外周血单个核细胞内人类免疫缺陷病毒DNA和RNA定量对病毒转录活性的区分

目的基于人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HIV-1总DNA和RNA定量检测结果对感染细胞内病毒的转录活性进行区分。方法采集2017年10月至2018年12月于哈尔滨医科大学附属第四医院感染科就诊的HIV-1感染者血液样本,分离PBMCs细胞,采用PCR荧光探针法对PBMCs细胞内HIV-1总DNA和RNA进行定量检测,并计算两者比值(Ratio)。根据Ratio值筛选出HIV-1转录活跃组样本和相对非活跃组样本,另外选择健康人PBMCs样本作为对照组。对3组样本进行基因转录组表达谱检测以及人口特征差异性检验,并对基因表达谱检测结果进行主成分分析以验证对3组样本病毒转录活性区分的准确性。结果从60例感染HIV-1患者的PBMCs样本中筛选出HIV-1转录活跃组样本(10例)和相对非活跃组样本(11例),另外选择6例健康人PBMCs样本作为对照组。其中转录活跃组样本Ratio值为165.2~738.93,平均为(339.27±189.68);相对非活跃组Ratio值为4.67~42.39,平均为(17.65±11.78)。转录活跃组和相对非活跃组样本间的CD4+T细胞计数(P=0.049)和Ratio值(P<0.001)差异均具有统计学意义;3组样本年龄(P=0.989)和性别(P=0.650)分布差异无统计学意义。对3组样本的PBMCs基因表达谱主成分分析结果显示:对照组与HIV-1感染者(包括转录活跃组和相对非活跃组)间区分明显。转录活跃组和相对非活跃组间有部分样本重合,同时结果也显示当HIV-1感染者的CD4+T淋巴细胞计数与健康人无显著差异时,其细胞内的基因表达与健康人接近。结论基于HIV-1总DNA和RNA定量检测结果及两者间比值可以较好地区分PBMCs内病毒转录活性。HIV-1感染细胞内部病毒的不同转录激活状况可导致其基因表达谱的异质性。     

新冠肺炎临床评价核心指标集比较分析＊

目的 对已公开发表的新冠肺炎核心指标集及其研究方法进行比较分析，为临床试验和证据转化研究提供参考信息。方法 计算机检索COMET数据库，并补充检索CNKI、WanFang、PubMed、Web of Science、The Cochrane Library等数据库，收集发表的新型冠状病毒肺炎（Coronavirus Disease 2019，COVID-19）核心指标集（Core Outcome Set，COS）研究，检索时间截至为2021年3月31日。按照纳入排除标准筛选文献，并提取研究基本信息、研究方法及指标数据，对其进行描述性分析。结果 共纳入5项COVID-19核心指标集相关研究（4项为COVID-19-COS研究，1项为COVID-19核心指标测量工具研究）。相同的结局指标包括死亡率、病毒核酸检测、临床进展、恢复期、临床症状评分及临床分型等。指标来源主要来自临床试验注册平台和问卷调查；达成共识的方法主要采用共识会议；利益相关群体中临床专家、方法学专家和医疗管理人员涉及较多。结论 不同的新冠肺炎核心指标集研究有一定的共性，但由于应用场景不同，也存在一定差异。随着对疾病认识的深化，相关COVID-19核心指标需要加强测量方法和疗程推荐。     

染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

本研究拟探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞LNCaP和CWR22RV1的增殖、迁移和侵袭能力的影响。一、材料与方法1.材料:前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1(中国科学院上海生命科学研究院);Genistein(天津科瑞泰科技有限公司);RPMI 1640、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶(美国Gibco公司);E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin,Abcam公司);聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)试剂盒、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上样缓冲液(×5)及蛋白质印迹法(Western blot)试剂盒(上海市碧云天生物公司);2.实验方法:采用噻唑蓝(MTT)实验、划痕实验和Transwell实验检测Genistein对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、CD44和Oct-4的表达水平。     

呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对耐药肝癌细胞QGY-7701 的体外抑制作用

目的:探索呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对人肝癌QGY-7701耐药细胞株的体外抗肿瘤作用。方法:运用CCK8法、Transwell实验和流式细胞仪检测凋亡技术观察细胞功能学变化，运用Western Blot蛋白免疫印迹技术探索其可能的作用机制。结果:XP-15可明显增强紫杉醇对耐药QGY-7701细胞的抑制作用，XP-15联合紫杉醇作用于耐药QGY-7701细胞24 h后，QGY-7701细胞活力明显减弱，且其侵袭迁移能力明显降低，同时流式细胞仪凋亡检测提示细胞凋亡百分比明显增加。Western Blot蛋白免疫印迹亦证实细胞抗凋亡蛋白bcl-2表达明显降低，肝癌增殖分化相关PI3K及AKT蛋白分子表达减少。结论:XP-15具有增敏紫杉醇诱导耐药QGY-7701细胞凋亡同时抑制其增殖活力的作用，其作用机制可能与下调PI3K-AKT通路活性，同时减少bcl-2抑制凋亡蛋白表达相关。     

Modulating effects of preconditioning exercise in the expression of ET-1 and BNP via HIF-1α in ischemically injured brain

It is well-known that in ischemia-induced hypoxia, hypoxia-inducible factor -1α (HIF-1α) is critical in triggering expression of its downstream target genes to produce several products, such as erythropoietin (EPO), vascular endothelial growth factor (VEGF), nitric oxide synthesis (NOS), glucose transportor-1 (GLUT-1), insulin-like growth factor (IGF), which further promote erythropoiesis, angiogenesis, vasodilation and capitalization of glucose to overcome hypoxia. Meanwhile, as the factors with opposite effects on blood vessels, endothelin-1 (ET-1) and brain natriuretic peptide (BNP) also stand out strikingly in ischemic pathophysiology. To this day, several preconditioning manners have been used to induce tolerance to ischemia. During our research, exercise preconditioning was applied and it was demonstrated that HIF-1α triggered expression of ET-1 and BNP, which confirmed their downstream target genes for HIF-1α. And ET-1 may influcence expression of BNP to some degree but not the only factor which regulates BNP expression. Therefore, our findings suggest exercise preconditioning may provide protection to the ischemic brain tissue via HIF-1α which in turn increases expression of BNP to cause vasodilation in cooperation with some other factors, such as VEGF and EPO, to increase the blood flow in the ischemic area and then relieve the injuries induced by ischemia.