阿克替苷通过激活血红素加氧酶-1抑制H_(2)O_(2)诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤北大核心

目的研究阿克替苷对视网膜神经节细胞(RGC-5)的保护作用及其机制。方法将RGC-5细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、阿克替苷+H_(2)O_(2)组(1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷分别预处理细胞2 h),MTT法检测各组细胞活力;后续实验阿克替苷+H_(2)O_(2)组选择阿克替苷30μmol·L^(-1)作为治疗浓度,荧光探针H2DCF-DA检测活性氧(ROS)产生和罗丹明123检测线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bcl-2/Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。机制研究中首先用不同浓度阿克替苷单独处理RGC-5细胞24 h,Western blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平,进一步锌原卟啉(ZnPP)预处理RGC-5细胞1 h,而后30μmol·L^(-1)阿克替苷单独预处理后与200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)共孵育24 h,通过MTT法测定细胞活力。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组中细胞活力明显降低(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组中10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷预处理可显著提高细胞活力(P<0.05、P<0.01)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成明显增加,线料体膜电位显著降低,同时Bcl-2/Bax比值降低和Caspase-3蛋白相对表达量增加(均为P<0.05)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成减少,线粒体膜电位增加,Bcl-2/Bax比值提高,Caspase-3蛋白相对表达量减少(均为P<0.05)。与阿克替苷未处理组相比,阿克替苷剂量依赖性诱导HO-1蛋白的表达,与阿克替苷+H_(2)O_(2)组相比,加入ZnPP后细胞活力降低(P<0.01),说明HO-1抑制剂ZnPP降低了阿克替苷对H_(2)O_(2)损伤的抑制作用。结论阿克替苷能够通过上调HO-1表达抑制H_(2)O_(2)诱导的RGC-5氧化应激损伤。     

原发性高血压患者红细胞分布宽度与肾素活性、肱踝动脉脉搏波传导速度和颈动脉斑块的相关性

目的 探讨原发性高血压患者红细胞分布宽度(RDW)与血浆肾素活性、肱踝动脉脉搏波传导速度(baPWV)、颈动脉斑块的相关性.方法 连续入选河南省人民医院2016年1月至2019年11月确诊的原发性高血压患者531例.采用全自动血液细胞检测仪,测定RDW.根据RDW四分位数将患者分为四组,比较四组血浆肾素活性、baPWV、颈动脉斑块发生率的差异.结果 RDW 1～4四分位组立位肾素活性分别为0.6(0.3～1.6)、0.9(0.4～2.2)、1.4(0.3～2.7)、1.8(0.4～4.3)μg/(L·h);左侧baPWV分别为1476(1334～1682)、1498(1354～1703)、1568(1436～1754)、1612(1447～1834) cm/s,右侧baPWV分别为1514(1337～1694)、1504(1367～1727)、1576(1444～1802)、1612(1450～1843) cm/s;颈动脉斑块发生率分别为32.6％、43.8％、48.5％、54.0％;4组间比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).相关性分析显示,RDW与立位肾素活性、baPWV(右侧)和baPWV(左侧)呈正相关(相关系数分别为0.229、0.224和0.243,均P＜0.01).颈动脉有斑块组RDW显著高于颈动脉无斑块组(P=0.001).采用偏相关分析校正24 h收缩压后,结果显示颈动脉斑块、立位肾素活性、右侧baPWV和左侧baPWV与RDW呈正相关,相关系数分别为0.095、0.194、0.158和0.152(均P＜0.01).结论 原发性高血压患者RDW与立位肾素活性、baPWV及颈动脉斑块呈正相关.     

心肺转流期间突发电力中断的体外循环应急处理1例:病例报告

1病例资料患者,女,52岁,体质量46 kg,身高147 cm,体表面积1.37 m²,择期手术下行"二尖瓣置换+三尖瓣成形术"。体外循环使用Stockert V型心肺机(下称S5)连续血气监测系统(Maquet-BMU40),笔记本电脑(IBM-X220)作为电子记录模块[4],上述设备主电源线连接至抗电涌保护插板(公牛,GN-H3053)持续供电,应用Fusion氧合器(MedtronicBB841)等耗材.     

促红细胞生成素对视网膜Müller细胞光损伤的作用及机制

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对视网膜Müller细胞紫外线光损伤的作用及机制.方法 将培养的小鼠原代Müller细胞分为无紫外线组(对照组)和紫外线组,每组均用不同浓度药物进行处理,采用噻唑蓝(MTT)法检测EPO对小鼠原代Müller细胞抗紫外线的保护作用.采用蛋白质免疫印迹法检测EPO活化Müller细胞中蛋白激酶B(Akt)水平;将Müller细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组(DMSO组)和Akt抑制剂MK-2206组(MK-2206组).以上细胞均以3种方式进行处理:①无紫外线组不处理;②紫外线组采用UV辐射(30 mJ/cm2)30 min;③紫外线+药物组,采用1μg/mL的EPO预处理30 min,再进行UV(30 mJ/cm2)辐射30 min细胞进一步按照指定时间培养,采用MTT检测细胞活性.将24只小鼠分为无注射组(小鼠右眼,n=6)、注射组(小鼠左眼,n=6)、光照组(无注射眼接受光照,n=6)、光照+注射组(注射眼接受光照,n=6)共4小组,对各组小鼠进行闪光视网膜电图检查,以评估视觉功能受损情况.结果 紫外线组不同浓度EPO预处理后的细胞MTT检测的吸光度(OD)值与无紫外线组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);EPO (0.1、1、10 μg/mL)预处理后的细胞MTT检测的OD值较未处理细胞大幅提高,差异有统计学意义(P＜0.01);EPO诱导的Müller细胞保护作用也随EPO浓度的增高(0.1、1μg/mL)而增强,差异有统计学意义(P＜0.05),而1、10 μg/mL浓度处理的细胞保护作用比较,差异无统计学意义(P=0.114).采用指定浓度的EPO(0、0.1、1、10 μg/mL)处理Müller细胞1h,Western blot检测结果表明,p-Akt(Ser-473)和Akt1蛋白表达水平增高,且在0.1、1μg/mL浓度范围存在浓度依赖性.无注射组和注射组振幅比较,差异无统计学意义(P=0.17);无注射组与光照组及光照+注射组振幅比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).光照+注射组和光照组振幅比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EPO通过激活Müller细胞Akt信号通路减轻小鼠视网膜光损伤.     

基于TCA循环关键酶测定研究督灸治疗早期强直性脊柱炎患者关节活动度的疗效及机制＊

目的 基于TCA循环（三羧酸循环，tricarboxylic acid cycle）关键酶测定研究督灸治疗早期强直性脊柱炎（AS）肾虚督寒证患者关节活动度的疗效及生物学机制。方法 110例早期AS肾虚督寒证患者随机分为观察组和对照组，各55例。对照组口服甲氨蝶呤+洛索洛芬钠，观察组在对照组治疗基础上给予督灸，疗程均为12周。观察治疗前后患者的病情活动指数（bath ankylosing spondylitis disease activity index，BASDAI）、功能指数（bath ankylosing spondylitis fundation index，BASFI）、活动度衡量指数（bath ankylosing measure index activity index，BASMI）、总和指数（bath ankylosing spondylitis patient slobal，BAS-G）、指-地距、枕-墙距、胸廓活动度、Schober试验水平和早期AS肾虚督寒证中医辨证（肾虚督寒证）评分；检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-18（IL-18）、血沉（ESR）和C-反应蛋白（CRP）含量；检测TCA循环关键酶柠檬酸合成酶（citrate synthase，CS）、异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）及α-酮戊二酸脱氢酶（α-ketoglutarate dehydrogenase，α-KGDHC）的水平；比较治疗12周患者的临床疗效及随访6个月复发率。结果 临床研究过程脱落6例。观察组总有效率96.2%，明显高于观察组的82.4%（P<0.05）；观察组随访6个月复发率5.7%，明显低于对照组的21.6%（P<0.05）。治疗12周后，观察组患者BASDAI、BASFI、BASMI、BAS-G、指-地距、枕-墙距和肾虚督寒证评分较对照组明显下降（P<0.05），胸廓活动度和Schober试验较对照组明显升高（P<0.05）；观察组患者TNF-α、IL-18、ESR、CRP、CS和IDH水平较对照组明显下降（P<0.05），α-KGDHC水平较对照组明显升高（P<0.05）。结论 督灸可以有效改善早期AS肾虚督寒证患者的临床症状，复发率低，值得临床推广应用。     

基于网络药理学和分子对接探讨益肾健骨方治疗绝经后乳腺癌患者骨质疏松的机制及实验验证＊

目的 运用网络药理学和分子对接的方法研究益肾健骨方治疗绝经后乳腺癌骨质疏松症的作用机制。方法 通过中药系统药理数据库和分析平台（TCMSP）和中医综合数据库（TCMID）获取益肾健骨方的活性成分和靶点，以口服生物利用度（OB）≥30%和类药性（DL）≥0.18为阈值进行潜在活性成分筛选。通过药物靶标数据库（TTD）、药物数据库（DrugBank）、疾病相关的基因与突变位点数据库（DisGenet）数据库收集疾病靶点，筛选出与益肾健骨方的交集靶点。运用Cytoscape3.7.2构建疾病-化合物-靶点网络，蛋白相互作用网络（PPI）。采用Metascape进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因百科全书（KEGG）通路富集分析，通过分子对接将关键靶点和潜在靶点与活性成分的相互作用进行验证。结果 益肾健骨方中共筛选到药代动力学较好的活性成分β-谷甾醇、谷甾醇、豆甾醇、槲皮苷、山柰酚等113种，得到GO富集条目（P<0.05）1048条，KEGG通路富集得到84条信号通路（P<0.05）。分子对接结果显示槲皮苷与核心靶点和潜在靶点结合稳定，涉及肿瘤通路、人乳头瘤病毒感染通路、PI3K-Akt信号通路等。大鼠体内实验验证益肾健骨方可以增加骨小梁密度及骨组织胶原溶剂比，改善大鼠骨质疏松状态。结论 益肾健骨方可能通过多靶点、多通路治疗乳腺癌绝经后骨质疏松症。     

CT引导下经皮穿刺二次活检诊断肺部病变的可行性及安全性

目的 评价CT引导下经皮二次穿刺活检用于明确诊断肺部病变的可行性及安全性。方法 回顾性分析40例接受2次肺穿刺活检患者的临床、影像学及随访资料,根据最终诊断结果,比较2次活检的诊断准确率,分析并发症及初次活检误诊的危险因素。结果 40例中,17例初次活检诊断结果与最终诊断一致(确诊组)、23例诊断不一致(误诊组),诊断准确率为42.50%(17/40),并发症发生率为27.50%(11/40);39例二次活检诊断结果与最终诊断一致,诊断准确率为97.50%(39/40),并发症发生率为25.00%(10/40)。二次活检诊断准确率明显提高,并发症发生率与初次活检差异无统计学意义(P＞0.05)。组间病灶性质和气胸发生率差异均有统计学意义(P均＜0.05)。结论 CT引导下经皮二次穿刺活检用于明确诊断肺部病变安全、可行。