鸦胆子素D联合紫杉醇对胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制研究

目的:探讨鸦胆子素D(BD)联合紫杉醇(Taxol)对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法:以Capan-2细胞为对象,采用磺酰罗丹明B法检测不同剂量BD(5、10、15、20μmol/L)、Taxol(10、20、30、40 nmol/L)、BD+Taxol(5μmol/L+10nmol/L、10μmol/L+20 nmol/L、15μmol/L+30 nmol/L、20μmol/L+40 nmol/L)作用48 h后的细胞增殖情况,并计算细胞存活率和药物合用指数(CI)。采用克隆形成试验检测BD(20μmol/L,下同)、Taxol(40 nmol/L,下同)、BD+Taxol(20μmol/L+40 nmol/L,下同)作用24 h后的细胞克隆集落形成情况,并计算克隆形成率;采用DAPI染色法观察BD、Taxol、BD+Taxol作用24 h后的细胞凋亡情况,采用Western blotting法检测的BD、Taxol、BD+Taxol作用后凋亡相关蛋白[Bcl-2、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、切割胱天蛋白酶3(Cleaved-caspase-3);药物作用48 h]以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白(药物作用4、6、12 h)的表达情况。结果:经10、15、20μmol/L BD,20、30、40 nmol/L Taxol以及两药上述剂量联合作用48 h后,细胞的存活率均显著降低,且联用组显著低于BD、Taxol同剂量单药组(P<0.05),各联用组(BD 5μmol/L+Taxol10 nmol/L、BD 10μmol/L+Taxol 20 nmol/L、BD 15μmol/L+Taxol 30 nmol/L、BD 20μmol/L+Taxol 40 nmol/L)的CI值分别为0.63±0.04、0.68±0.08、0.89±0.12、0.84±0.05。经20μmol/L BD、40 nmol/L Taxol以及两药上述剂量联合作用后,细胞的克隆集落形成有所减少,并伴有不同程度的染色质浓聚和细胞核皱缩,细胞的克隆形成率(24 h)以及Bcl-2(48 h)、RAPR(48 h)、Caspase-3(48h)、JNK(4、6 h,Taxol单药组除外)的相对表达量均显著降低,Cleaved-caspase-3(48 h)、p-JNK(4、6、12 h)的相对表达量均显著升高,且BD+Taxol联用组均显著优于同时间点BD、Taxol同剂量单药组[JNK(4、6、12 h)、p-JNK(4 h)除外](P<0.05或P<0.01)。结论:BD、Taxol均可抑制人胰腺癌Capan-2细胞的增殖并促进其凋亡,且两者联合具有一定的协同作用,效果优于任一药物单用。上述作用可能与激活Caspase通路以及JNK磷酸化等途径有关。     

棕色脂肪组织的无创检测及在非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用研究进展

近年来，人们对棕色脂肪组织在成人中发挥的病理生理作用产生了极大的兴趣。棕色脂肪组织具有将多余食物能量转化为热能的固有能力，可以成为一种减少肥胖发生的手段，已成为目前医学研究的焦点。本文就棕色脂肪组织的无创检测及其在非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用研究进展作一综述。     

林胜友主任中医师治疗化疗相关性呕吐经验

[目的]分析讨论林胜友主任中医师治疗化疗相关性呕吐的临证经验。[方法]通过跟师学习,归纳整理病案,结合林师平日指导,分析化疗相关性呕吐的病因病机,总结林师治疗该疾病的临床经验,并附验案加以佐证。[结果]林师认为化疗相关性呕吐的病因病机为中焦土虚,胃气失和;腑实不通,浊气犯胃;肝胆不利,气机失转,治疗上主要从健脾土、通肠腑、畅气机着手。所举验案,患者辨证为脾虚腑实,兼有肝郁,采取健脾通腑,辅以疏肝解郁治疗化疗相关性呕吐,疗效明显,顺利帮助患者度过化疗阶段。[结论]林师治疗化疗相关性呕吐采用健脾、通腑、疏肝治法,通补并用,可以取得较好的疗效。     

香草扶正合剂对Lewis肺癌模型小鼠癌细胞自噬的影响

[目的]探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)的抑瘤作用及其机制。[方法]建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,随机分为模型组,XCFZ低、中、高剂量组,顺铂组(阳性对照组),并设置空白组。模型组以双蒸水0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量组分别以XCFZ低、中、高剂量0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量浓度分别为0.93g·mL-1、1.86g·mL-1、3.72g·mL-1;顺铂组以0.64mg·mL-1的顺铂溶液0.1mL·(2d)-1腹腔注射,同时以双蒸水0.2mL·d-1灌胃。每天固定时间给药,给药14d。称取小鼠体质量、瘤质量和去瘤后体质量,并计算抑瘤率,常规石蜡切片观察肿瘤组织病理改变,透射电镜观察瘤组织自噬小体,Western blot检测瘤组织自噬相关基因Beclin1、自噬相关蛋白5(autophagy related 5,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3-β(microtubule associated protein 1 light chain 3-β,LC3b)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测瘤组织Beclin1、Atg5、LC3b、Unc-51样自噬激活激酶1(Unc-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)mRNA表达水平。[结果]与模型组比较,各给药组瘤质量降低(P＜0.01)。顺铂组抑瘤率最高,其次为XCFZ中剂量组。与模型组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.05),增加肿瘤组织Atg5、Beclin1、LC3b蛋白及Atg5、Beclin1、LC3b、ULK1 mRNA表达水平,并升高Bax/Bcl-2 mRNA比值(P＜0.05,P＜0.01)。与顺铂组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.01),增加肿瘤组织Atg5、LC3b蛋白及Beclin1 mRNA表达水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05)。[结论]XCFZ对肺癌小鼠模型肿瘤生长具有抑制作用,其抑瘤作用可能与自噬诱导相关;或与增加自噬相关蛋白Beclin1、Atg5表达,引发凋亡相关。     

肠道菌群影响生命早期神经发育的研究进展

越来越多的证据表明,肠道菌群通过肠-脑轴机制在神经发育早期发挥了重要作用,并通过神经系统病理生理过程影响脑功能和个体行为。肠-脑轴是肠道和大脑之间的信息交流系统,肠道菌群与大脑之间的双向调控受到众多内外因素的影响,包括免疫系统、神经内分泌、迷走神经及肠道菌群代谢物等。肠道菌群的早期定植、塑造具有动态性和阶段性特点,影响这种早期定植、塑造的因素是该研究领域的热点之一,其中包括母体菌群定植、生产方式、抗生素的使用、营养状况及各种疾病等,相关研究目前主要集中在动物研究阶段。部分因素可影响早期肠道菌群在特定时间窗内的分布,从而导致大脑结构和功能改变。靶向性肠道菌群的治疗策略对部分神经系统疾病有一定的疗效,但仍需进一步的研究来证实。     

单人经口胆道镜与射频消融术同台诊治不可切除肝外胆管癌的可行性与安全性研究

目的　探讨单人经口胆道镜联合射频消融术（radiofrequency ablation,RFA）同台诊治不可切除肝外胆管癌的可行性和安全性。方法　回顾2013年1月至2022年1月期间在杭州市第一人民医院治疗的90例可疑肝外胆管癌患者资料,根据诊治过程最终纳入69例,分为常规分次组（n=34）：先经内镜逆行胰胆管造影术（endoscopic retrograde cholangiopancreatography, ERCP）+细胞刷或单人经口胆道镜检查取得活检组织,待获得阳性病理结果再次行ERCP+RFA;同台诊治组（n=35）：行ERCP经单人经口胆道镜检查胆道并对病灶行直视下活检,对术中快速病理结果确定为恶性肿瘤的患者同台行RFA。对比两组操作成功率、术后胆红素恢复情况、ERCP次数、术后不良事件发生率、住院时间及费用。结果　两组患者均成功完成内镜下RFA,操作成功率100.0%（69/69）。分次组和同台组总胆红素术后下降50%及以上的患者比例差异无统计学意义［52.94%（18/34）比57.14%（20/35）,χ2=0.27,P=0.604］。分次组ERCP次数明显多于同台组［（2.59±0.50）次/人比（1.00±0.00）次/人］,差异有统计学意义（t=3.13,P=0.002）。分次组和同台组术后总体不良事件发生率差异无统计学意义［（67.65%（23/34）比65.71%（23/35）,χ2=2.83 ,P=0.626］。分次组住院时间明显长于同台组,差异有统计学意义［（17.41±9.13） d比（7.91±3.48） d,t=5.32,P=0.001］。分次组住院费用明显多于同台组,差异有统计学意义［（37 127.88±3 763.77）元比（23 980.69±4 767.15）元,t=6.61,P=0.001］。结论　单人经口胆道镜直视下诊断+活检联合RFA同台诊治不可切除肝外胆管癌可减少ERCP次数,并且不增加术后不良事件发生率,是一种安全有效且具有较高成本-效益比的诊治方法。     

五步复位法治疗腰椎间盘突出症临床观察

[目的]观察五步复位法治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。[方法]将2018年4月至2019年6月于浙江中医药大学附属第三医院住院的符合标准的124例腰椎间盘突出症患者按随机数字表法分为两组,五步复位法组63例采用五步复位法治疗,传统推拿法组61例采用传统推拿法治疗,两组患者均隔日治疗1次,每周3次,1周为1个疗程。治疗2个疗程及随访1年后观察临床疗效,并比较两组患者治疗前后疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)及改良腰椎功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)。[结果]治疗后五步复位法组总有效率为90.5%,传统推拿法组总有效率为86.9%,组间比较差异有统计学意义(P0.05);1年后随访五步复位法组总有效率为87.3%,传统推拿法组总有效率为73.8%,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后及1年后随访VAS评分、ODI均较治疗前降低,差异有统计学意义(P0.01)。组间比较,治疗后五步复位法组VAS评分、ODI均较传统推拿法组降低,差异有统计学意义(P0.01);1年后随访时五步复位法组VAS评分同传统推拿法组差异无统计学意义(P0.05),ODI低于传统推拿法组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]五步复位法治疗腰椎间盘突出症可明显缓解疼痛、改善患者腰椎功能,且具有可操作性强、疗效显著等特点,值得临床推广应用。