓度?活性氧?线粒体膜电位(?驻Ψm)变化,透射电镜观察线粒体超微结构?结果:与溶媒对照组相比,曲格列酮50~300 μmol/L可以抑制细胞存活率,IC50为178 μmol/L;A化合物 100~300 μmol/L对细胞存活率有抑制作用,IC50为159 μmol/L?与溶媒对照组相比,曲格列酮≥200 μmol/L时导致线粒体ATP显著下降(P<0.01)??驻Ψm显著性下降(P < 0.01),≥100 μmol/L时可致活性氧水平和钙离子浓度显著升高(P < 0.05或P < 0.01)?A化合物≥100 μmol/L时ATP合成水平显著降低?钙离子浓度显著升高(P < 0.01),≥150 μmol/L时活性氧水平明显升高(P < 0.01),≥200 μmol/L时?驻Ψm显著性下降(P < 0.05),并可导致线粒体结构发生病变?结论:DPP- Ⅳ抑制剂类口服降糖药A化合物可以通过干扰线粒体代谢功能和结构而诱导线粒体损伤?  相似文献
7.
斑马鱼作为一种理想的模式动物广泛的应用于科学试验。近年来,随着对其研究与应用的增加,斑马鱼的使用数量与日俱增。但是对斑马鱼的饲养管理、试验操作和这一系列过程中的动物福利却较少有文献报道,更没有统一的标准。针对此问题,本文综述了相关法规、指导原则及文献,分别对斑马鱼的饲养管理(运输、环境条件、设备维护)、试验操作(繁育、识别标记、麻醉和安死术)和这些过程中的动物福利进行了讨论。旨在为从事斑马鱼相关研究的人员提供参考,保护斑马鱼的福利。  相似文献
8.
目的:探讨鳖甲煎丸对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化模型是否具有改善作用。方法:腹腔注射猪血清7周制成大鼠免疫性肝纤维化模型后,经口灌胃分别给予鳖甲煎丸3.0、1.5、0.75、0.375g/kg以及阳性药秋水仙碱0.25mg/kg。给药3周后,计算脏器系数;检测大鼠血清中的肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB);检测肝匀浆上清液中肝纤维化指标I型胶原(CoI)、Ⅲ型胶原(Com)、1V型胶原(C0Ⅳ)、Ⅲ型前胶原(PCUI)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN);并经Masson染色和HE染色观察不同组别大鼠肝脏的纤维化程度和肝脏细胞的形态。结果:①空白对照组、模型组和给药组动物的体质量和肝脏脏器系数差异均无统计学意义;②鳖甲煎丸的4个剂量组对猪血清致大鼠免疫性肝纤维化模型动物的相应肝功能指标也无明显影响;③3.0g/kg的鳖甲煎丸及0.25mg/kg的秋水仙碱均明显降低了肝匀浆CoI水平(P〈0.05);0.375、0.75、1.5、3.0g/kg的鳖甲煎丸均不同程度地降低了PCⅢ、HA和LN水平(P〈0.01或0.05);④Masson以及HE染色结果显示鳖甲煎丸的4个剂量组均不同程度地使肝脏的纤维化组织减少或消失,使大部分肝脏结构恢复正常。结论:鳖甲煎丸对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化具有良好的治疗作用。  相似文献
9.
机体中偶然出现的肿瘤细胞可被免疫细胞所识别,并作为异物而加以清除,但肿瘤在机体的免疫监视下仍能产生、发展和转移,表明肿瘤具有免疫逃逸的能力.本文综述了肿瘤免疫过程中肿瘤抗原表达、识别、加工、递呈、T细胞增殖、活化和分化以及免疫效应的产生等一系列环节中肿瘤免疫逃逸机制的研究进展.  相似文献
10.
法尼醇X受体(FXR)属于核受体超家族一员,在胆汁酸、三酰甘油、葡萄糖等的动态平衡中发挥重要作用。FXR拮抗剂可通过提高胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的活性而促进总胆固醇向胆汁酸转化,同时调节相关靶基因降低三酰甘油、低密度脂蛋白以及升高高密度脂蛋白水平。因此,FXR拮抗剂有望成为治疗高脂血症的新型药物。近年来,FXR拮抗剂的研究取得了较大进展,已获得多种结构类型的FXR拮抗剂。本文就近年来报道的FXR拮抗剂进行综述。  相似文献
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